药物定量分析与分析方法验证第七详解演示文稿

药物定量分析与分析方法验证第七版详解演示文稿现在是1页\一共有69页\编辑于星期五（优选）药物定量分析与分析方法验证第七版现在是2页\一共有69页\编辑于星期五二、教学内容第一节定量分析方法的分类和特点。第二节定量分析样品的前处理方法。第三节药品质量标准分析方法验证。现在是3页\一共有69页\编辑于星期五第一节定量分析方法的分类与特点现在是4页\一共有69页\编辑于星期五一、容量分析法（一）容量分析法的特点1、操作简单、快速；2、耐用性高；3、比较准确（RSD＜0.2%）；4、方法专属性差。现在是5页\一共有69页\编辑于星期五（二）容量分析法的计算

1、滴定度指每1mL某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。例：碘苯酯含量测定“每1mL硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）相当于1.388mg的碘苯酯。”现在是6页\一共有69页\编辑于星期五2、滴定度的计算对于以上反应，滴定度（T）可按下式进行计算(mg/mL)m：滴定液的摩尔浓度；M：被测药物的分子量；a：滴定液的摩尔数；b：被测药物的摩尔数。现在是7页\一共有69页\编辑于星期五

碘量法测定维生素C含量时，若维生素C的分子量为176.13，1mL碘滴定液（0.1mol/L）相当于维生素C的质量是多少？现在是8页\一共有69页\编辑于星期五3、药物的百分含量计算（1）直接滴定法被测药物的百分含量计算公式为：V：消耗滴定液的体积；T：滴定度W：供试品取用量现在是9页\一共有69页\编辑于星期五例1、盐酸利多卡因的含量测定

称取盐酸利多卡因供试品0.2128g，溶解于冰醋酸，加适量醋酸汞试液，用非水溶液滴定法测定，消耗高氯酸（0.1016mol/L）7.59mL，计算其含量。每1mL高氯酸液（0.1mol/L）相当于27.08mg的盐酸利多卡因。现在是10页\一共有69页\编辑于星期五例2、硫酸阿托品的含量测定

取本品0.4780g，加冰醋酸与醋酐各10mL，加结晶紫指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1012mol/L）滴定至溶液显纯蓝色，消耗高氯酸滴定液（0.1012mol/L）6.92mL，空白试验消耗高氯酸滴定液（0.1012mol/L）0.02mL，计算硫酸阿托品的含量。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于67.68mg的（C17H23NO3)·H2SO4。现在是11页\一共有69页\编辑于星期五习题1异烟肼的含量测定：取供试品0.2052g，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，精密量取25mL，加水50mL，加盐酸20mL与甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01733mol/L）滴定，消耗此溶液13.65mL，1mL溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于3.429mg异烟肼，试计算异烟肼的含量。现在是12页\一共有69页\编辑于星期五（2）间接滴定法①生成物滴定法例：葡萄糖酸锑钠的含量测定现在是13页\一共有69页\编辑于星期五②剩余滴定法VB0：空白试验消耗滴定液B的体积；VBS：样品测定试验消耗滴定液B的体积；T：滴定液A对供试品的滴定度；F：滴定液B浓度校正因数。现在是14页\一共有69页\编辑于星期五例3、阿司匹林的含量测定

精密称取阿司匹林0.1742g，加中性乙醇20mL溶解，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显粉红色，再精密加入氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40.00mL，置水浴中加热15min，并时时振荡，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.0550mol/L）滴定至粉红色刚刚消失，用去23.60mL。空白试验消耗同一硫酸滴定液39.86mL，计算阿司匹林的含量。每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于0.00901g的C9H8O4。现在是15页\一共有69页\编辑于星期五二、光谱分析法紫外可见分光广度法1、特点（1）灵敏度高，可达10-4～10-7g/mL；（2）准确度高，RSD为2％～5％；（3）仪器价格较低廉，操作简单，便于普及；（4）专属性较差。现在是16页\一共有69页\编辑于星期五2、朗伯－比耳定律（1）摩尔吸收系数：ε（2）百分吸收系数：3、仪器的校正和检定4、对溶剂的要求

5、测定法220～240nm：≤0.40241～250nm：≤0.20251～300nm：≤0.10300nm以上：≤0.05吸收度读数在0.3～0.7之间，误差最小现在是17页\一共有69页\编辑于星期五6、含量测定计算（1）对照品比较法Cx：供试品溶液的浓度；Ax：供试品溶液的吸收度；Cr：对照品溶液的浓度；Ar：对照品溶液的吸收度；D：稀释体积；W：供试品取样量。现在是18页\一共有69页\编辑于星期五例4：

