长链非编码RNASox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制

长链非编码RNASox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制

Summary目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤及PI3K/Akt通路的影响。方法选取大鼠嗜铬神经瘤细胞株(PC12)，利用Aβ1-42对PC12细胞进行处理，建立AD的细胞模型。将Aβ1-42诱导前的PC12细胞设为空白组；将Aβ1-42诱导后的PC12细胞分为control组、Sox2OT过表达(p-Sox2OT)组、p-Sox2OT空载体(p-NC)组、抑制Sox2OT表达(si-Sox2OT)组和si-Sox2OT空载体(si-NC)组。使用噻唑蓝(MTT)方法对细胞的增殖活性进行检测；采用流式细胞术对转染后的细胞周期和凋亡率进行检测；采用Westernblot检测PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果MTT结果显示，与空白组(99.67±10.50)相比，control组(29.33±5.51)的细胞增殖率显著降低(t＝10.27，P<0.05)。RT-qPCR结果显示，与control组(0.52±0.06)相比，p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高(t＝16.93，P<0.05)，si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降(t＝15.28，P<0.05)；与p-NC组(0.53±0.12)相比，p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高(t＝16.25，P<0.05)；与si-NC组(0.51±0.09)相比，si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降(t＝16.93，P<0.05)；control组与p-NC组以及si-NC组间的差异无统计学意义(P>0.05)。此外，p-Sox2OT组细胞的增殖能力(145.00±5.12)显著高于si-Sox2OT组(23.33±4.93)、control组(55.00±5.00)、si-NC组(57.33±8.51)以及p-NC组(56.00±5.57)(t＝29.65，21.78，27.55，21.35，均P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间细胞增殖率的差异不具有统计学意义(P>0.05)。细胞周期检测实验显示，p-Sox2OT组G1期的细胞数量显著低于control组和p-NC(t＝9.80，8.57；均P<0.05)，而p-Sox2OT组G2期的细胞数量与control组和p-NC组相比却显著升高(t＝11.02，10.25；均P<0.05)；si-Sox2OT组G1期的细胞数量显著高于control组和si-NC组(t＝8.22，3.11，均P<0.05)，而G2期的细胞数量与control组和si-NC组相比却显著下降(t＝6.32，5.33；均P<0.05)；control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞周期差异无统计学意义(均P>0.05)。在S期中，只有p-Sox2OT组与control组之间的差异有统计学意义(t＝1.84，P<0.05)。p-Sox2OT组细胞凋亡率[(3.66±0.26)%]低于si-Sox2OT组[(14.25±0.80)%]、control组[(8.46±0.44)%]、si-NC组[(8.78±0.44)%]以及p-NC组[(8.40±0.21)%](t＝21.81，16.27，20.32，21.35，均P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞凋亡率差异不具有统计学意义(P>0.05)。Westernblot结果显示，p-Sox2OT组中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达明显高于p-NC(P<0.05)；与si-NC组相比，si-Sox2OT组PC12细胞中p-PI3K和p-Ak