中药含量测定技术-课件

1第四章-复习杂质概念来源分类重金属概念检查原因检查方法干扰物排除最终产物砷盐检查原因药典收载方法检查中酸性SnCl2作用？2中药制剂

含量测定技术

3方法化学方法*仪器分析方法有效成分指标性成分毒性成分分析成分中药制剂含量测定技术5仪器分析法之紫外-可见分光光度法6A:吸光度K:吸收系数C:溶液浓度L:液层厚度

基本原理:Lamber-Beer定律紫外-可见分光光度法7吸收系数两种表示法：摩尔吸收系数ε：λ一定，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度百分含量吸收系数/比吸收系数λ一定，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度紫外-可见分光光度法*8紫外-可见分光光度法吸收光谱（吸收曲线）：定性依据:

吸收峰→λmax

吸收谷→λmin

肩峰→λsh定量依据:吸收峰→λmax10钨灯或卤钨灯：可见光源350～1000nm氢灯或氘灯：紫外光源200～360nm吸收池：玻璃--能吸收UV光，仅适用于可见光区

石英--不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）光源紫外-可见分光光度法11测定波长的选择：max吸光度读数范围的选择：A=0.3～0.7UV吸光度测量的条件选择样参调节光路光学性质和厚度相同样品池样品溶液，参比池空白溶液样品池参比池配制样品的溶剂空白溶液ATA¾¾¾®¾+==¾¾¾®¾+¾¾¾¾¾¾®¬«%100013标准曲线又称工作曲线。如吸光光度法，在绘制时，首先在一定条件下配制一系列具有不同已知浓度吸光物质的标准溶液，然后在确定的波长和光程等条件下，分别测量系列溶液的吸光度，绘制A-c曲线，从而得到一条通过原点的直线，即标准曲线。当需要对某未知液的浓度cx进行测定时，只需要在相同条件下测得未知液的吸光度Ax，就可由cx=Ax/εb计算得出或直接在标准曲线上查得cx。在实际操作中，应注意调整cx的大小，使其对应的Ax处于标准曲线的直线范围（线性范围）之内。UV-标准曲线法14UV-标准曲线法

标准曲线的直线部分所对应的被测物质浓度（或含量）的范围称为该方法的线性范围。15

标准曲线是依据标准系列的浓度（或含量）和其相对应的相应信号测量值来绘制的。如浓度（或含量）分别为x1,x2…xn，其相应信号(吸光度)的测量值分别为y1,y2…yn，用简单的方法很难绘制出能准确反映y与x之间关系的标准曲线。通常，用“一元线性回归法”来给出y与x的关系式

y=a+bx

（1-1）式中其中

式(1-1)称为一元线性回归方程，b称为回归系数，即回归直线的斜率，a为截距。UV-标准曲线法17例：用光度法测定合金钢中Mn的含量，吸光度与Mn的含量间有下列关系：

Mn的质量/µg00.020.040.060.080.100.12未知样

吸光度/A0.0320.1350.1870.2680.3590.4350.5110.242

试求出标准曲线的回归方程及其相关系数r并计算未知样品中Mn的含量解：此组数据中，组分浓度为零时，吸光度不为零，这可能是在试剂中含有少量Mn，或者含有其它在该测量波长下有吸光的物质。设Mn含量值为x，吸光度值为y，按公式计算回归系数a，b值。n=7。所以该标准曲线的回归方程为

y=0.038+3.95xUV-标准曲线法-实例18未知样品的吸光度为y=0.2420.242=0.038+3.95x所以x=0.052µg故求出样品中含Mn为0.052µg(注：该题可用计算机方便统计处理)相关系数UV-标准曲线法-实例19-特点：用于可见分光光度法

批量生产曲线可多次使用UV-标准曲线法21吸收系数法含量（%）=A×D×V×L×100×W×100%注意：仪器波长空白校正吸收度准确度的检定杂散光的检查优点：无需对照品，方法简便A×D×1%×V×L×W含量（%）=×100%22注意事项光源选择波长吸收池种类溶液高度吸收度读数范围供试品应取2份

