动物病毒学：第12章 正链RNA病毒

第十一章正链RNA病毒12.1微RNA病毒科(Picornaviridae)12.4黄病毒科(Flaviviridae)12.5戊肝病毒科(Hepeviridae）12.6嵌杯病毒科(Caliciviridae)12.7星状病毒科(Astroviridae)12.8披膜病毒科(Togaviridae)12.2冠状病毒科(Coronaviridae)12.3动脉炎病毒科(Arteriviridae)第12章

正链RNA病毒微RNA病毒科双顺反子病毒科传染性软化症病毒科海洋RNA病毒科伴生及豇豆病毒科12.1微RNA病毒科(Picornaviridae)2011年ICTV第9次分类报告设立微RNA病毒目又称为“小RNA病毒科”形态：病毒粒子呈球形，无囊膜，直径27-30nm结构：衣壳呈二十面体对称12.1.1微RNA病毒科的共同特征HumanpoliovirusRhinovirus14FootandMouthDiseaseVirus(FMDV)12.1微RNA病毒科(Picornaviridae)基因组组成：基因组为单股正链线状RNA，大小约7.2-8.4kb病毒编码蛋白：Polyprotein的切割(以FMDV为例)P1区编码VP1、VP2、VP3和VP4蛋白：构成病毒的衣壳P2区编码2A、2B、2C蛋白P3区编码3A、3B、3C和3D蛋白微RNA病毒科有230多个成员，可分为12个属肠病毒属口蹄疫病毒属肝病毒属心病毒属副孤病毒属捷申病毒属12.1.2微RNA病毒科的分类嵴病毒属马鼻病毒属猴禽猪肠病毒属震颤病毒属塞内卡病毒属禽肝病毒属（1）肠病毒属(Enterovirus):脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)柯萨奇病毒(Coxsackievirus)人肠道病毒(Huamnenterovirus)

手足口病，hand,footandmouthdisease（HFMD）猪水疱病病毒(Swinevesiculardiseasevirus,SVDV)：引起猪水疱病，症状与口蹄疫相似猪肠病毒甲型(porcineenterovirusA)：引起腹泻、心包炎牛肠病毒(Bovineenterovirus)：无症状感染猴肠病毒甲型(SimianenterovirusA)：无症状感染（2）口蹄疫病毒属(Aphthovirus)（3）肝病毒属(Hepatovirus)口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus，FMDV)牛鼻病毒：温和性鼻炎甲型肝炎病毒(HAV)：感染人和猴猪脑心肌炎病毒(SwineEncephalomyocarditisvirus，EMCV)：引起猪的急性致死性心肌炎和母猪的繁殖障碍鼠脑心肌炎病毒——基础研究的模式病毒，研究病毒持续感染的模型（4）心病毒属(Cardiovirus)（5）副孤病毒属(Paraechovirus)人副肠孤病毒（6）捷申病毒属(Teschovirus)捷申病病毒(Teschendisease)：以前称猪肠道病毒1型，引起猪的脑脊髓炎（7）嵴病毒属(Kobuvirus)人爱知病毒(Aichivirus)：腹泻猪、牛嵴病毒(Porcine/Bovinekobuvirus，PKV/BKV)：引起腹泻（8）马鼻病毒属(Erbovirus)马乙型鼻病毒(EquinerhinitisBvirus)：鼻炎（9）猴禽猪肠病毒属(Sapelovirus)猪猴禽猪肠病毒(PorcineSapelovirus)：感染猪，致病性未定（10）震颤病毒属(Tremovirus)禽脑脊髓炎病毒(AEV)：引起禽的脑脊髓炎（12）塞内卡病毒属(Senecavirus)塞内卡谷病毒：感染猪，致病性待定（11）禽肝炎病毒属(Avihepatovirus)鸭肝炎病毒(DHV)：感染雏鸭，引起急性肝炎是最早发现的动物病毒：1897年德国细菌学家莱夫勒(Loeffler)和弗施(Frosch)证实了FMDV的存在。12.1.3口蹄疫病毒（FMDV）感染偶蹄类动物，烈性传染病，易感动物有80多种，被OIE列为法定必报病，我国农业部列为一类动物疫病，也被称为“政治经济病”。（1）FMDV的4种粒子:完整的病毒颗粒：具有感染性、型特异性和免疫原性。不含RNA的空衣壳：不具有感染性，但具型特异性和免疫原性。FMDV衣壳蛋白亚单位（壳微体）：无感染性，免疫原性差。病毒感染相关抗原（VIAAg，依赖RNA的RNA多聚酶）：无型特异性，而有群特异性。（2）FMDV的抗原性与血清型血清型：O、A、C、SAT1、SAT2和SAT3（南非1、2、3型）、Asial型（亚洲I型）80多个亚型各型之间彼此几乎没有交叉免疫力。同型内的亚型间只有部分交叉免疫力。为什么FMDV难以防控？南美、欧洲主要有O、A、C三型非洲O、A、C和SAT1、SAT2、SAT3亚洲O、A、C和Asial我国以O型为主，其次是A型和Asial型，C型很少不同国家或地区的FMDV血清型：感染偶蹄类动物，高度接触性，发烧、精神沉郁、水疱，高发病率，低死亡率，但对生产性能影响很大。据OIE对178个国家和地区调查统计，确认发生过口蹄疫的有132个，从未发生过的仅有30个（大部分是岛国），其余16个情况不明。（3）口蹄疫的分布、流行与危害美国1929年加拿大1952年墨西哥1954年澳大利亚1972年宣布消灭口蹄疫的部分国家危害严重，损失巨大(OIE2012年年度报告）英国口蹄疫(2001)

