生物实验室安全常识

广西中医药科学试验中心卫智权生物试验室安全常识生物实验室安全常识第1页内容介绍1试验室电、气、水、火2化学试剂安全使用3微生物危害及处理4放射性物质安全使用5紫外线辐射危害及防护6废弃物处理生物实验室安全常识第2页试验室电、气、水、火连线：仪器连线必须使用带有接地三根线护套线，不可使用普通塑料绞线。电话线可用普通塑料绞线。禁止私拉乱扯。接地：仪器应有良好接地，提升仪器稳定性及安全系数。维修：仪器出现故障时，应切断电源，马上向试验室责任人汇报。维修仪器时必须切断电源，方可拆机修理。墙电：不得私自对墙电进行维修、改造，该工作由试验室责任人进行计划，由相关专业人员进行维修、改造。检验：如遇线路老化或损坏应及时地更换。触电：断电或绝缘脱离抢救电灯：进入试验室，有需要时打开电源开关、排气扇；离开试验室时若无人请关闭电灯及排气扇。空调：进入试验室，有需要时可打开空调，温度不得低于27℃；天天下班时试验室责任人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！生物实验室安全常识第3页试验室电、气、水、火搬运：搬运或转动钢瓶时，不得用手执着开关阀移动。使用：按气瓶类别选取减压器，安装时螺扣应拧紧，并检漏。开启钢瓶：逆时针方向为开；先开总阀，后开减压阀。关闭钢瓶：顺时针方向为关；先关总阀，后关减压阀。气嘴保护：用死扳手夹紧气嘴后再开总阀。安全：气瓶内气体不可用尽。惰性气体：应剩下0.05MPa以上压力气体。可燃气体：应剩下0.2Mpa以上压力气体。

氢气：应剩下2.0MPa以上压力气体。存放：分类分处存放直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；防止曝晒和强烈振动；普通试验室内存放气瓶量不得超出两瓶。氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。生物实验室安全常识第4页试验室电、气、水、火上水：水龙头或水管漏水时，应及时向试验室责任人汇报，方便及时维修。下水：水池内不得倒入培养基、琼脂糖胶等凝胶物质；清洗废液缸时请注意将其中固体物质倒入到垃圾桶后才能冲洗，尤其是tip和eppendorf管。下水道排水不畅时，应及时向试验室责任人汇报，方便及时疏通。冷却水：输水管必须使用橡胶管，不得使用乳胶管；上水管与水龙头连接处及上水管、下水管与仪器或冷凝管连接处必须用管箍夹紧；下水管必须插入水池下水管中。纯净水：应按照“操作规程”进行操作；取水时应注意及时地关闭取水开关，预防溢流。生物实验室安全常识第5页试验室电、气、水、火报警：119（说明火源、火情、单位名称、地理位置或显著标志）办法：早发觉、早处理、早汇报灭火：学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）