（对照品比较法，对照品一般也应取2份）平行操作，平均偏差应在±0.5%以内23例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定本品为黄杨宁经加工制成的片剂。每片含环维黄杨星D0.5mg或1mg。可用对照品比较法测其含量。环维黄杨星D25对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的环维黄杨星D对照品25mg（实际称取24.94mg)，置250ml量瓶中，加甲醇70ml使溶解，用0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含黄杨星D10µg的对照溶液（实际浓度C对=9.976µg/ml）试写出计算过程例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定26供试品溶液的制备取本品20片（标示量为0.5mg/片），精密称定（2.050g)，研细，精密称取适量（约相当于黄杨宁0.5mg）(称取0.1021g)，置50ml量瓶中，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至近刻度，80℃水浴恒温1.5小时后取出，冷却至室温，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至刻度，摇匀，离心6分钟（3000转/分），取上清液，即可若标示量为1mg/片，其他数值不变，试求取样范围？例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定29六味地黄颗粒中牡丹皮的含量测定取装量差异项下的本品约2g，研细，精密称定，用水蒸汽蒸馏，收集馏出液约450ml，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。照分光光度法在274nm波长处测定吸收度，按丹皮酚（C9H10O3）的吸收系数为862计算，即得。药品标准规定每袋（装量为5g）含牡丹皮按丹皮酚（C9H10O3

）计，不得少于6.0mg。301g供试品中含牡丹皮按丹皮酚计，含量为：含量（%）=A供×1%×500.0×1000862×m供每袋六味地黄颗粒（5g装）含牡丹皮按丹皮酚计含量为：含量（mg/g）=A供×1%×500.0×1000×平均装量862×m供六味地黄颗粒中牡丹皮的含量测定31仪器分析法之薄层扫描法（TLCS）32概念：指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品质量检测的方法色谱条件：选择性好，组分能完全分离，斑点对称、均匀、不拖尾。测量方法：多使用反射法光源氘灯：200~370nm钨灯：370~700nm氙灯汞灯薄层扫描法33薄层扫描法有外标法和内标法。常用外标法外标法系指将一定量的供试品溶液和对照品溶液分别交叉点加在同一块薄层板上，展开，显色，定位，扫描待测组分和对照品斑点，测定相应的吸光度或荧光强度积分值，计算被测成分的含量。外标一点法：标准曲线通过原点，马钱子散等个别品种外标两点法：标准曲线不通过原点，绝大多数品种采用所谓一点法是指在一块薄层板上对照品的浓度为一种点样浓度，两点法则是指在一块薄层板上对照品的浓度为两种点样浓度。操作方法：供试品溶液：两份或以上点样：供试品和对照品交叉点样，每份原点不得少于2个展开：展距为15cm薄层扫描法34扫描方式：

