疑难血型鉴和配性专家讲座

在ABO血型系统内，几乎全部缺乏抗原人体，在其血清内必含有所缺乏抗原抗体，若在红细胞上含有抗原时，则其血清内必缺乏对应抗体，但这种规则偶然也有例外，血清中抗体和细胞上抗原不互补，正反定型相互不支持，出现血型难以确定。另外会碰到即使ABO和RH血型相同，但因为患者血清中存在意外抗体或红细胞上致敏有意外抗体及其它原因造成交叉配血不能相合。疑难血型鉴和配性专家讲座第1页

在ABO分型试验中，技术上错误与各种临床情况或疾病，都能造成正反定型之间矛盾，当预期正反定型不能产生ABO抗原与抗体互补结果时，首先需要排除在技术上可能发生错误，假如细心而重复实施对照试验产生相同形式凝集反应，则需要考虑到细胞和血清变异情况：

疑难血型鉴和配性专家讲座第2页

（一）、试验者技术问题

有时造成正反定型不符，并不是红细胞或血清本身问题，而是因为操作不妥造成。主要原因有：

1.标本或试剂搞错2.红细胞悬液过浓或过3.标本混乱4.未加试剂疑难血型鉴和配性专家讲座第3页5.试剂受到污染6.温度在离心过程中增高7.忽略观察溶血现象8.细胞与血清间百分比不适当，未发觉弱凝集9.假如使用血清来悬浮细胞，血清中高浓度血型物质中和了抗体试剂，使其不能再与红细胞抗原发生反应，出现了假阴性反应10.在反定型试验时没有加血清，误认为是阴性结果；11结果判断错误疑难血型鉴和配性专家讲座第4页（二）怎样处理技术原因造成正反定型不符

为处理ABO血型不一致而开始做深入试验之前，首先要排除技术上可能发生错误，首先要重复作正反定性试验．使用质量合格试剂，严格地执行正规操作，再者则重新抽取标本。假如先前试验中红细胞悬浮在血清或血浆中，改为用盐水洗涤红细胞后配成悬液，以及细心观察和解释试验结果就可处理许多显著问题．假如细心而重复实施对照试验还是与先前一样结果。就要依据情况从细胞和血清中寻找原因。

疑难血型鉴和配性专家讲座第5页ABO血型定型中因为细胞和血清

本身原因造成正反定型不一致

一、减弱或缺乏抗原反应二、未知抗原反应三、减弱或缺乏抗体反应四、未知抗体反应疑难血型鉴和配性专家讲座第6页

绝大多数A和B型人红细胞用合格抗-A和抗-B试剂检测都呈3十和4+凝集强度，血清用合格试剂红细胞检测绝大部分呈2+至4+凝集强度。在A和B型红细胞凝集强度低于2+和1+人中，有一部分是变异基因所致亚型红细胞或者是疾病相关抗原减弱。血清中抗A或抗B凝集强度低于2+和1+人中，是抗体减弱或缺乏。

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正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C--1+-3+--一个人减弱或缺乏抗原反应范例

一、减弱或缺乏抗原反应促成红细胞抗原表面减弱或降低情况包含以下3种情况：A或B抗原亚型疾病状态（如白血病）血型特异性可溶性物质疑难血型鉴和配性专家讲座第8页（1）这位病人红细胞分型法与正常强凝集反应相比，证实是减弱反应，依据反定型法，应预期病人含有A抗原活性。红细胞与抗AB减弱凝集反应及抗A试剂缺乏凝集反应，都暗示为A型亚型。（2）补充试验室试验：吸收和放散试验证实红细胞附着有抗A。病人唾液含有A与H物质。（3）讨论：A亚型问题要比B亚型者多而常见，因为A2或A2B型人体血清中可能有抗A1抗体。比A2型为弱A亚型不多见。若一位弱亚型病人错误地分型为O型而输予O型血液时，预期应无严重后果。但若将一位弱亚型病人错误地分型而输给一位O型病人时，则能引发严重输血反应问题。疑难血型鉴和配性专家讲座第9页1.