韩国口蹄疫(2010)

疫情扑杀动物数经济损失1997年台湾600万头80亿美元2001年英国450万头直接损失128亿、出口损失320亿美元2010年日本(MYA98毒株)29万头10亿美元2010年韩国(MYA98毒株)210万头11.41亿美元我国深受其害A型O型Asia1型2005-2014年，我国公布110次疫情，有三个血清型（Asia1=46，O=37，A=27）。毒株复杂、变异严重。湖北武汉（2009）动物扑杀赔偿费达2亿元广东茂名（2013）贵州天柱（2011）四川广元（2012）（4）口蹄疫的诊断、预防与控制病毒的分离：采取新鲜未破溃的水疱（水疱皮和水疱液）作分离病毒的材料。※水疱液的采集可用灭菌的1-2ml注射器直接由未破溃的水疱内抽取。牛：采舌表面的水疱皮猪：采鼻突部或蹄叉间、蹄冠的水疱皮预防与控制：扑杀、免疫无病。①传染性强，发病率高，传播迅速接触传染，空气传播，跨洲际、跨国界远距离传播。②易感动物众多猪、牛、羊等偶蹄类家畜和野生动物70多种。③病毒型多而且易变血清型（7种），遗传拓扑型（仅O型就有11个拓扑型），遗传谱系，表型差异的毒株。④病毒持续感染反刍家畜动物可持续带毒，个体数月至数年，群体数年至数十年。⑤现有疫苗效力有限仅能保护动物临床不发病，不能完全阻断感染，不能获得终生免疫，不能消除持续带毒。为什么FMDV难以防控？That’sallfolks!CERTIFIEDFMDFREE----控制和消灭口蹄疫，一个重要的问题是如何区分疫苗免疫动物与野毒感染动物。区分口蹄疫疫苗免疫动物与野毒感染动物的鉴别诊断方法（3ABC-ELISA）口蹄疫病毒的基因组结构鉴别诊断野毒感染动物疫苗免疫动物灭活疫苗结构蛋白基因工程疫苗只产生针对结构蛋白的抗体病毒繁殖结构蛋白非结构蛋白针对结构蛋白的抗体针对非结构蛋白的抗体精制的疫苗

常规疫苗

灭活疫苗组织灭活疫苗、细胞培养病毒灭活疫苗弱毒疫苗鸡胚驯化的弱毒疫苗等病毒毒力返强、病毒灭活不彻底、活病毒逃逸疫苗加工厂等不安全因素口蹄疫疫苗新型疫苗基因工程亚单位疫苗合成肽疫苗基因缺失疫苗病毒活载体疫苗（痘病毒、腺病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、伪狂犬病毒）核酸疫苗等12.1.4猪水疱病病毒（SVDV）

