(23)-4.15-药物中杂质的检查方法

PharmaceuticalAnalysis

PharmaceuticalAnalysis药物中杂质的检查方法

PharmaceuticalAnalysis杂质检查方法

原理：利用药品和杂质在物理与化学性质上的差异，选择专属性强的方法。方法：化学分析法色谱分析法生物学分析法热分析法光谱分析法PharmaceuticalAnalysis杂质检查方法

一、化学分析法杂质与一定试剂产生沉淀杂质与一定试剂产生颜色反应杂质与一定试剂反应产生气体

药物和杂质化学性质存在较大差异时，可以选择合适的试剂，使药物不与之发生反应，但杂质能与其发生作用。PharmaceuticalAnalysis杂质检查方法

例贝诺酯中游离水杨酸的检查游离水杨酸:能与稀硫酸铁铵溶液反应呈色。贝诺酯:不能发生此颜色反应。PharmaceuticalAnalysis杂质检查方法

二、光谱分析法

利用杂质和药物对光选择性吸收性质的差异

紫外分光光度法红外分光光度法原子吸收分光光度法PharmaceuticalAnalysis杂质检查方法

例地蒽酚中二羟基蒽醌检查二羟基蒽醌:在CHCl3中λmax432nm；地蒽酚:该波长下无吸收。PharmaceuticalAnalysis杂质检查方法

三、色谱法利用药物与杂质色谱性质的差异，有效地将杂质与药物进行分离和检测。药物中有机杂质主要来源于生产过程中引入的原料、中间体、副产物、异构体等。有关物质的化学结构、性质与药物类似或具有渊源关系。色谱法是有关物质检查的首选方法。色谱分析方法

该方法设备简单、操作简便、快速、灵敏度高。（一）薄层色谱法（TLC）杂质对照法供试品溶液自身稀释对照法杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法对照药物法薄层色谱法

1.杂质对照法

适用于已知杂质并能制备杂质对照品情况

供试品溶液;一定浓度杂质对照品溶液01供试液和对照液分别点样、展开、定位02比较:供试品溶液中所含该项杂质的斑点颜色不得深于相应的杂质对照品斑点。03薄层色谱法

适用于杂质结构不确定或无杂质对照品；杂质斑点颜色与主成分斑点颜色相同或相近。

2.供试液自身稀释对照法

供试液按限量要求稀释至一定浓度作为对照液01供试液和对照液分别点样、展开、定位02

供试液所显杂质斑点应不大于对照液所显主斑点的颜色03薄层色谱法

供试液:20mg/mL对照液:0.2mg/mL供试液与对照液点于同一薄层板;判断:供试品溶液杂质斑点颜色≯对照液主斑点颜色(1.0%)稀释100倍吡罗昔康中有关物质的检查例薄层色谱法

药物中存在多个杂质

3.杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法杂质有对照液品：杂质对照法检查未知杂质或无对照杂质：供试液自身稀释对照法检查。

薄层色谱法

4.对照药物法

适用于无合适杂质对照品或供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异。采用与供试品相同药物作对照品。要求：对照药物中所含待检杂质符合限量要求。

色谱分析方法

HPLC法检查杂质的方法有四种：（二）高效液相色谱法（HPLC法）外标法加校正因子的主成自身对照法不加校正因子的主成自身对照法峰面积归一化法高效液相色谱法

01外标法

适用于有对照品的杂质；要求进样时采用定量环或自动进样器以便精确控制进样量。

高效液相色谱法

01外标法

供试品溶液杂质对照品溶液供试品溶液对照品溶液进样记录色谱图杂质峰AX和AR计算高效液相色谱法

02加校正因子的主成分自身对照测定法

适用于已知杂质控制以主成分为对照，用杂质对照品测定杂质的校正因子杂质校正因子用于校正该杂质的实测峰面积实际测定对照品液：供试品的稀释液

高效液相色谱法

杂质对照品和药物对照品配制成一定浓度的溶液;色谱分离、分析;按内标法求出杂质相对于主成分的校正因子f.AS,CS:药物对照品峰面积和浓度；AR,CR:杂质对照品峰面积和浓度。

杂质校正因子的计算高效液相色谱法

AS`,CS`:对照液(供试品稀释液)

药物峰面积和浓度；AX,CX:供试液中杂质峰面积和浓度

供试液稀释成与杂质限量相当的溶液作为对照液;取供试液和对照液分别进样；测量供试液色谱图中各杂质的峰面积，分别乘以相应的f;与对照液主成分峰面积比较，计算杂质含量。杂质分析过程高效液相色谱法

优点考虑到杂质与主成分响应因子的不同所引起的测定误差;准确度较好。

高效液相色谱法

03不加校正因子的主成分自身对照法

适用于没有杂质对照品;

杂质含量较小且杂质结构与主成分相似;

杂质相对于对主成分的相对校正因子

0.9～1.1。

高效液相色谱法

供试液稀释成与杂质限量相当的溶液作为对照液；取供试液和对照液分别进样；测量供试液色谱图中各杂质的峰面积;与对照液主成分峰面积比较，计算杂质含量。AS,CS:对照液(供试品稀释液)药物峰面积和浓度；AX,CX:供试液中杂质峰面积和浓度；杂质分析过程杂质分析方法

04面积归一化法

适用于供试品中结构相似,相对含量较高且限度范围较宽的杂质含量粗略考查；计算各杂质峰面积占总峰面积百分率。供试品溶液进样记录色谱图各组分峰面积计算色谱分析方法

主要用于药物中挥发性的杂质检查。（三）气相色谱法（GC法）内标法加校