A或B抗原亚型当A、B及AB型红细胞与试剂抗血清作试验时，预期发生反应皆为4+强反应。正定型减弱凝集反应，可暗示这可能是A、B亚型。当减弱反应在健康供血者检验时，亚型是最可能解释。抗AB分型血清能检出一些不与抗A抗B试剂发生反应A及B型。

疑难血型鉴和配性专家讲座第10页2、疾病状态：减弱A抗原表现也可病人后天特征，如：A型急性白血病患者在疾病活动期改变为A2型或A3亚型，在疾病缓解期又恢复到原来A型反应。抗原性强度减弱，也能发生于B抗原与H抗原以及其它血型系统抗原。3、过量血型特异性可溶性物质：在患卵巢囊肿，胃癌或胰腺炎、肠道阻塞稀有情况，能查见多量血型特异性可溶性物质。病人血清中ABH物质浓度极高，以抑制抗A或抗B试剂作用，在正定型中，这种情形能产生假阴性，这种情况并非是病人红细胞抗原发生改变，而是其血清含有过量病人血清时，则能进行正确ABO分型试验。

疑难血型鉴和配性专家讲座第11页二、未知抗原反应未知抗原反应在正定型中产生情况范例，能有以下七种情况所引发：

正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+2+4+-4+--疑难血型鉴和配性专家讲座第12页1、取得性B抗原

取得性B抗原特征，取得性B只表现在A型红细胞上，使红细胞反应像AB型，而血清中只有抗B抗体，正定型中反应强度，A抗原大于B抗原，本身对照试验为阴性反应且分泌型人体内有A物质，但B物质则缺乏。疑难血型鉴和配性专家讲座第13页

当红细胞血型似乎是ＡＢ型而血清中含有抗Ｂ时，应该考虑是取得性Ｂ抗原．只有Ａ型红细胞能取得Ｂ活性，所以称为取得性Ｂ抗原，判别取得性Ｂ抗原方法以下：１.观察细胞与抗Ａ及抗Ｂ凝集强度，与抗Ａ反应要比与抗Ｂ反应强；２.用本身红细胞检验本人血清．其血清中抗Ｂ不能凝集本身红细胞中类Ｂ抗原；３.检验唾液是否存在Ａ、Ｂ物质，假如病人是分泌型，那么有Ａ物质而无Ｂ物质；

疑难血型鉴和配性专家讲座第14页4.取得性Ｂ抗原在正常PH介质中，红细胞与抗-B血清发生凝集，但在等于和低于PH6酸性条件下，凝集消失，这是取得性Ｂ抗原最主要血清学特征。5.查对病人诊疗。取得性Ｂ抗原形成与结肠癌、直肠癌，革兰氏阴性细菌变形杆菌感染相关。结论：病人为A型，含有取得性B抗原疑难血型鉴和配性专家讲座第15页类B抗原含有下例特点1.

类B与抗B反应普通无溶血现象。类B是取得性，不符合遗传规律，病情好转，类B就消失，真正B抗原符合遗传规律终生不变。2.

类B与抗B结合疏松，用类B红细胞作吸收放散试验，可放散出大量抗B抗体，类B病人唾液中不含B血型物质。疑难血型鉴和配性专家讲座第16页3.

因类B抗原而错定血型，其血清中天然抗体不合规律，如是AB型血清中应该不含天然抗B抗体。但A型类B表现似AB型，血清中却含有抗B抗体，此抗体并不凝集患者本人红细胞，只要按正规操作，在血型判定中很轻易发觉被检者红细胞所含抗原与血清中所含抗体矛盾。在AB型交叉配血时，如发觉主侧凝集，应考虑类B存在，重新判定血型并检验唾液中血型物质，测出被检者真正血型，最终选择同型人输血。4.

类B与全凝集或多凝集红细胞不一样，前者只与抗B反应，在AB型血清中不凝集。疑难血型鉴和配性专家讲座第17页（二）改变抗原

红细胞表面遗传产生多凝集反应可分为先天性或为取得性。红细胞被大多数正常人类血清所凝集反应称为多凝集反应。三种形式多凝集反应包含：T抗原活化，Tn抗原活化多凝集性。

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全部正常人血清含有抗T抗体，所以T活化红细胞都是多凝集。T活化红细胞与血清反应，是一个混合视野凝集反应，T活化红细胞不为脐带血清所凝集，因为脐带血清中缺乏抗T抗体，预备T活化红细胞，使其吸附血清中抗T抗体，就能正确定出ABO分型法。疑难血型鉴和配性专家讲座第19页（三）抗体附着红细胞：

