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原生质体的制备第1页,共10页,2023年,2月20日,星期五目的要求掌握植物原生质体的分离制备技术,观察原生质体的形态。第2页,共10页,2023年,2月20日,星期五实验原理分离原生质体常采用酶解法。其原理是根据由纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶配制而成的溶液对细胞壁成分的降解作用,而使原生质体释放出来。原生质体的产率和活力与材料来源、生理状态、酶液的组成、以及原生质体收集方法有关。酶液通常需要保持较高的渗透压,以使原生质体在分离前细胞处于质壁分离状态,分离后不致膨胀破裂。渗透剂常用甘露醇,山梨醇,葡萄糖或蔗糖。酶液中还应含一定量的钙离子,来稳定原生质膜。游离出来的原生质体可用过筛法收集。第3页,共10页,2023年,2月20日,星期五实验用品一、材料菠菜二、器材显微镜,擦镜纸,剪子,镊子,小平皿,吸管四支,直式漏斗,300目尼龙网,10ml离心管,载玻片,盖玻片。三、试剂1.洗涤液:甘露醇0.6M;CaCl2·2H2O8mMNaH2PO4·H2O2Mm,pH5.62.酶液:第4页,共10页,2023年,2月20日,星期五实验方法1、酶液的制备2、材料准备3、酶解4、洗涤第5页,共10页,2023年,2月20日,星期五观察纯化后的原生质体第6页,共10页,2023年,2月20日,星期五胚性愈伤组织亦是原生质体分离的主要材料第7页,共10页,2023年,2月20日,星期五思考题1、何为原生质体2、分离得到的原生质体可有哪些用途?3、为什么酶解材料时,酶解液要保持较高的渗透压?第8页,共10页,2023年,2月20日,星期五淘宝网夏靴,网格/item.htm?id=4863586412&is_b=1白色皮靴/item.htm?id=6848233607宿腿长靴/item.htm?id=7754262668&is_b=1拉链长链/item.htm?id=7646097267&is_b=1第9页,共10页,2023年,2月20日,星期五米色韩版风衣/item.htm?id=7898580364&is_b=1粉色长款风衣/item.htm?id=3082541134&is_b=1紫色带毛风衣/item.htm?id=8262243889&is_b=198元紫色风衣/item.htm?id=3485084505&is_b=1紫色短款风衣
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