1966年首先发现于意大利，1971年见于香港，随后英国、奥地利、法国、波兰、比利时、德国、日本、瑞士等国家相继报道。症状与口蹄疫相似，家畜中仅感染猪，人偶尔可感染，乳鼠感染后麻痹致死。与口蹄疫相比，能在低pH条件下存活。12.1.5嵴病毒(Kobuvirus)第8次国际病毒分类报告根据其病毒颗粒呈嵴状外观的特点，新建嵴病毒属(Kobuvirus)。代表性病毒为人爱知病毒（Aichivirus)在动物中有猪Kobuvirus、牛Kobuvirus：主要引起腹泻。根据国际上最近几年的流行病学调查，感染率相当高。猪Kobu病毒的基因组结构猪Kobuvirus感染率特别高，可能引起仔猪的腹泻100nm12.2冠状病毒科(Coronaviridae)12.2.1冠状病毒科的共同特征形态：病毒粒子近似球形或呈肾形，直径80-220nm结构：有囊膜与纤突，衣壳为螺旋对称宿主：感染人和各种动物，但特定病毒的宿主范围比较窄。基因组：单股正链RNA病毒，是基因组最大的RNA病毒，长度为27-32kb，至少编码4种结构蛋白和参与复制、转录的及功能未知的非结构蛋白。基因排列顺序为聚合酶-S蛋白-E蛋白-M蛋白-N蛋白基因转录与表达特征：病毒采用套式系列(Nestedset)的转录方式，即基因表达通过一系列3’端相同的亚基因组mRNA完成。冠状病毒编码的主要结构蛋白至少编码4种结构蛋白N蛋白：核衣壳蛋白M蛋白：一种糖蛋白E蛋白：小包膜蛋白S蛋白：糖蛋白12.2.2冠状病毒的分类分为两个亚科：冠状病毒亚科(Coronavirinae)凸隆病毒亚科(Torovirinae)马伯尔尼病毒牛布里达病毒人隆病毒分类冠状病毒亚科依据遗传学与血清学的差异，冠状病毒亚科分为α、β、γ和δ（1、2、3、4）4个属不同属病毒间没有抗原交叉反应或者很少有交叉反应。Grahametal.,NatRevMicrobiol,2013属病毒名称所致疾病α人冠状病毒HCoV-229E普通感冒猪流行性腹泻病毒PEDV胃肠炎猪传染性胃肠炎病毒TGEV胃肠炎猪呼吸道冠状病毒PRCoV肺炎猫冠状病毒FCoV腹膜炎、肺炎等犬冠状病毒CCoV肠炎β人冠状病毒HCoV-OC43普通感冒牛冠状病毒BCoV胃肠炎MERS冠状病毒MERS-CoV严重急性呼吸道症候群SARS冠状病毒SARS-CoV严重急性呼吸道症候群γ传染性支气管炎病毒IBV支气管炎、肾炎等火鸡冠状病毒TCoV肠炎雉冠状病毒PCoV肠炎δ猪δ冠状病毒PDCoV肠道感染夜莺、画眉、文鸟、麻雀等

冠状病毒亚科冠状病毒具有严格的宿主特异性，目前所发现的各种动物冠状病毒极少对人类有致病性，而且各种冠状病毒一般只对本宿主致病，种间传播极为罕见。推测的冠状病毒的起源与演化：冠状病毒的受体12.2.3两种人兽共患的冠状病毒SARS-CoVMERS-CoV（1）SARS-CoV2002年底，广东佛山发现非典型肺炎病例2003年初，香港、新加坡、加拿大出现相似病例。香港《信报》发表社评—《广东感冒，香港发烧》2月11日，广东官方正式向媒体公布广东当时已发现305例非典型肺炎病人并有5例死亡3月15日，WHO正式将非典型肺炎确定为严重急性呼吸系统综合症（SARS）全世界共发现SARS患者8437例，死亡813例，病死率为9.3％（WHO:截至2003年7月11日）中国大陆共发现SARS患者5328例，死亡348例（截至2003年7月11日）据我国国家统计局初步估计，这次SARS流行使中国全年国民经济增长率下降约0.8％（2）MERS-CoV中东呼吸综合征(MiddleEastRespiratorySyndrome，MERS)，是感染一种新型冠状病毒(MERS-CoV)引发的疾病，症状类似非典，能导致急性肾衰竭，死亡率达50%。2012年4月，在沙特出现首例MERS患者。据世界卫生组织（WHO）公布数据显示，全球累计实验室确诊的感染MERS-CoV病例共1139例，其中431例死亡（病死率37.8%）。2015年5月29日广东省惠州市出现首例输入性中东呼吸综合征确诊病例。患者为韩国男性，系韩国MERS病例的密切接触者。12.2.4猪流行性腹泻病毒(PEDV)1971年在英国发现1977年比利时分离到病毒（CV777株）1980s-1990s主要在欧洲国家流行——发病率高，但死亡率低1971,1976,20131990s，20141986,1990,199619931993200519921990s19951990s（1）PEDV的发现与流行1990s-2000s主要在亚洲国家流行——发病率高，死亡率也比较高1982,1993,19961992,1997,20081980s,2005,20101990s1995，20072009，201120072010年底，PED在中国大规模爆发，并呈现以下特征：高发病率、高死亡率免疫过PEDV疫苗的猪场也未能幸免除了哺乳仔猪，断奶仔猪、育肥猪、母猪均有发病高致病性PEDV出现！（2）PEDV的变异长期以来，PEDV对美国而言是外来病。但是，2013年4月29日，美国Iowa州立大学兽医诊断中心首次从美国本土监测到PEDV2013年5月16日美国国家兽医服务实验室进一步证实该检测结果，从而结束了美国没有PEDV的历史。1970s1980s-2013-PEDV在美国登陆USlost5millionspigssinceApr2013toFeb2014