从容、冷静

易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用干粉灭火器灭火；导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，切忌外跑。防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防消除火灾隐患（电、火、气、试剂）备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）生物实验室安全常识第6页化学试剂安全使用药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性受热见光易分解，存放低温棕色瓶特殊试剂特殊放，互不反应要记清标识：自配试剂标签注明化合物名称、浓度、配制日期以及配制人姓名生物实验室安全常识第7页化学试剂安全使用易燃易爆化学试剂：普通将闪点在25℃以下化学试剂列入易燃化学试剂，它们多是极易挥发液体，遇明火即可燃烧。有毒化学试剂：以较小剂量进入人体而造成疾病或死亡才被划为有毒物质。腐蚀性化学试剂：化学试剂碰到皮肤、粘膜、眼、呼吸器官都有及时清洗，如各种酸和碱、溴、苯酚等。强氧化性化学试剂：包含过氧化物和含有强氧化能力含氧酸及其盐，如硝酸铵、高氯酸及其盐、重铬酸及其盐等。放射性化学试剂：同位素示踪技术发展，广泛应用于生物化学与分子生物学。因为其特殊性，该种试剂不得带入公共试验室，在各自试验室进行专题管理或者由学校进行统一管理。不相容化学试剂：一些化学试剂在储存和操作过程中不能与其它物质接触，不然就发生爆炸，这些化学试剂称为不相容化学试剂。如：叠氮化物通惯用作溶液中抗菌剂，因为轻微碰撞就可能造成叠氮化铜爆炸，所以不能与铜接触（如污水管及管道设施）。生物实验室安全常识第8页化学试剂安全使用溴化乙锭（EB）一个强诱变剂（可能造成遗传性危害），直接接触有中等毒性。EB能够经过皮肤吸收，所以应该防止一切与EB直接接触。EB对皮肤，眼睛，口腔和上呼吸道系统有刺激性作用。应将EB安全密封，并密闭存放于干燥避光处。Trizol提取组织和细胞RNA一个主要试剂，在提取RNA时一定要在通风橱进行。如皮肤接触Trizol，请马上用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。生物实验室安全常识第9页化学试剂安全使用二乙基焦碳酸酯（DEPC）RNA酶强抑制剂，一个潜在致癌物质。操作时戴口罩，在通风橱中进行。沾到手上马上冲洗，废液经过废液道排泄。氯仿惯用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废液搜集后埋入地下。丙烯酰胺DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道.。生物实验室安全常识第10页化学试剂安全使用二甲基亚砜（DMSO）一个既溶于水又溶于有机溶剂非质子极性溶剂，惯用作细胞冻存液和配制AS。皮肤沾上之后用大量水洗及1%~5%稀氨水洗涤。十二烷基磺酸钠（SDS）有毒，易损害眼睛。质粒提取时作裂解液破坏细胞膜和Southern杂交时洗膜液中去垢剂。戴适当手套和安全护目镜，不要吸入其粉末。四甲基乙二胺（TEMED）强神经毒性，预防误吸，操作时快速，存放时密封。生物实验室安全常识第11页化学试剂安全使用二硫苏糖醇（DTT）很强还原剂，散发难闻气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。苯甲基磺酰氟（PMSF）一个高强度毒性胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴适当手套和安全眼镜，一直在化学通风橱里使用。在接触到情况下，要马上用大量水冲洗眼睛或皮肤，已污染工作服作为有害废物处理。TritonX-100引发严重眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴适当手套和护目镜。生物实验室安全常识第12页化学试剂安全使用过硫酸铵（NH4）2S2O8对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。操作时戴适当手套、安全眼镜和防护服。一直在通风橱里操作，操作完后彻底洗手。叠氮钠（NaN3）毒性非常大。它阻断细胞色素电子运输系统。含有叠氮钠溶液要标识清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴适当手套和安全护目镜，操作时要格外小心。Giemsa染液染料咽下可致命或引发眼睛失明，经过吸入和皮肤吸收是有毒。其可能危险是不可逆效应。戴适当手套和安全护目镜。在化学通风橱里操作，不要吸入其粉末。生物实验室安全常识第13页微生物危害及处理法律法规世界大多数国家都是以致病微生物危害程度进行分类，形成不一样试验室安全防护等级。我国普通以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示试验室对应生物安全防护水平;以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物试验室对应生物安全防护水平。中国试验室生物安全法规《病原微生物试验室生物安全管理条例》《中华人民共和国传染病防治法》《中华人民共和国传染病防治法实施方法》《中华人民共和国国境卫生检疫法》《中华人民共和国进出境动植物检疫法》中华人民共和国卫生行业标准《微生物和生物医学试验室生物安全通用准则》《试验室生物安全通用要求》《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理方法》《高致病性动物病原微生物试验室生物安全管理审批方法》生物实验室安全常识第14页人间传染病原微生物高致病性病原微生物是指《人间传染病原微生物名目》中要求第一类、第二类病原微生物。第一类病原微生物是指能够引发人类或者动物非常严重疾病微生物，以及我国还未发觉或者已经宣告毁灭微生物。第二类病原微生物是指能够引发人类或者动物严重疾病，比较轻易直接或间接在人与人、动物与人、动物与动物间传输微生物。