尿酮体尿胆红素尿胆原尿血红蛋白尿肌红蛋白乳糜尿定性检查

邱群凤尿液检验2016Mar.龙岩市第一医院1.尿酮体检查2.尿胆红素检查3.尿胆原检查4.尿血红蛋白检查5.尿肌红蛋白检查6.乳糜尿检查.

当机体能量代谢发生障碍，脂肪分解代谢增加，血中酮体升高，过多的酮体从尿中排出，称为酮尿。实验一尿酮体改良rothera法定性检查(罗瑟拉).实验一尿酮体改良rothera法定性检查【原理】本法对乙酰乙酸灵敏度为80mg/L

丙酮灵敏度为1000mg/L+亚硝基铁氰化钠→紫色化合物丙酮乙酰乙酸

碱性条件亚硝基铁氰化钠法(改良rothera法).【操作】（详见实验课本P96）

1．加酮体粉:1小勺

2．滴加尿液:2~3滴,没过酮体粉为宜

3．观察结果:如下规则

①立即出现深紫色强阳性

+++~++++②立即呈现淡紫色后渐转深紫色阳性

++③逐渐呈现淡紫色弱阳性

+④5min内无紫色出现阴性-.【干扰因素】假阳性较多肌酐、肌酸，高色素尿，酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物假阴性①标本收集和保存不当；②亚硝基铁氰化钠对温度、热度或光线很灵敏；③试带受潮失活。.

【注意事项】1.试剂配制要准确,易受潮,应密闭、干燥保存；2.乙酰乙酸不稳定,丙酮易挥发,使用新鲜尿液；3.控制反应温度,实验室温度过低时在30℃水浴箱中完成；4.存在大量非结晶尿酸盐时，可能出现橙色反应影响结果判断，离心除去。

.实验二尿胆红素Harrison法定性检查

胆红素+氯化钡→沉淀+三价铁→胆青素/胆绿素/胆黄素

(蓝绿色/绿色或黄绿色)酸性条件↓【原理】(哈里森).【操作】（详见实验课本P97）

1.加尿液:加尿液5ml2.吸附胆红素:加2.5ml氯化钡溶液于尿中→混匀→离心3~5min→弃上清液3.加试剂:向沉淀表面加Fouchet试剂2滴→放置片刻,观察沉淀表面颜色变化4.判断结果

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①沉淀即刻变为蓝绿色强阳性+++②沉淀变为绿色

阳性++③沉淀逐渐变为淡绿色

弱阳性

+④长时间不变色

阴性-【结果判断】.【干扰因素】假阳性水杨酸、阿司匹林、牛黄→紫红色→干扰Harrison法.假阴性①标本保存不当（未避光）②Fouchet试剂加入的量不准确.

【注意事项】1.使用新鲜尿液,避光收集,碱性尿液先酸化;2.保证硫酸根离子充足,确保能产生沉淀;3.严格控制加入Fouchet试剂量;4.注意可能影响结果药物的因素;5.改实验法优点:灵敏度较高,0.9umpl/L.实验三尿胆原改良Ehrlich法定性检查

【原理】尿胆原+对二甲氨基苯甲醛→樱红色化合物

①简单快速，分析仪，定性或定量；②不同试带灵敏度不同（1-4mg/L）。③偶氮反应试带不受胆红素影响，对尿胆原特异。方法学评价(埃利希)酸性条件↓.【操作】（详见实验课本P99）

1.加入氯化钡除去胆红素:尿液与Bacl2比例为4:12.加尿液:加尿液`shangqingye2ml3.加试剂:加Ehrlich试剂0.2ml,室温下静置10min4.观察结果:在白色衬纸下,从管口向管底观察颜色变化5.稀释阳性标本并重复操作(P99)

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①不变色,加温后无反应阴性-②10min后呈微红色

弱阳性

+③10min后呈樱红色

阳性++④立即呈深红色

强阳性+++【结果判断】.干扰因素评价标本因素①标本久置，尿胆原氧化为尿胆素--假阴性②尿胆原含量与饮水量、排尿时间、尿液PH有关药物因素①假阳性：吩噻嗪类、氯丙嗪类、磺胺类、普鲁卡因②假阴性：大量VitC、长期服用广谱抗生素。内源性物质假阳性：卟胆原、吲哚、胆红素→红色。

【干扰因素】Ehrlich醛反应.

【注意事项】1．尿液标本避光收集2.尿胆原与饮水量,排尿时间,pH的关系3.控制试剂与标本比例4.注意实验温度5.尿液标本中含有影响结果的物质6.稀释阳性标本时不高于1:1607.Ehrlich试剂与尿液的比例应控制在10:1.实验四尿血红蛋白邻联甲苯胺法定性检查尿液中Hb来源：

①血管内溶血

②尿路出血正常人血浆中游离Hb微量(50mg/L),与结合珠蛋白形成Hb-Hp复合物，在单核-巨噬细胞系统代谢，故尿中Hb极微。定性：阴性验证尿液潜在出血的试验:

隐血试验(occultbloodtest).【原理】H2O2

───→亚铁血红素O(氧化)邻甲苯胺─→邻甲偶氮苯(蓝色)（色素原）.【操作】（详见实验课本P101）

1.滴加尿液：先滴1滴在滤纸上2.烘干滤纸：烘干后痕迹处继续滴1滴尿液,反复3~4次3.加试剂:邻联甲苯胺冰醋酸溶液2~3滴,再滴3%过氧化氢2~3滴4.观察结果:立即观察颜色变化

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①加入试剂后立即出现黑褐色++++②加入试剂后立即出现蓝褐色

+++③加入试剂后由浅蓝褐色逐渐变为明显的蓝褐色++④加入试剂后10s由浅蓝色逐渐变为蓝色

+⑤加入试剂2min后仍不显色-【结果判断】.

【注意事项】1.器材合格:滤纸质量优良,试验用具无血迹或脓液2.标本新鲜:可先煮沸,以破坏白细胞中的过氧化氢酶及其他易热性触酶3.烘干滤纸:应少量多次并保证标本量足够4.保证试剂有效5.控制试剂剂量.实验五尿肌红蛋白邻联甲苯胺法定性检查【原理】肌红蛋白和血红蛋白一样，分子中含血红素基因，具有类过氧化物酶活性能用联苯胺和邻联甲苯胺与过氧化氢反应检出．肌红蛋白能溶于80%饱和度的硫酸铵溶液中而血红蛋白则不能，因而可鉴别．.【操作】（详见实验课本P102）

1.以磺基水杨酸定性尿蛋白2.以邻联甲苯胺法定性血红蛋白3.加尿液,加入硫酸铵沉淀血红蛋白4.再次定性血红蛋白5.判断结果

①血红蛋白沉淀为蓝色,上清液正常②肌红蛋白

上清液为蓝色,无蓝色沉淀③血红蛋白+肌红蛋白上清液出现蓝色,沉淀亦出现蓝色.

【注意事项】1.标本新鲜2.加入硫酸铵应缓慢,防局部温度过高,将肌红蛋白一并沉淀3.可用NaOH调节pH至7.0~7.5.实验六乳糜尿定性检查【原理】乳糜由脂肪微粒组成,可溶于乙醚,较大脂粒可通过脂溶性染料苏丹3着色识别,而脂肪被萃取而使尿液由乳浊变澄清.为乳糜定性试验阳性.