有抗体稠密附着红细胞，显示直接抗人球蛋白试验阳性。可在正定型中产生混合视野或减弱凝集反应。引发这种现象原因包含：

本身免疫溶血性贫血症产生药品抗体输血反应新生儿溶血病

疑难血型鉴和配性专家讲座第20页

患新生儿溶血病(HDN)婴儿，其红细胞严重地包被IgG抗体分子，时常是与抗D试剂和抗-A、抗-B试剂发生这种自发凝集，在45C进行放散试验，能够从红细胞上解禽掉这些抗体，今后，即可用抗-A、抗-B很轻易地检测这些红细胞血型。含冷抗体IgM本身凝集素红细胞标本在盐水中也发生凝集，这类冷抗体可能由37℃孵育和37C洗涤被去除掉，也可由DTT等巯基化合物消除掉。（还存在遮蔽现象）疑难血型鉴和配性专家讲座第21页

本身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温性本身抗体。能凝集本身和其它各型红细胞，病人细胞上吸附了这种抗体，在本身或他人血清中，均可出现凝集，所以，其红细胞常被误定为AB，将其血清定型又被误定O型。由这种抗体造成血型检验上困难，能够用递增温度（由22度—37度—45度）盐水许多红细胞后，在经过检验血型来处理，如这类抗体在配血中只影响影响病人红细胞，而血清内无游离抗体，也可用递增温度盐水洗涤红细胞后再进行配型，假如血清中有游离抗体存在，表示病情严重，配血就较困难，不得已可选取凝集较弱血，亲密观察，一旦出现反应马上停输。疑难血型鉴和配性专家讲座第22页（四）红细胞混合性族群：在ABO分型法中混合视野型视野反应，通常是指示输了一个不一样血型血液，如输O型血至A型人或A型血或O型血人。因为输和病人自己血型不一样ABO血型严重性，故在输血前解释混合视野型凝集反应原因至为主要。假设一位病人为A型时，而在他（她）循环内，有些红细胞为B型或，故能招致不幸结果。调查此病病史，可有利于证实混合视野型凝集反应原因。若新近输血或母儿出血或骨髓移植受髓者能予确定排除，应考虑其它原因为：A3亚型，Tn多凝集反应。疑难血型鉴和配性专家讲座第23页三、减弱或缺乏抗体反应：

抗体减弱或缺乏，是由降低或缺乏抗体产生所致。在反定型中缺乏抗体反应，可有以下四种情况引发：

年纪丙球蛋白过低血症丙球蛋白缺乏血症嵌合现象。疑难血型鉴和配性专家讲座第24页

一个缺乏抗体反应范例

正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+-4+----（1）正定型抗A4+，暗示为A型，但反定型提醒为AB型（2）补充试验：将正反定型试管放4度10～30分钟，证实反定型BC管能够出现凝集，本身对照试验仍保持阴性；加大血清量。（3）结论：病人为A型，抗B减弱。疑难血型鉴和配性专家讲座第25页（一）年纪：

新生儿与幼儿及老年人可显示种属抗体减弱或缺乏。对新生儿血清常规不做血清分型法，是因他们还未开始产生抗体所致。在新生儿或幼儿能检抗体，都是在母体子宫内被动取得者。疑难血型鉴和配性专家讲座第26页（二）丙球蛋白过低血症：

血浆蛋白丙球蛋白部分降低（丙球蛋白低血症）能造成抗体减弱或降低。证实丙球蛋白过低血症情况包含：免疫抑制药品应用，白血病，免疫缺乏性疾患及骨髓移植后。

疑难血型鉴和配性专家讲座第27页（三）丙球蛋白缺乏血症：

丙球蛋白缺乏血症（血浆丙球蛋白降低）可为先天性或为后天性。如丙球蛋白缺乏血症、免疫缺乏性疾患、以及物理性（如放散线暴露）与细胞毒杀剂作用，都有促成丙球蛋白缺乏血症状态之发生。疑难血型鉴和配性专家讲座第28页溶血反应：溶血反应和凝集反应在血型检定和交叉配血上意义相同。在血型判定中因有相对应抗原抗体而出现溶血反应时，应按血型不合处理，