生物实验室安全常识第15页人间传染病原微生物名目第一类病原微生物名目（29种）类天花病毒、克里米亚-刚果出血热病毒（新疆出血热病毒）、东方马脑炎病毒、埃博拉病毒、Flexal病毒、瓜纳瑞托病毒、Hanzalova病毒、亨德拉病毒、猿疱疹病毒、Hypr病毒、鸠宁病毒、Kumlinge病毒、卡萨诺尔森林病病毒、拉沙热病毒、跳跃病病毒、马秋波病毒、马尔堡病毒、猴痘病毒、Mopeia病毒（和其它Tacaribe病毒）、尼巴病毒、鄂木斯克出血热病毒、Sabian病毒、圣路易斯脑炎病毒、Tacaribe病毒、天花病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、西方马脑炎病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒生物实验室安全常识第16页人间传染病原微生物名目第二类病原微生物名目（51种）加利福利亚脑炎病毒、基孔肯尼雅病毒、多里病毒、Everglades病毒、口蹄疫病毒、Garba病毒、Germiston病毒、Getah病毒、Gordil病毒、其它汉坦病毒、引发肺综合征汉坦病毒、引发肾综合征出血热汉坦病毒、松鼠猴疱疹病毒、高致病性禽流感病毒、艾滋病毒（I型和II型）、Inhangapi病毒、Inini病毒、Issyk-Kul病毒、Itaituba病毒、乙型脑炎病毒、Khasan病毒、Kyz病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎(嗜神经性)病毒、Mayaro病毒、米德尔堡病毒、挤奶工结节病毒、Murcambo病毒、墨累谷脑炎病毒(澳大利亚脑炎病毒)、内罗毕绵羊病病毒、恩杜姆病毒、Negishi病毒、新城疫病毒、口疮病毒、Oropouche病毒、不属于危害程度第一或三、四类其它正痘病毒属病毒、Paramushir病毒、脊髓灰质炎病毒、hPowassan病毒兔痘病毒(痘苗病毒变种)、狂犬病毒(街毒)、Razdan病毒、立夫特谷热病毒、Rochambeau病毒、罗西奥病毒、Sagiyama病毒、SARS冠状病毒、塞皮克病毒、猴免疫缺点病毒、Tamdy病毒、西尼罗病毒生物实验室安全常识第17页人间传染病原微生物名目第三类病原微生物是指能够引发人类或者动物疾病，但普通情况下对人、动物或者环境不组成严重危害，传输风险有限，试验室感染后极少引发严重疾病，而且具备有效治疗和预防办法微生物：各种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其它致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鮰病毒、病毒性脑病和视网膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹彩病毒、中肠腺坏死杆状病毒、传染性皮下和造血器官坏死病毒、核多角体杆状病毒、虾产卵死亡综合症病毒、鳖鳃腺炎病毒、Taura综合症病毒、对虾白斑综合症病毒、黄头病病毒、草鱼出血病毒、鲤春病毒血症病毒、鲍球形病毒、鲑鱼传染性贫血病毒生物实验室安全常识第18页生物安全试验室分级标准一级生物安全防护试验室（BSL-1）试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于对健康成年人已知无致病作用微生物，如用于教学普通微生物试验室等。二级生物安全防护试验室（BSL-2）试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于对人或环境含有中等潜在危害微生物。试验脊椎动物生物安全防护试验室，其适用微生物范围与同级普通生物安全防护试验室相同。生物实验室安全常识第19页生物安全试验室分级标准三级生物安全防护试验室（BSL-3）试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于主要经过呼吸路径使人传染上严重甚至是致死疾病致病微生物及其毒素，通常已经有预防传染疫苗。艾滋病病毒研究(血清学试验除外)应在三级生物安全防护试验室中进行。四级生物安全防护试验室（BSL-4）试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于对人体含有高度危险性，经过气溶胶路径传输或传输路径不明，当前尚无有效疫苗或治疗方法致病微生物及其毒素。与上述情况类似不明微生物，也必须在四级生物安全防护试验室中进行，待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别试验室中处理。生物实验室安全常识第20页重组核酸技术和生物安全采取遗传工程技术人为设计出更多带有新型遗传物质生物，既包括到有生命活性载体本身对试验室人员生物安全，还存在大量投放于环境后生物污染问题——这类问题造成影响更是深远而不易觉察。当考虑要构建或使用遗传修饰生物时，对试验室工作危害度评定可能比从事遗传学正常生物（未修饰）工作危害度评定更为主要，不能仅凭经验或未经验证文件来评定这类生物潜在危害。比如：构建转基因动物惯用逆转录病毒载体，重组将外源基因转入体内同时，伴随有致病性增强过程。必须经过验证实确所必需生物安全级别，并对供体生物特征、将要转移核酸序列性质、受体生物特征以及环境特征做一综合评定，才能确定遗传修饰生物体所要求生物安全水平，并做到安全操作目标基因。生物实验室安全常识第21页重组核酸技术和生物安全生物表示系统：由符合一系列标准并可安全使用载体和宿主细胞组成。假如所要插入外源基因序列不要求更高级别生物安全水平，大部分常规遗传工程试验能够按BSL-1安全操作大肠杆菌工程菌。用于基因治疗和有效转移基因到组织培养细胞病毒载体，大多是复制缺点型，但操作时应采取与构建这些载体时亲本病毒相同生物安全水平。携带外源性遗传信息动物（转基因动物）应该在靶基因编码产物特征防护水平下进行操作，定点缺失特征基因动物（基因敲除动物）普通不表现特殊生物危害。基因产物是否含有潜在药理学活性是必须考虑一项主要原因。比如，克隆、表示编码毒素基因就需要较高生物安全水平，因为当采取病毒载体过量表示这些毒素蛋白时有可能产生难以预料后果。危害度评定：一个动态过程，必须亲密跟踪该生物因子研究最新进展，一旦取得载体/宿主新信息时，需要随时将相关工作归入更高或更低生物安全水平。生物实验室安全常识第22页放射性物质安全使用辐射防护三项基本标准，即辐射事业正当化、防护水平最优化和个人剂量限额化。固体废物处理放射性药品使用后残留和剩下部分被称为放射性废物。放射性废物处理不妥会造成环境放射性污染,影响工作人员和周围居民健康。主要采取放置法，被放射性药品污染固体废物应存在固定指定地点并采取适当屏蔽物加以防护,待其自然衰变后,看成非放射性废物处理即可。如为过期发生器吸附柱应标明日期并用塑料袋包装后置于贮源室,待其自然衰变后再处理。放射性废物转运：放射性废物转运关键是废物包装容器，事先要做好安全检验，对容器强度、屏蔽防护、密封系统、包装标志等都有严格要求。要求做到安全运输，预防发生火灾、容器颠覆及包装破损而使放射性废物泄漏，污染环境。生物实验室安全常识第23页放射性物质安全使用液体废物处理