硫喷妥钠的含量测定：取供试品0.2500g，用水溶解并稀释至500mL，精密称取1mL，用0.4％NaOH溶液定量稀释至100mL作为供试液；另取硫喷妥对照品，用0.4％NaOH溶液配制浓度为5μg/mL作为对照品溶液。照分光光度法，在304nm波长出分别测得供试品和对照品的吸收度为0.495和0.550，已知1mg硫喷妥相当于1.091mg的硫喷妥钠，试计算硫喷妥钠的含量。现在是19页\一共有69页\编辑于星期五（2）吸收度系数法现在是20页\一共有69页\编辑于星期五例5、炔孕酮的含量测定

精密称取炔孕酮供试品0.1g，加无水乙醇溶解并定量转移至100mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置另一100mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。照分光光度法，在240nm波长处测定吸收度为0.51。已知C21H28O2的吸收系数为520，计算炔孕酮的含量。现在是21页\一共有69页\编辑于星期五例6、对乙酰氨基酚的含量测定

取本品适量，置250mL容量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50mL，溶解后，加水至刻度，摇匀。精密量取该溶液5mL，置100mL容量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10mL，加水至刻度，摇匀。在257nm波长处测定吸收度为0.590。按其吸收系数（E1%1cm）为715计算其含量为99.66％，问取样量为多少克？现在是22页\一共有69页\编辑于星期五（3）计算分光光度法维生素A的含量测定：三点校正法（4）比色法现在是23页\一共有69页\编辑于星期五三、色谱分析法☆按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色谱☆按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC现在是24页\一共有69页\编辑于星期五1、系统适用性试验（1）理论塔板数（2）分离度（3）重复性（4）拖尾因子现在是25页\一共有69页\编辑于星期五（1）色谱柱的理论塔板数

重酒石酸去甲肾上腺素注射液：“理论塔板数按重酒石酸去甲肾上腺素峰计算不低于3000。”现在是26页\一共有69页\编辑于星期五（2）分离度除另有规定外，分离度应大于1.5。现在是27页\一共有69页\编辑于星期五(3)重复性a.对照溶液连续进样5次峰面积RSD≤2.0％80％对照溶液分别进样3次平均校正因子RSD≤2.0％100％对照溶液120％对照溶液内标溶液b.现在是28页\一共有69页\编辑于星期五（4）拖尾因子W0.05h为0.05峰高处的峰宽；d1为峰顶点至峰前沿的距离。除另有规定外，T应在0.95～1.05之间。现在是29页\一共有69页\编辑于星期五2、HPLC含量测定方法（1）内标法药物对照品内标物质溶液溶液药物对照溶液测试现在是30页\一共有69页\编辑于星期五药物供试品内标物质药物供试品溶液测试（1）内标法现在是31页\一共有69页\编辑于星期五例7、黄体酮的含量测定（1）内标溶液的制备：取乙烯雌酚25.0mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。（2）测定：取黄体酮对照品25.8mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液与内标溶液各5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。取5mL注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰高h对＝8.6cm，h对，内标＝3.4cm。另取样品24.7mg，按同法测定记录色谱图，量取峰高h样＝7.5cm，h样，内标＝3.2cm。求黄体酮含量。现在是32页\一共有69页\编辑于星期五习题：

测定生物碱试样中黄连碱的含量，称取内标物和黄连碱对照品各0.2000g，配成混合溶液，测得峰面积分别为3.60和3.43cm2；称取0.2400g内标物和试样0.8560g，同法配制成溶液后，在相同色谱条件下测得峰面积为4.16和3.71cm2，计算试样中黄连碱的含量。现在是33页\一共有69页\编辑于星期五（2）外标法测试CXAX测试CRAR现在是34页\一共有69页\编辑于星期五3、GC含量测定方法1、内标法2、外标法3、标准溶液加入法现在是35页\一共有69页\编辑于星期五第二节样品分析的前处理方法现在是36页\一共有69页\编辑于星期五概述1、含金属元素的有机药物葡萄糖酸钙乳酸钙现在是37页\一共有69页\编辑于星期五葡萄糖酸锑钠富马酸亚铁现在是38页\一共有69页\编辑于星期五2、含卤素的有机药物氧氟沙星三氯叔丁醇水合氯醛泛影酸现在是39页\一共有69页\编辑于星期五三氯叔丁醇碘他拉酸3、含卤素药物的不同连接方式现在是40页\一共有69页\编辑于星期五硫柳汞钠

4、含金属药物的不同连接方式水杨酸镁十一烯酸锌乙基汞硫代水杨酸钠

现在是41页\一共有69页\编辑于星期五一、不经有机破坏的分析方法1、水解法2、还原法现在是42页\一共有69页\编辑于星期五1、酸水解后测定法例：十一烯酸锌的含量测定本品与稀盐酸共沸，水解生成十一烯酸和氯化锌，用EDTA滴定液直接滴定锌离子。(一）水解法现在是43页\一共有69页\编辑于星期五(一）水解法2、碱水解后测定法例：三氯叔丁醇的含量测定现在是44页\一共有69页\编辑于星期五（二）还原法