处理：灭活补体或用EDYA处理

正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C---4+

溶血--疑难血型鉴和配性专家讲座第29页四、未知抗体反应：

反定型中所产生未知抗体反应是有四种情况引发：缗钱状形成冷型本身抗体未知ABO种属凝集素未知同种抗体。疑难血型鉴和配性专家讲座第30页（一）缗钱状形成：如红细胞被悬浮在自己血浆中，红细胞缗钱状形成或聚合现象可疑似凝集反应。能产生缗钱状形成种种情况包含：血清蛋白浓度异常，球蛋白浓度在疾病中升高（如多发性骨髓瘤），原发性巨球蛋白血症，纤维蛋白原浓度增高，任何A/G倒置病人，有血浆扩张剂存在。新生儿脐带内血内华通氏胶亦能引发缗钱状形成。

疑难血型鉴和配性专家讲座第31页（二）

冷型自体抗体：血清内可能有未知自体抗体，与反定型中所用A或B型红细胞抗原起反应。抗I是血清分型法最常见碰到自体抗体。抗I通常凝集全部给血者红细胞，包含病人自己及反定型中所用红细胞。普通由抗I所引发凝集反应常比抗A及抗-B所引发者为弱。脐带血球显示I抗原量较少，通常不被凝集。抗ＩＨ抗体。疑难血型鉴和配性专家讲座第32页（三）

未知种属凝集素：血清内未知种属凝集素，可在室温与试剂红细胞上对应抗原起反应。此种范例包含A2型及A2B型人体能产生“天然发生”抗-A１抗体，在A2或A2B型人体血清内抗-A１抗体可与A１型红细胞发生强凝集反应疑难血型鉴和配性专家讲座第33页（四）未知同种抗体：在一个人血清内，除了ABO种属凝集素以外，未知种属抗体可引发反定型矛盾。在血清内存在其它未知抗体，可能与试剂红细胞发生反应。如在这种情况下普检同种抗体试验与O型红细胞反应为阴性，则反定型应重复与其它A1及B型红血球作试验。如此抗体与极罕见抗原起反应，则随机选择A1及B型红细胞，亦可预想到缺乏该抗原。疑难血型鉴和配性专家讲座第34页一个经典未知抗体反应范例（1）（1）正定型与抗A及抗AB发生（３+）凝集及反定型与BC发生（4+）凝集，代表一个经典A型反应。但与AC细胞有1+反应，暗示有额外减弱反应抗体。（2）补充试验：血清各与三个A1，A2及O型红细胞作试验。全部A1型红细胞都有凝集反应，但A2或O型红细胞反应为阴性。

正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C

３+-３+1+4+--A1ＣA2ＣOC本身C病人血清1+---（3）结论：病人为A2表现型，血清中有抗A1抗体。

A2病人C抗A1--疑难血型鉴和配性专家讲座第35页一个经典未知抗体反应范例（2）

正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+-4+-4+3+-（1）依据（4+）凝集反应，暗示为A型；但与O型红细胞发生反应，预示有额外抗体存在。（2）补充试验：病人红细胞与抗A反应。病人血清与额外O、A2、A1型红细胞及O型脐带红细胞作试验。证实全部O型与A2型红细胞有凝集反应。额外A1型红细胞为阴性反应（3）结论：病人为A型表现型，含有抗-IH抗体。

A1

A2成人OC脐带OC本身C-1+2+--疑难血型鉴和配性专家讲座第36页

正定型反定型病人红细胞+试剂抗血清病人血清+试剂红细胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+4+4+2+2+2+2+一个经典未知抗体反应范例（3）（1）本身对照试验（病人血清+病人红细胞）为阳性反应，示初步认为血清有问题。（2）补体试验室试验：实施冷本身抗体吸收法，用吸收血清与抗A，B及O型红细胞作试验，吸收血清与这些试剂红细胞未察见凝集反应。（3）结论：病人为AB型表现型，含有本身抗I抗体。疑难血型鉴和配性专家讲座第37页在每逢ABO分型问题发生时，有八个主要

自我答问方式，有利于矛盾问题处理：第一，受检红细胞是洗涤后悬浮于生理盐水吗第二，所用检验技术为最敏感试管方法吗？第三，已知病人年纪小于1岁或大于60岁吗？第四，已知病人丙球蛋白浓度减低吗？第五，病人血清与O型普检红细胞发生反应和反定型所用试剂红细胞一样吗？第六，病人诊疗是白血病、肠道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌瘤吗？第七，血液标本是一位孕妇吗？第八，若红血球显示混合视野反应，是采自输血后标本吗？疑难血型鉴