PEDV在美国流行将49株已知的全基因组序列进行差异分析，存在四个变异较大的区域(Nsp2-Nsp3、S1、S2-ORF3、N-3’UTR)PEDV的变异特征通过比较PEDV变异株与经典毒株的编码基因，发现变异毒株的S基因，尤其是S1区，存在较大的变异变异株经典株流行毒株在第Ⅱ群，经典毒株在第Ⅰ群高致病性PEDV起源于中国？因为美国2013年的分离株与Anhui-2012的同源性高达99.5%，美国学者提出高致病性PEDV来源于中国，并将目前的流行毒株称为Chinese-likePEDV(Huangetal.,2013)推测：美国的PEDV可能来源于韩国；此次PEDV变异株最早也可能出现在韩国。（3）PEDV具备感染人的潜能？APN是PEDV的受体，研究发现PEDV能与人APN结合，且能感染人肝细胞(Huh-7)和人肺细胞(MRC-5)，而TGEV不能。Liuetal.,JVI,2015（4）PEDV的诊断与鉴别诊断胶体金试纸条RT-PCRELISA与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒的鉴别诊断PEDV变异毒株与经典毒株感染的鉴别诊断加强饲养管理，阻断传播途径

(粪便、乳汁、运输工具)返饲：有一定的效果，但会导致反复小肠内容物中PEDV效价不均匀难以达到预期的免疫效果可能污染其它病原而引起疾病传播自家苗（抗原量、灭活程度）能特异性针对PEDV流行毒株的疫苗（5）PEDV的防控目前在我国使用或研发的疫苗病料采集的时间病料的处理方法病料的安全检查确定返饲的效果如何做好返饲？（1）IBV的发现及分类地位鸡传染性支气管炎确诊于1931年，5年后IBV被鉴定为此病的病原IBV是第一个被发现的冠状病毒IBV为γ冠状病毒属成员，宿主为禽类最初认为鸡是IBV的唯一易感动物，但最近几年的研究发现，IBV不但可以感染鸡，同时也可以感染鸟类12.2.5传染性支气管炎病毒（IBV）（2）IBV基因组结构组成血凝试验：不能直接进行血凝，需要1%胰酶或磷脂酶在37℃处理3h。IBV培养系统：鸡胚、原代和传代细胞、20日龄胚的气管环培养。（3）IBV生物学特征S1蛋白决定了IBV的血清型，而S1蛋白具有很大的变异性，导致了IBV血清型众多。已有27个血清型，而且新的血清型还在出现。HI和VN进行血清分型。IBVS1基因的基因分型，以RFLP和序列同源性分析最为常用。单克隆抗体分型，针对纤突蛋白S1抗原表位。（4）IBV血清分型S基因的点突变、插入、缺失或重组是IBV产生新的血清型或变异株的主要原因，且主要集中在S1蛋白上。S1蛋白的高变区与中和表位有关。抗原决定簇的特异性构像依赖于其中的某些氨基酸，单个氨基酸的改变都可能产生1个新的变异株。IBV血清型的分子机制（5）IBV的变异基因组RNA的点突变、插入、缺失、不同毒株间的重组是造成IBV变异的主要分子基础。免疫压力造就“新毒株”自然选择、饲养环境2012年，香港学者在分析保存的各种动物粪便中的病毒种类时，意外发现了猪δ冠状病毒(PDCoV)，但对其致病性、来源等未作深入研究。12.2.6猪δ冠状病毒(PDCoV)（1）PDCoV的发现及分类地位2014年2月，美国爆发PDCoV，引起仔猪腹泻。目前，美国有20个州发生PDCoV，中部地区的感染率高达30%以上。2014年6月以来，加拿大、韩国、中国、泰国也有发生PDCoV的报道。