应依据放射性物质最大允许浓度、化学性质、放射性强度、废液容积以及下水道排水设备等情况进行不一样处理。普通采取放置法,半衰期短也可用稀释法到达允许排放水平。放射性强度低废水也可直接排入下水道,但其放射性浓度不得超出露天水源中限制尝试100倍。不能直接排入下水道放射性废液,可采取衰变池贮存10个半衰期后排入下水道。注意：

未经固化处理放射性废液和浓缩物以及还未选定最终处置方案固化体等放射性废物，都应在固定地点贮存在专用容器中，贮存过程中注意安全，不能使反射性废物泄漏。不一样比活度废物要求使用不一样贮罐。生物实验室安全常识第24页紫外线辐射危害和防护紫外辐射是指波长范围在100nm—400nm光辐射，普通把100nm—280nm称作UVC，把280nm—315nm称作UVB，把315nm—400nm称作UVA。其中我们观察胶体用最多就是280nm—315nm紫外线。

紫外线有害效应主要是因为紫外线对脱氧核糖核酸（DNA）作用造成。最有害效应是细胞致死，其它效应则包含致突、致癌、干扰DNA、核糖核酸（RNA）和蛋白质合成、细胞分裂延迟、以及在通透性和能动性上改变等。生物实验室安全常识第25页紫外线辐射危害和防护在试验室里惯用紫外光源包含手提式紫外灯和紫外透射仪、凝胶成像系统。只能经过吸收有害波长滤片或安全玻璃片才能观察。在紫外光下操作时要戴适当预防性手套。应佩戴含有紫外线防护功效护目镜和/或防护面罩，并遮蔽暴露皮肤。紫外照射消毒后因为空气中臭氧富集，不宜马上开始工作，应在停顿紫外照射30min后开始工作，有条件试验室，可安装无臭氧紫外灯。超净工作台中进行紫外照射消毒后，也应用强风进行吹扫后再进行工作，以免臭氧危害身体健康。生物实验室安全常识第26页含有EB废弃物处理废液描述废弃处理方法缓冲液ＥＢ浓度较低（<0.5mg/L）在排入下水道之前，缓冲液请先用过滤器或“茶包”处理。确定缓冲液中在紫外灯下无荧光方可下排贮备溶液ＥＢ浓度较高（1-10mg/mL）浓度之高，使得处理EB过滤和吸收方法都无法适用。将这些储液交由相关部门专业人员处理处理用过过滤器和“茶包”ＥＢ在（过滤/吸收过程）污染将已用过滤器和茶包明确标识。用过过滤器和茶包