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文档简介

血液系统疾病流式细胞术分析第1页/共35页流式细胞术在血液病中的应用：急性白血病免疫分型淋巴细胞增殖性疾病免疫分型骨髓增生异常综合征辅助诊断微小残留白血病ZAP70、P糖蛋白等预后指标检测PNH（CD55、CD59）细胞周期分析CD34+细胞绝对计数第2页/共35页标本种类外周血骨髓胸腹水脑脊液淋巴结细针穿刺液活检组织第3页/共35页标本要求

室温或2～4℃72h内骨髓：急性白血病，MDS，MM外周血：CD55、CD59，LGL第4页/共35页标本前处理：

离心收集细胞（胸腹水、脑脊液）或制备细胞悬液（活检组织）了解标本中细胞组成（瑞氏染色、台盼蓝染色）第5页/共35页第6页/共35页细胞浓度调整第7页/共35页一般处理步骤胞膜抗原：标记-溶血-洗涤胞浆抗原：标记-溶血-固定/破膜-标记-洗涤免疫球蛋白：溶血-洗涤-标记-洗涤第8页/共35页设门方案SSC/FSCCD45CD19、CD20CD3、CD5第9页/共35页第10页/共35页光散射特征与细胞形态的关系第11页/共35页正常骨髓淋巴单核粒细胞CD45SSC原始嗜碱嗜酸Blastwindows第12页/共35页抗体设置

髓系一般标志：CD13、CD33、CD117、MPO其他标记：CD14、CD64、CD4CD71、GlyACD61、CD41CD36其他非髓系标记：CD2、CD5、CD7、CD56、CD19第13页/共35页骨髓增生异常综合症（MDS）主要表现为粒系及单核系抗原表达异常正确的结果解释有赖于良好的质量控制和标本细胞活性第14页/共35页第15页/共35页B淋巴细胞κ、λ确定克隆性阶段性B细胞标记物：CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7

其他标记物：CD11c、CD25、CD103、CD38第16页/共35页第17页/共35页T/NK细胞抗原表达缺失和强度变化T淋巴细胞：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8NK细胞：CD16、CD56第18页/共35页benignMalignant第19页/共35页结果分析分析的重点在于确定每一个细胞标记的存在与否以及表达的强弱（模式识别）。每个抗体在阳性细胞上的表达百分率并不重要。以残存正常细胞（如正常成熟淋巴细胞）作为分析参照物。

结合细胞形态可事半功倍。第20页/共35页AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5第21页/共35页AML-M6非造血细胞非特异性染色（死亡细胞）ALL第22页/共35页血小板附着于原始粒细胞所致CD61阳性拖尾巨核细胞白血病第23页/共35页第24页/共35页第25页/共35页第26页/共35页第27页/共35页第28页/共35页微小残留白血病：灵敏度为1/1000～1/10000

以初诊时免疫表型作为设置抗体组合的依据排除非特异性染色细胞和杂质的影响第29页/共35页第30页/共35页第31页/

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