（2）PDCoV的流行状况（3）PDCoV的基因组与进化基因组全长约25kb，是所有冠状病毒中最短的PDCoV全基因组进化分析早在2004年PDCoV就存在中国大陆毒株与香港毒株亲缘关系最近CHN-JS-2014与美国毒株亲缘关系近（3）PDCoV的培养特性易感细胞：LLC-PK、ST细胞病变快、增殖滴度高（4）PDCoV的致病性人工感染5日龄仔猪，可导致严重的腹泻Chenetal.,2015PDCoV具有广泛的组织嗜性小肠、粪便、肺、肝、肾脏均可检测到PDCoV外周血中也可检测到PDCoV，提示PDCoV感染可导致病毒血症！Maetal.,201512.3动脉炎病毒科(Arteriviridae)12.3.1动脉炎病毒科的共同特征形态：病毒粒子近似球形或呈肾形，直径50-70nm结构：有囊膜，核衣壳为二十面体对称；外绕一脂质双层膜，囊膜表面有明显的纤突宿主：感染各种动物，但特定病毒的宿主范围比较窄。AAA基因组与复制：为单链线状正股RNA，大小13-15kb；病毒采用套式系列(Nestedset)的转录方式，即基因表达通过一系列3’端相同的亚基因组mRNA完成。病毒编码蛋白：8种结构蛋白、12种非结构蛋白12.3.2分类马动脉炎病毒（EAV）（代表种）乳酸脱氢酶增高症病毒（LDV）猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）猴出血热病毒（SHFV）PRRSVLDVEAVSHFV12.3.3猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，又称蓝耳病1987年首次暴发于美国北卡罗纳州——“神秘病”，导致至少100万头猪死亡1991年，PRRS席卷欧洲大陆1996年，PRRS在我国首次爆发；2000年，美国再次大爆发PRRS，并将其列为当前最严重的猪病毒性传染病目前，PRRS遍及世界养猪国，并呈流行态势（1）PRRSV的发现与流行（2）猪繁殖与呼吸综合征的危害母猪—早产、流产、死胎、弱仔公猪—精液品质下降初生仔猪—高死亡率其它年龄猪—呼吸系统疾病根据美国农业部2005年统计的资料表明，2004年，蓝耳病导致的直接经济损失为5.6032亿美元。(Neumannetal.JAmVetMedAssoc.2005,227(3):385-92)。猪繁殖与呼吸综合征的危害2006年，高致病性PRRS在我国10多个省市大规模爆发，不仅对我国养猪业造成巨大的经济损失，而且导致了严重的环境问题。（3）PRRSV的生物学特性一种血清型，两种基因型（欧洲型、美洲型），两种基因型间的全基因组序列同源性仅为50-60%，但临床表现、病理变化非常相似（是如何进化的？）具有比较严格的宿主细胞特异性，在体内，肺泡巨噬细胞是其主要靶细胞通过受体介导的内吞侵入细胞。目前已经确定的受体主要有：硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、CD163（4）PRRSV的4大特征高度变异免疫抑制持续感染抗体依赖性增强（ADE）基因工程疫苗：尚处于实验阶段灭活疫苗：免疫效果不理想弱毒疫苗：容易返强且几率较高蓝耳病疫苗（5）PRRSV疫苗与诊断PRRS是极难预防和控制的病毒性传染病，研制安全、高效的PRRS新型疫苗是世界性难题！(6)蓝耳病新型疫苗研制的难点变异快疫苗株与强毒株一样抑制机体的天然免疫应答，尤其是I型干扰素的产生——免疫抑制GP5诱骗表位\过度糖基化\亚细胞定位等免疫逃避策略抗体依赖性增强混合感染、继发感染形态：病毒粒子呈球形，直径45-60nm，核心为30nm结构：二十面体对称，有囊膜宿主：感染人或动物，但特定病毒的宿主范围较窄12.4黄病毒科(Flaviviridae)