单波长

双波长测定波长被测组分λmax，

参比波长组分无吸收位置上若背景有均匀污染时，可选择背景光谱中与测定波长的等吸收处。薄层扫描法薄层扫描法计算外标一点法外标二点法35

薄层扫描法马钱子散中马钱子的含量测定：【含量测定】取装量差异项下的本品约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷20ml，浓氨试液1ml，轻轻摇匀，称定重量后，于室温放置24小时，再称定重量，用三氯甲烷量补足减失重量，充分振摇，滤过，滤液作为供试品溶液。另取士的宁对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，分别吸取供试品溶液8μl和对照品溶液4μl，交叉点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液（16:12:1:4）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。照薄层色谱法（附录ⅥB薄层色谱扫描法）进行扫描，波长：λS=257nm，λR＝300nm，测量供试品与对照品吸光度积分值，计算，即得。实验数据：m对=24.90mg,mS=0.5324,A对=22000.73,A供=15659.12本品每袋含马钱子以士的宁计（C21H22N2O2）应为7.2～8.8mg。36薄层扫描法马钱子散中马钱子的含量测定37薄层扫描法大山楂丸中山楂的含量测定：【含量测定】取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约3g，精密称定，加水30ml，60℃水浴温热使充分溶散，加硅藻土2g，搅匀，滤过，残渣用水30ml洗涤，100℃烘干，连同滤纸一并置索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流提取4小时，提取液回收溶剂至干，残渣用石油醚（30～60℃）浸泡2次（每次约2分钟），每次5ml，倾去石油醚液，残渣加无水乙醇-三氯甲烷（3:2）的混合溶液适量，微热使溶解，转移至5ml量瓶中，用上述混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，分别精密吸取供试品溶液5μl、对照品溶液4μl与8μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（20:5:8:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法（附录ⅥB薄层色谱扫描法）进行扫描，波长：λS=535nm；λR=650nm，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。测得数据：A供=5659.12、A对1=2057.73、A对2=7901.25。本品每丸含山楂以熊果酸（C30H4803）计，不得少于7.0mg。38薄层扫描法大山楂丸中山楂的含量测定39补:分析天平使用和称量感量0.1mg0.01mg0.001mg用途：较精密的检验工作称量含量测定对照品称量滴定液标化微量水分测定40补:分析天平使用前准备精度选择：精密称定大于100mg，感量为0.1mg天平100~10mg，感量为0.01mg天平小于10mg，感量为0.001mg天平检查该天平的使用登记表检查水准器内的气泡：水准器圆的中心位置检查硅胶软毛刷轻刷天平调好零点41高效液相色谱法在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法适用范围溶解后能制成溶液的样品不受样品挥发性和热稳定性的限制分子量大、难气化、热稳定性差及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%特点高柱效（n=104片/米）高灵敏度高选择性分析速度快42高效液相色谱法仪器高压输液系统、进样系统、色谱系统、检测系统、数据处理系统1.储液罐；2.脱气装置；3.梯度洗脱；4.高压输液泵；5.流动相流量显示；6.柱前压力表；7.输液泵头；8.过滤器；9.阻尼器；10.进样装置；11.色谱柱；12.检测器；13.数据处理系统；14.废液储罐43高效液相色谱法仪器高压输液系统贮液罐：盛装流动相过滤器：过滤流动相中的尘粒或不溶性的颗粒物质高压输液泵：完成流动相的输送任务进样系统六通进样阀进样：定量环定量和微量注射器定量自动进样器色谱系统：色谱柱和柱温箱检测系统：紫外检测器（UVD）、二极管阵列检测器（DVD）、荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器数据处理系统44HPLC进样装置隔膜进样（高分子有机硅胶垫→进样室）HPLC系统压力太大，必须停泵进样（早期）阀进样：不必停泵，六通阀45透明(棕色)玻璃样品瓶自动进样器高效液相色谱法色谱柱--ODS柱非极性固定相反相色谱法流动相：极性流动相甲醇-水乙腈-水洗脱梯度洗脱等度洗脱极性大组分先出柱，极性小的组分后出柱46

高效液相色谱法高效液相色谱法HPLC流出曲线和色谱峰流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线色谱峰：流出曲线上突起部分4748基本概念基线：当没有待测组分进入检测器时，反映检测器噪音随时间变化的曲线；稳定—平直直线噪音：仪器本身所固有的，以噪音带表示（仪器越好，噪音越小）漂移：（仪器未稳定造成），基线向某个方向稳定移动保留时间tR：从进样开始到组分出现浓度极大点时所需时间，即组分通过色谱柱所需要的时间死时间tm：不被固定相溶解或吸附的组分的保留时间（即组分在流动相中的所消耗的时间），或流动相充满柱内空隙体积占据的空间所需要的时间，又称流动相保留时间调整保留时间tR’：组分的保留时间与死时间之差值，即组分在固定相中滞留的时高效液相色谱法色谱图及其参数（见图）保留时间tR