例：泛影酸的含量测定现在是45页\一共有69页\编辑于星期五碘他拉酸碘番酸胆影酸现在是46页\一共有69页\编辑于星期五二、经有机破坏的分析方法（一）湿法破坏1、硝酸-高氯酸法

适用范围：血、尿、组织等生物样品的破坏。

不足之处：对含氮杂环药物的破坏不够完全。2、硝酸-硫酸法

适用范围：大多数有机物质的破坏（染料、中间体、药物）

不足之处：不适用于含碱土金属有机药物的破坏。现在是47页\一共有69页\编辑于星期五3、硫酸-硫酸盐（硫酸钾）法加入硫酸盐的目的：（1）提高硫酸的沸点，使样品破坏完全；（2）防止硫酸在加热过程中过早的分解为SO3而损失。适用范围：含砷或含锑有机药物的破坏分解。4、其它湿法硝酸-硫酸-高氯酸法硫酸-过氧化氢法硫酸-高锰酸钾法现在是48页\一共有69页\编辑于星期五湿法破坏注意事项1、仪器为硅玻璃或硼玻璃制成的凯氏烧瓶；2、所用试剂及蒸馏水均应不含有被测定金属离子或干扰测定的其他金属离子；3、要进行空白试验校正；4、在通风橱内进行。现在是49页\一共有69页\编辑于星期五凯氏定氮法氮测定法第一法（常量法）第二法（半微量法）现在是50页\一共有69页\编辑于星期五消解剂硫酸-硫酸钾（或无水硫酸钠）作用：提高硫酸的沸点，以提高消解温度。催化剂汞或汞盐、硒粉、铜盐（硫酸铜）、二氧化锰等辅助氧化剂30％过氧化氢高氯酸现在是51页\一共有69页\编辑于星期五应用范围本法适用于测定含有氨基或酰胺结构药物的含量注意事项：（1）偶氮或肼结构→消解前加锌粉还原（2）杂环→消解前加氢碘酸或红磷还原（3）含氮量高（大于10％）→消解中加蔗糖或淀粉等作为还原剂现在是52页\一共有69页\编辑于星期五（二）干法破坏

适用范围适用于含卤素、硫、磷等有机药物分析的前处理，亦用于某些药物中硒及砷盐的检查。

1、高温炽灼法2、氧瓶燃烧法现在是53页\一共有69页\编辑于星期五1、高温炽灼法本法适用于含卤素药物的鉴别，亦用于含磷药物的定量测定和药物中砷盐的检查。（1）含碘药物的鉴别（2）含氟、氯、溴等元素药物的鉴别（3）含磷药物的定量测定（4）砷盐的检查现在是54页\一共有69页\编辑于星期五（三）氧瓶燃烧法1、适用范围：适用于含卤素及含硫、磷、硒等有机药物分析的前处理。2、仪器设备现在是55页\一共有69页\编辑于星期五3、实验步骤取样加吸收液，通氧气吸收燃烧分析现在是56页\一共有69页\编辑于星期五4、吸收液（1）作用①定量吸收被测定元素；②将被测定元素转变为易于测定的价态。（2）吸收液的选择供试品吸收液氟水氯水-NaOH溶液溴水-NaOH溶液-二氧化硫饱和溶液碘水-NaOH溶液-二氧化硫饱和溶液/水-NaOH溶液硒HNO3溶液（1→30）磷水硫水-浓H2O2现在是57页\一共有69页\编辑于星期五5、应用示例（碘苯酯的含量测定）

（1）测定方法取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏。用氢氧化钠试液2mL与水10mL为吸收液，待吸收完全后，加溴-醋酸溶液10mL，密塞，振荡，放置数分钟，加甲酸约1mL，用水洗涤瓶口并通入空气流3～5min。加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）滴定，至终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失。并将滴定结果用空白试验校正。每1mL硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）相当于1.388mg的C19H29IO2。现在是58页\一共有69页\编辑于星期五（2）原理现在是59页\一共有69页\编辑于星期五第三节药品质量标准分析方法验证需验证的分析项目有：（1）鉴别试验；（2）杂质定量或限度检查；（3）原料药或制剂中有效成分含量测定；（4）制剂中其他成分（如降解产物、防腐剂等）的测定；（5）药品溶出度、释放度等功能检查中，其溶出量等测试方法也应做必要的验证。现在是60页\一共有69页\编辑于星期五验证内容（1）准确度；（2）精密度；（3）专属性；（4）检测限；（5）定量限；（6）线性；（7）范围；（8）耐用性。现在是61页\一共有69页\编辑于星期五一、准确度

是指用该方法测定结果与真实值或参考值接近的程度，用回收率（％）表示。

1、原料药可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准确度的另一方法测定的结果进行比较。现在是62页\一共有69页\编辑于星期五2、制剂（1）模拟法