12.4.1科的特征基因组：为单股线状正链RNA，不分节段，大小为9.5-12.5kb。12.4.2分类黄病毒属：日本乙型脑炎病毒(JEV)、跳跃病病毒、黄热病毒、登革热症病毒1-4型、西尼罗病毒、鸭坦布苏病毒瘟病毒属：猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻—粘膜病病毒(BVDV)、边界（区）病病毒丙型肝炎病毒属：丙型肝炎病毒（HCV）、人庚型肝炎病毒（HGV）黄病毒科包括3个属：（1）同义名：流行性乙型脑炎病毒日本脑炎病毒乙脑病毒1924年首先证实于日本，由病人脑组织中分离到病毒我国最早报道于1921年，1934年用中和试验证实，1940年由尸体脑组织中分离到病毒12.4.3日本乙型脑炎病毒(JEV）是严重的人兽共患虫媒性传染病病原。库蚊、伊蚊、按蚊均可传播，但以三带喙库蚊为主要媒介，人或马为其终端宿主，猪为中间宿主。主要侵害人类中枢神经系统(CNS)，可引起的乙型脑炎，致死率高。也引起猪群繁殖障碍，严重危害养猪业。主要分布于亚洲。（2）传播媒介与致病性（3）JEV的生物学特性能凝集鹅、鸽、雏鸡、绵羊等动物的红细胞血凝性易于破坏，对pH的要求比较高只有一个血清型抗原性较强，感染的动物能产生较高效价的中和抗体、血凝抑制抗体、沉淀抗体和补体结合抗体抗原性血凝特性（4）免疫预防1943年美国Sabin氏鼠脑灭活苗1966年美国仓鼠肾组织培养灭活苗鸡胚灭活苗卵黄囊接种，收获胚体，去头及爪灭活苗弱毒苗

5-3株：由JEV强毒SA14株在仓鼠肾原代细胞上传代驯化获得的弱毒株。2-8株：将12-1-7株经紫外线进一步减毒，再经乳鼠皮下传代，提高其皮下增殖力和免疫原性而育成的弱毒疫苗株。SA14株—12-1-7株—9-7株—5-3株SA14-14-2（5）诊断RT-PCR病毒分离、鉴定动物发热初期，采血液或血清分离病毒动物死亡后采脑组织分离病毒补体结合试验（CT）SNHA和HILATELISA血清学12.4.4猪瘟病毒(CSFV)1833年首先发现于美国俄亥俄州1903年，DeSchweinitz和Dorset证明猪瘟的病原体是病毒匈牙利HutyraKoves于1908年制成猪瘟高免血清日本于1909年第一次发现并开始研究病毒我国于1925年开始研制免疫血清防制猪瘟只有一个血清型，但有血清学变种存在。（1）同义名：猪霍乱、烂肠瘟、古典猪瘟（2）培养特性能在多种cell中增殖（猪骨髓、睾丸、肺、脾和肾细胞以及白细胞等），但以猪肾细胞最敏感在细胞培养中不产生CPE。（3）免疫预防被动免疫主动免疫高免血清—血毒同时接种法、灭活结晶紫疫苗和弱毒疫苗。弱毒疫苗种类：中国“54-Ⅲ系”，即“C株”兔化弱毒苗日本GPE-细胞弱毒苗（温度敏感株）法国培养的“Thiveosal”冷变异弱毒苗超前免疫：在仔猪生下后吃初乳之前进行的免疫。（4）诊断技术仔猪接种（检测猪瘟病毒最敏感的方法）取病猪的血液或新鲜死猪的组织制成乳剂接种20-40斤重的幼龄猪。兔体交互试验被检材料接种家兔兔化猪瘟弱毒接种兔化猪瘟弱毒不发热发热出现热反应不出现热反应无猪瘟病毒强毒中和试验ELISA免疫荧光试验RT-PCR猪瘟病毒感染细胞荧光染色猪瘟感染猪扁桃体隐窝荧光染色12.4.5鸭坦布苏病毒(DuckTembusuvirus,DTMUV)2010年以来，我国大部分养鸭地区发生一种以产蛋下降为主的急性传染病，后证实是由鸭坦布苏病毒感染引起的。坦布苏病毒最早于1955年在马来西亚库蚊中分离，但感染鸭是首次发生。目前对该病毒的研究尚处于初期，但已成为研究热点。12.5戊肝病毒科(Hepeviridae)戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)目前只发现一个血清型，但分为4个基因型Ⅰ型：亚洲、非洲、拉丁美洲Ⅱ型：墨西哥、非洲国家Ⅲ型：世界性分布Ⅳ型：只见于亚洲国家，特别是中国、台湾和日本1型和2型仅感染人，3型和4型感染人和动物，但2006年在柬埔赛检测到猪的Ⅰ型HEV12.6嵌杯病毒科(Caliciviridae)12.6.1科的特征形态与结构：病毒粒子表面呈特殊的杯状凹陷，直径40nm，无囊膜基因组：为单股线状正链RNA，不分节段，大小为7.2-7.8kb。12.6.2分类