实验五邻二氮菲分光光度法测定铁的含量教学文稿

实验五邻二氮菲分光光度法测定铁的含量精品资料实验五 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法 ;2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在 pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的lgK稳＝21.3，摩尔吸光系数510＝11000Lmol·-1·cm-1。在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。3+＋2NH2→2+＋2O＋＋＋H2O4FeOH4FeN4H测定时，控制溶液 pH＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的 pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。三、仪器与试剂-11．醋酸钠：lmolL·；-12．氢氧化钠：0.4molL·；-1；、3．盐酸：6mol·L4．盐酸羟胺：100g·L-1（临时配制）；-15．邻二氮菲（1.5g·L）：0.l5g邻二氮菲溶解在 100mL1:1乙醇溶液中。6．铁标准溶液仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除 谢谢2精品资料(1)100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取4422于0.8634gNHFe（SO）·12H0-1200ml烧杯中，用6mol·L盐酸20mL溶解，移至1L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。(2)10μg·mL-1（即0.01mg·mL-1）铁标准溶液：用移液管吸取 10ml100μg·mL-1铁标准溶液于100ml容量瓶中，加入-12ml6molL·盐酸，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。7．仪器 7230G分光光度计及lcm比色皿。四、实验步骤准备工作：打开仪器电源开关，预热。调解仪器。测量工作：（以通过空白溶液的透射光强度为 I0,通过待测液的透射光强度为I,由仪器给出透射比 T,再由T值算出吸光度A值.）1.测定条件的选择（1）.吸收曲线的绘制：取两个 50ml容量瓶，用吸量管准确吸取 100μg·mL-1铁标准溶液0.0ml和1.0mL，分别置于50mL容量瓶中，加入盐酸羟胺溶液1mL，摇匀后加入醋酸钠溶液 5mL和邻二氮菲溶液 2mL，以水稀释至刻度，摇匀。放置 10min后，在分光光度计上，用 lcm比色皿，以试剂空白（即0.0ml铁标准溶液）为参比溶液，用不同的波长，从 440～560nm之间，每隔nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处附近多测定几点。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长（即最大吸收波长）。波长440 450 460 470 480 490 494 496 498 500（nm）仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除 谢谢3精品资料吸光度波长502 504 506 508 510 520 530 540 550 560（nm）吸光度（2）邻二氮菲与铁的配合物的稳定性 用上面溶液继续进行测定，在最大吸收波长510nm处，从加人显色剂后立即测定一次吸光度，经 15min，30min，45min，60min后，各测一次吸光度。以时间（ t）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制A－t曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况。（3）显色剂浓度的影响 取25mL容量瓶7个，用吸量管准确吸取 100μg·mL-1铁标准溶液1.0mL于各容量瓶中，加入盐酸羟胺溶液 1mL摇匀，再加入lmol·L-1醋酸钠5mL，然后分别加入 0.1％邻二氮菲溶液 0.3，0.6，1.0，l.5，2.0，3.0和4.0mL，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用适宜波长（510nm），1cm比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。然后以邻二氮菲试剂加入毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制 A一V曲线，由曲线上确定显色剂最佳加入量。（4）根据上面条件实验的结果，找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之。2．铁含量的测定（1）标准曲线的绘制 取50mL容量瓶6个，分别准确吸取 10μgmL·-l铁标准溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0和10.0mL于各容量瓶中，各加盐酸羟胺溶 lmL，摇匀，再各加醋酸钠溶液 5mL和邻二氮菲溶液 2mL，以水稀释至刻度，摇匀。经10min放置后，在分光光度计上用 lcm比色皿，以试剂空白为参比溶仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除 谢谢4精品资料液，在最大吸收波长（510nm）处以水为参比测定各溶液的吸光度，以含铁总量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。铁标液体积（mL）0.002.04.06.08.010.0铁浓度（μg/mL）吸光度A（2）吸取未知液5mL，按上述标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。根据未知液吸光度，在标准曲线上查出未知液相对应铁的量，然后计算试样中微量铁的含量，以每升未