泌尿外科解剖和生理专家讲座

泌尿系统解剖与生理广西中医学院第一从属医院泌尿外科黄新泌尿外科解剖和生理第1页泌尿系统解剖肾上腺肾输尿管膀胱尿道前列腺阴囊内容物泌尿外科解剖和生理第2页肾上腺解剖肾上腺（suprarenalgland）位于腹膜后隙，肾脏上方,左侧为半月形，右侧似三角形。肾上腺动脉有三支：膈下动脉－－肾上腺上动脉腹主动脉－－肾上腺中动脉肾动脉－－肾上腺下动脉一、肾上腺解剖泌尿外科解剖和生理第3页左肾上腺静脉－左肾静脉右肾上腺静脉－下腔静脉少数汇入右膈下静脉右肾静脉泌尿外科解剖和生理第4页二、肾上腺生理

肾上腺皮质由外向内可分为３层即球状带、束状带和网状带。球状带主要分泌醛固酮，又称为盐皮质激素，其主要功效是促进肾脏对钠离子主动重吸收和对钾离子排泄，维持体内水恒定，增加组织液和血量，这对生命至关主要。束状带及网状带分泌糖皮质激素，主要为皮质醇。皮质醇主要作用是促进糖异生和升高血糖。促使蛋白质分解，使脂肪组织中脂肪分解并在体内重新分布。皮质醇在机体处于应激状态时可提升其耐受能力。皮质醇还含有抗炎抗过敏和抑制免疫功效作用。

肾上腺髓质由嗜铬细胞组成，主要分泌肾上腺素，也可分泌少许去甲肾上腺素。肾上腺素和去甲肾上腺素对心血管、内脏平滑肌活动有调整作用。肾上腺髓质是人体极主要内分泌腺，髓质分泌功效障碍将引发人体失去有效应急能力泌尿外科解剖和生理第5页肾脏解剖与生理一、肾脏解剖：肾位置肾（kidney）位于脊柱两侧，贴附于腹后壁

泌尿外科解剖和生理第6页肾毗邻（前面观）泌尿外科解剖和生理第7页肾毗邻（后面观）泌尿外科解剖和生理第8页肾蒂结构和排列肾蒂（renalpedicle）由出入肾门肾血管、肾盂、神经和淋巴管组成。由前向后为：静、动、盂；由上向下为：动、静、盂。泌尿外科解剖和生理第9页肾血管与肾段泌尿外科解剖和生理第10页肾静脉泌尿外科解剖和生理第11页肾被膜肾被膜有三层：由外向内依次为肾筋膜、脂肪囊和纤维囊。泌尿外科解剖和生理第12页肾被膜（纵面观）泌尿外科解剖和生理第13页输尿管解剖输尿管(ureters)：全长25－30cm。可分三部：⑴腹部（腰段），从肾盂与输尿管交界处至跨越髂血管处；⑵盆部（盆段），从跨越髂血管处至膀胱壁；⑶壁内部（膀胱壁段），斜行穿膀胱壁。泌尿外科解剖和生理第14页输尿管动脉泌尿外科解剖和生理第15页腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理第16页膀胱位置与毗邻膀胱(urinarybladder)位于盆腔前部，空虚时上界约与骨盆上口相当，膀胱体上面有腹膜覆盖，下外侧面紧贴耻骨后隙疏松结缔组织、肛提肌和闭孔内肌。男性膀胱底上部借直肠膀胱陷凹与直肠相邻，下部与精囊和输精管壶腹相邻；膀胱颈与前列腺相接。女性膀胱底与子宫颈和阴道前壁相贴，膀胱颈与尿生殖膈相邻。泌尿外科解剖和生理第17页膀胱血供髂内动脉前干膀胱上动脉膀胱下动脉膀胱上中部膀胱下部髂内静脉泌尿外科解剖和生理第18页前列腺位置泌尿外科解剖和生理第19页阴囊层次泌尿外科解剖和生理第20页肾上腺解剖1.选题背景

2.研究现实状况3.研究目标和研究内容4.技术路线5.本课题特点6.部分预试验结果7.试验进展安排泌尿外科解剖和生理第21页泌尿外科解剖和生理第22页2HIF-1α结构功效及其靶基因

