急性肾功能衰竭及肾功对药物作用的影响

急性肾功能衰竭及肾功对药物作用的影响肾脏是人体重要器官之一，对调节和维持人体内环境的稳定有重要作用。当各种病因引起肾脏的泌尿功能在短期内急剧下降，机体内环境将会发生严重紊乱，临床表现有尿量和尿成份的变化、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒。其发病机制主要与肾血液灌流减少、肾小管阻塞、肾小管原尿返漏等因素有关。【实验目的】复制中毒性肾功能衰竭的动物模型。观察急性肾功能衰竭时家兔出现的各种功能代谢变化，进一步探讨急性肾功能衰竭发生的机理。【实验原理】用升汞引起急性肾小管坏死（）复制中毒性肾病，并观察少尿期主要机能代谢变化。【实验对象】家兔体重在【器材、药品】% 溶液、普鲁卡因、 肝素钠溶液、肌酐标准应用液、苦味酸、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、焦锑酸钾溶液、无水乙醇、氢氧化钙、钠标准应用液、磷酸盐一氢氧化钠缓冲液、 型分光光度计、离心机、恒温水筒、 离心管、注射器、 5 、 刻度吸管、手术器械、火焰光度计、血气分析仪。【方法步骤与观察项目】本实验以一般状态、尿量、尿蛋白、血浆肌酐、尿肌酐、内生肌酐清除率、度血浆钠、尿钠、血浆钾、滤过钠排泄分数、酚红排泄率、肾形态学观察为观察指标。（一）复制模型：在实验前度24小度时取两只家兔称重后，度一只肌肉（或皮下）注射/造成急性肾功能衰竭，另一只在相同部位注射等量的生理盐水作为正常对照。二取上述两只家兔分别称重固定于兔台上，耳缘静脉注射葡萄糖溶液（ ），以保证有足够的尿量。（三）颈部剪毛、局麻、作颈动脉插管，取血置于盛有肝素的离心管内，离心（200，0后取血浆以备测定血中肌酐钠浓度。四腹部剪毛、局麻，在耻骨联合上处作腹正中切口，分离皮下组织，沿腹白线切开腹膜，暴露膀胱，抽取膀胱中的尿液以备作尿肌酐、尿钠浓度测定，度分离两侧输尿管，作输尿管插管，收集尿液，换算成每分钟排尿量。（五）观察实验组及对照组家兔的一般状态、呼吸、尿量等。六试验从家兔耳缘静脉内准确快速注入酚红溶液 ，立即记时。用 注射器抽取生理盐水 及葡萄糖，由耳缘静脉注入。分别3于.注射酚红后30分钟、1小时后收集尿量。将每次收集的尿量放入 量筒内，加 ，再加水至，搅拌均匀后，从中取10、置即于标准管内径相等的试管中与标准管比色，度得出不同时间内酚红排除率。（七）尿蛋白定性试验将膀胱中收集的尿液取5、置即于试管中在酒精灯上加热至沸腾，待尿变混浊后加10醋酸3-滴5，如混浊不退（或加热混浊仍不退）为蛋白定性试验阳性，按其混浊程度与下面标准判定结果，如加醋酸后尿变清，是尿中无机盐所致。“－” 表示尿液清晰不显混浊“＋” 尿液出现轻度白色混浊，呈白雾状（含蛋白质约0.01-克0%.）05

TOC\o"1-5"\h\z“++” 尿液呈颗粒混浊含蛋白质约 克“+++”尿液呈絮状混浊含蛋白质约 克“++++”尿液呈块状混浊含蛋白质 克八应用焦锑酸钾比浊法按下表的操作测定血清和尿钠含量。取膀胱中尿液，移入含氢氧化钙的试管中，用玻璃棒搅拌混匀，放置 后离心0m吸取上清尿液已除去磷酸盐类至另一试管供作尿钠测定。钠测定操作步骤标准管 测定管血清或尿滤液钠标准应用液无水乙醇混和测定管离心试管。后吸取上清液，标准管直接吸取，分别移入另混和测定管离心试管。后吸取上清液，标准管直接吸取，分别移入另上清液焦锑酸钾溶液混合、静置后用波长，以蒸馏水校正光密度至零点进行比浊，记录各管光密度读数。计算： 测定管光密度 X:钠标准管光密度九按下表苦味酸沉淀蛋白的操作测定血清和尿肌酎含量。取膀胱中尿液，用蒸馏水作： 稀释，以备测定尿中肌酎含量。肌酎测定操作步骤标准管 测定管 空白管血清或：稀释尿肌酎标准应用液蒸馏水苦味酸充分混匀 后离心， 测定管，将上述三种试管中的上清液分别直接倾入另一试管内磷酸盐一氢氧化钠缓冲液

充分混合置3℃7水箱中后取出室温冷却充分混合置3℃7水箱中后取出室温冷却后，以波长蒸馏水调零，比色记录各管光密度读数计算：测定管光密度－空白管光密度 X二肌酎/标准管光密度－空白管光密度尿中肌酐含量内生肌酎清除率： 尿量//血中肌酐含量肌酎X|J/十将上述测定的血清及尿的钠和肌酎和肌酎含量，按下列公式计算尿〔a/血〔a= x尿〔肌酎〕/血〔肌酎〕（十一）应用火焰光度分析法按下述的操作测定血钾含量（或参见实验四十七高钾血症）血清的稀释：取血清 置于X 试管内，加重蒸馏水 ，充分混匀。.安装调试好仪器，将钾滤色片置于光路中，将样液吸入管放入钾标准液内，待火焰呈黄色后，开启快门，移动光栅，使检流计读数控制在80-1之0间0，作为钾标准读数，关闭快门。.用重蒸馏水喷雾洗涤至火焰恢复到空白时所呈的蓝紫色。|.将样液吸入管放入稀释血清（1/1中0，0待）火焰呈黄色后，开启快门，记录检流计上的读数（钾样读数）关闭快门，依上法用重蒸水喷雾洗涤至火焰恢复到蓝紫色。计算：钾测定读数 钾测定读数 X0 = X= /钾标准读数 钾标准读数（十二）形态学观察1.处死动物，取出两侧肾脏，沿肾之凸面中部作一水平切面，深达肾盂，注意肾包膜情况，切面的色泽、皮质与髓质分界是否清楚等，并与对照组兔肾作比较。组织切片示教：于显微镜下观察皮质肾小管上皮有无明显的变性坏死、脱落，管腔内有无蛋白、红细胞和管型存在。【注意事项】一试管吸管等器材要求清洁。血清、尿液标本和标准液等试剂量必须准确，所有操作均应按生化要求严格进行。（二）于膀胱壁穿刺抽取尿液时，应于无血管处部