选修三复习6221课件

专题1基因工程（DNA分子水平）1、基因工程的原理：基因重组2、基因工程的基本工具限制酶

DNA载体①分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）来源：原核生物功能：识别DNA特定序列，切割特定部位

的磷酸二酯键，具专一性。结果：黏性末端和。②.“分子缝合针”——DNA连接酶

E·coliDNA连接酶作用：黏性末端之间的磷酸二酯键T4DNA连接酶

来源：T4噬菌体作用：能缝合两种末端③.“分子运输车”——载体条件：A.能在受体细胞中复制并稳定保存。B.具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。C.具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。质粒：结构简单、自我复制、双链环状DNA载体种类：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒3、基因工程的基本操作程序①目的基因的获取方法：基因文库中获取（基因组文库，cDNA文库）

人工合成（反转录法）

PCR（原理：DNA复制。条件：引物、模板DNA、四种脱氧核苷酸、DNA聚合酶）②基因表达载体的构建（核心）组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因4、基因工程的应用基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用转基因生物：导入外源基因的生物

5、蛋白质工程制造新的蛋白质

又称为第二代的基因工程基本途径：预期的蛋白质功能、设计蛋白质结构、推测氨基酸序列、合成基因。依据：蛋白质的功能本质：改造基因结构专题22.1植物细胞工程1.植物细胞工程

原理：细胞全能性2.植物组织培养：离体的植物器官、组织或细胞最终形成完整植物体3.用途：微型繁殖、作物脱毒（分生区附近的病毒极少或没有）、制造人工种子（根、芽）、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产（愈伤组织）。诱导融合的方法：物理法离心、振动、电激。

化学法聚乙二醇（PEG）融合完成的标志：杂种细胞再生出细胞壁（高尔基体）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。植物体细胞杂交原理：细胞的全能性、细胞膜的流动性2.2动物细胞工程1.动物细胞培养（原理：细胞增殖）：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞→制成细胞悬液→原代培养（10代内）→重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→传代培养。2.细胞贴壁和接触抑制：3.动物细胞培养条件：①无菌、无毒的环境②营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清、血浆。③温度④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2是维持培养液的pH。5.动物细胞融合原理：细胞膜的流动性诱导方法：物理、化学、生物（灭活仙台病毒）意义：克服了远缘杂交的不亲和性应用：制备单克隆抗体动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较6.单克隆抗体杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。单克隆抗体流程图专题3胚胎工程

1.精子与卵细胞形成的区别场所、时间（精母细胞和卵母细胞）、精子有变形、减一减二是否连续2.精细胞变精子（每部分变化）3.精卵的准备4.受精过程（2道屏障、是否受精标志和受精完成标志）5.胚胎发育过程卵裂期特点6.卵母细胞的采集方法7.精母细胞的采集方法、获能方法8.早期胚胎培养液成分9.胚胎移植流程图10.胚胎移植生理学基础11.胚胎分割：时期、均等分割原因12.胚胎干细胞特点3.受精：受精场所：输卵管受精准备：精子获能

卵子（减二中期）排卵:卵子从卵泡中排出，排出的卵可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞。受精阶段：顶体反应——穿越放射冠——穿越透明带（透明带反应——第一道屏障）——精子入卵（卵黄膜封闭作用-—第二道屏障）——雄原核、雌原核形成——雌雄原核融合（受精完成标志）是否受精标志：卵黄膜与透明带间隙可观察到两个极体4.胚胎发育：受精卵——胎儿（幼体）卵裂期：有丝分裂，细胞未分化

细胞数量增加，有机物总量减少，总体积不增加或略有减小。每个细胞体积变小，DNA不变。

桑椹胚：32个细胞左右的胚胎

全能细胞囊胚：细胞开始分化

内细胞团：将来发育成胎儿的各种组织；

滋养层细胞：将来发育成胎膜和胎盘

囊胚腔孵化：原肠胚：原肠腔

有三胚层的分化程度：受精卵>各种干细胞>精细胞（卵细胞）>体细胞5.体外受精：有性生殖过程卵母细胞的采集方法：

从输卵管冲取卵子（可直接受精）

从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞卵母细胞的培养：减数第二次分裂中期精子的采集：假阴道法、手握法和电刺激法精子获能方法：培养法化学法（肝素或钙离子载体）受精：获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程胚胎的早期培养培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存7.胚胎分割：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖胚胎分割时间：桑椹胚或囊胚操作过程：对囊胚阶段的胚胎要将内细胞团均等分割，

否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。8