1胃癌化疗及多药耐药研究概况3HIF-1α肿瘤中表示及与生物行为关系4HIF-1α与化疗耐药关系5p53基因与HIF-1α表示关系泌尿外科解剖和生理第23页

1胃癌化疗及多药耐药研究概况胃癌是常见消化道恶性肿瘤，化疗仍是治疗中晚期胃癌主要伎俩，但因为肿瘤多药耐药（MDR），化疗效果并不理想。当前认为mdr-1基因与MDR相关，其编码p-糖蛋白(p-gp)，能把结构功效不一样药品泵出细胞外而降低药品浓度,从而引发肿瘤耐药．不过对于癌症中p-gp过表示调整机制当前尚不清楚。泌尿外科解剖和生理第24页MDR基本概念

MDR是指抗某种细胞毒药品耐药细胞系对许多结构上无关和作用机制不一样其它抗癌药品产生交叉抗药性,是一个独特广谱耐药现象泌尿外科解剖和生理第25页耐药分类:

原药耐药PDR多药耐药MDR

肿瘤耐药机制

药理耐药.生化耐药

凋亡耐药

细胞动力学耐药泌尿外科解剖和生理第26页经典MDRMDR1基因产物一个细胞膜糖蛋白称为P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)分子量为170KD(P170)P-gp含有能量依赖性“药泵”功效表示水平与耐药程度成正比泌尿外科解剖和生理第27页P-gp介导抗癌药品阿霉素、柔红霉素、表阿霉素米托蒽醌长春花碱、长春新碱乙托泊苷（Etoposide）紫杉醇、泰素帝ActinomycinD泌尿外科解剖和生理第28页恶性肿瘤生长快速,当肿瘤细胞生长超出血管生成速度时,极易发生缺氧.所以肿瘤缺氧是肿瘤恶性进展主要特征.肿瘤细胞可经过各种路径对缺氧进行适应性调整.缺氧诱导因子－1（Hypoxiainduciblefactor1,HIF-1）是调整细胞缺氧反应主要转录因子.泌尿外科解剖和生理第29页泌尿外科解剖和生理第30页TillAcker，etal.Aroleforhypoxiaandhypoxia-inducibletranscriptionfactorsintumorphysiology。

JMolMed,,80:562–575.泌尿外科解剖和生理第31页缺氧诱导因子－1（Hypoxiainduciblefactor1,HIF-1）HIF-1α活性调整亚单位HIF-1β可能与稳定HIF-1及二聚化相关

2.HIF-1α结构功效代谢及其靶基因

泌尿外科解剖和生理第32页泌尿外科解剖和生理第33页泌尿外科解剖和生理第34页泌尿外科解剖和生理第35页缺氧诱导因子1－α代谢泌尿外科解剖和生理第36页

缺氧癌基因激活HER2FRAPHRASCSRC抑癌基因失活VHLPTENp53生长因子或细胞因子

IGR、Insulin、EGF、IL-1

HIF-1α表示调整原因泌尿外科解剖和生理第37页二.研究现状1.HIF-1α在肿瘤细胞中表示位于细胞核内.

2.HIF-1α在各种肿瘤中表示,在肿瘤附近正常组织中不能测及.

3.在结肠癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌研究中发觉，HIF-1α蛋白表示随乳腺癌恶性度升高而增加，且与浸润、淋巴结转移相关泌尿外科解剖和生理第38页4.发觉HIF-1α-/-组剂量反应曲线较HIF-1α+/+组显著左移,IC50也显著降低.5.对肿瘤细胞研究发觉HIF-1α-/-肿瘤细胞对放疗和化疗药品敏感度都有所增加。6.多药耐药基因MDR1是HIF-1α靶基因。泌尿外科解剖和生理第39页7.利用乏氧诱导肺腺癌细胞459表示HIF-1α，发觉p-gp和MRP伴随HIF-1α表示而增加，而且对表阿霉素和顺铂耐药性增强。8.国外研究也发觉，缺氧能造成p-gp和HIF-1α过表示，从而产生对VP-16、博莱霉素和蒽环类耐药。9.国外对卵巢癌研究已表明突变型P53过表示会引发HIF-1α表示升高.泌尿外科解剖和生理第40页待处理问题当前关于HIF-1α与胃癌生物行为及多药耐药机制关系研究报道甚少。

当前对于HIF-1α与ＭＤＲ研究多用基因转染方法，应用原代胃癌体外细胞药品敏感性进行研究报道甚少．泌尿外科解剖和生理第41页三.研究目标和研究内容1.研究目标研究HIF-1α蛋白表示与p-gp表示相关性，探讨其与胃癌细胞多药耐药关系。探讨HIF-1α表示与胃癌生物学行为关系.探讨HIF-1α蛋白表示与突变P53过表示相关性.

泌尿外科解剖和生理第42页2.研究内容

１对６０例新鲜胃癌标本进行细胞纯化，短期原代培养，应用流式细胞技术和MTT法检测其对惯用化疗药品敏感性．２应用免疫组化技术检测60例胃癌石蜡标本P53、P-gp、HIF-1α蛋白表示，并搜集临床病理资料。泌尿外科解剖和生理第43页３应用RT-PCR方法检测相同60例新鲜胃癌细胞HIF-1αmRNA表示水平。

４应用TUNEL、荧光显微镜等方法检测化疗药诱导胃癌细胞凋亡后形态学改变。泌尿外科解剖和生理第44页四.技术路线HIF-1αRT-PCR免疫组化胃癌手术标本细胞分离、短期培养ＭＴＴ及流式技术检测化疗药品体外敏感性HIF-1α、p-gp、P53免疫组化化疗药诱导胃癌细胞凋亡后形态学改变对结果进行统计分析泌尿外科解剖和生理第45页五.本课题特点

从细胞缺氧角度探讨HIF-1α蛋白表示与p-gp表示相关性，探讨其与胃癌细胞多药耐药关系。国外有类似研究，国内未见报道关于HIF-1α表示与胃癌生物学行为研究国内未见报道。

新奇性关于胃癌中HIF-1α蛋白表示与P53过表示关系在国内未见报道泌尿外科解剖和生理第46页

实用性探讨HIF-1α蛋白表示与p-gp表示相关性，可望从一新角度阐述耐药发生机制。

研究HIF-1α表示与胃癌生物学行为关系，探讨其作为一个新独立预后参数可能性。

探讨HIF-1α蛋白表示与P53过表示关系有利于更加好了解胃癌病理生物学特征。泌尿外科解剖和生理第47页

国外已经有类似文件报道。可行性手术标本充分，设备齐全，预试验结果

科学性泌尿外科解剖和生理第48页免疫组化判断标准：P53:无阳性细胞或阳性细胞<5%为阴性,<

２５％(+),<

５０％(２＋)，<

７５％强阳性(３＋)，＞７５％为（４＋）。

P-gp为胞质和(或)胞膜阳性,阳性细胞<5%为阴性,5%～15%为+,≥16%为２＋

。HIF-1α判断标准：＜１％为阴性，＜１０％为（＋），１１－５０％为（２＋），＞５０％为（３＋）．泌尿外科解剖和生理第49页药品敏感性判断：高度敏感:抑制率<50%;中度敏感:抑制率30%～50%;不敏感:抑制率<30%。

泌尿外科解剖和生理第50页HIF-1α阳性HIF-1α阴性p-gp阳性p-gp阴性HIF-1α阳性HIF-1α阴性药品敏感性与HIF-1α关系泌尿外科解剖和生理第51页HIF-1α表示与胃癌生物学行为研究

按临床病理分期、组织类型、淋巴结转移是否分组

泌尿外科解剖和生理第52页HIF-1α蛋白表示与P53过表示关系HIF-1α阳性HIF-1α阴性P53阳性p53阴性泌尿外科解剖和生理第53页６部分预试验结果泌尿外科解剖和生理第54页胃癌中突变p53蛋白表示（10*20倍）细胞核内表示

泌尿外科解剖和生理第55页胃癌中p-gp表示（10*20倍）细胞膜/浆表示泌尿外科解剖和生理第56页预试验结果小结１基本掌握胃癌细胞分离和短期原代培养方法２原代胃癌细胞ＭＴＴ法体外药品敏感试验３基本掌握免疫组织化学试验流程泌尿外科解剖和生理第57页凋亡细胞DNA片断电泳分析1.未加化疗药组2.顺铂1ppc24小时3.顺铂10ppc24小时4.顺铂10ppc48小时5.顺铂10ppc72小时12345泌尿外科解剖和生理第58页泌尿外科解剖和生理第59页七.课题研究进度安排

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