：定性峰高h

：峰顶到基线的距离。可用于定量半峰宽W1/2：峰高一半处的宽度峰宽W：从色谱峰两侧拐点作切线与基线相交部分峰面积A：色谱峰与基线之间所包括的面积，常用来定量49高效液相色谱法不对称因子正常峰（对称）非正常峰前沿峰拖尾峰色谱峰——fs在0.95~1.05之间——fs小于0.95——fs大于1.05HPLC流出曲线和色谱峰高效液相色谱法系统适用性实验：理论塔板数（n）：分离度（R）：重复性对照溶液（待测物质或其他）连续进样3～5次相对标准偏差应不大于2.0%拖尾因子（T）：0.95～1.05高效液相色谱法分离度计算相临两组分间峰顶间距离是峰底宽平均值的几倍（衡量色谱分离条件优劣的参数）5222112WWttRRR+-==峰宽和之半）保留值之差（峰顶间距高效液相色谱法操作方法操作前的准备：仪器检查流动相的制备纯化供试品和对照品溶液配制（各两份）系统适用性试验测定法定量依据：峰面积（或峰高）定量杂质含量：峰面积法53高效液相色谱法含量测定面积归一法[C%]=[Ai/A]×100%内标加校正因子法：少用外标法:常用54高效液相色谱法三黄片（小片）中大黄的测定检验依据（《中国药典》2010年版一部457页）【处方】大黄300g盐酸小檗碱5g黄芩浸膏21g55高效液相色谱法【含量测定】大黄照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备取大黄素对照品和大黄酚对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）混合溶液制成每1ml含大黄素10μg、大黄酚25μg的混合液，即得。供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过三号筛），取约0.26g，精密称定，置锥形瓶中，精密加乙醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，用乙醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液10ml，置烧瓶中，蒸干，加30%乙醇-盐酸（10:1）混合溶液15ml，置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用三氯甲烷强力振摇提取4次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）的混合溶液溶解，转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含大黄以大黄素（C15H10O5）和大黄酚（C15H10O4）总量计，小片不得少于1.55mg；大片不得少于3.1mg。56高效液相色谱法：三黄片中大黄的测定流动相的配制取甲醇（色谱纯）425ml和0.1%磷酸溶液75ml混合均匀，用0.45μm的滤膜过滤，超声处理30min，即得。对照品溶液的制备分别精密称取大黄素对照品25mg和大黄酚对照品63mg，置25ml量瓶中，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）混合溶液至刻度，摇匀，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）混合溶液至刻度，摇匀，用0.45μm的滤膜过滤，即得。供试品溶液的制备取本品20片，用小刀除去包衣（注意勿损失内容物），精密称定，置研钵中研细后，过三号筛，取约0.26g，置锥形瓶中，依法操作，即得。测定，照高效液相色谱法测定。实验数据：20片总重量为5.3100g；m供=0.2610g、m对（大黄素）=0.02509g、m对（大黄酚）=0.06286g；A供（大黄素）=285721、A供（大黄酚）=538079、A对（大黄素）463379、A对（大黄酚）=1300561。57高效液相色谱法：三黄片中大黄的测定58高效液相色谱法：三黄片中大黄的测定

【处方】黄连165g大黄500g黄芩250g【含量测定】照高效液相色谱法(附录ⅥＤ)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇－0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液（用磷酸调节pH值至2.7）(42∶58)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品12.5mg，置250ml量瓶中,加甲醇10ml使溶解,用水稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含黄芩苷50μg)。供试品溶液的制备取本品装量差异项下的本品，研细，取约0.75g，精密称定，置100ml量瓶中,加甲醇10ml，超声处理（功率250W，频率50kHz）10分钟，放冷，加水稀释至刻度,摇匀，离心，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定，即得。本品每袋含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于21mg。59高效液相色谱法：一清颗粒气相色谱法气相色谱法：以气体为流动相的柱色谱分离技术分类按固定相分气-固色谱气-液色谱按分离原理分吸附色谱分配色谱按柱子粗细分填充柱色谱毛细管柱色谱适用性分析气体、易挥发的液体及固体不适合分析不易气化或不稳定性物质样品的衍生化使应用范围进一步扩大

60气相色谱法气相色谱仪的组成载气系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统61

载气→减压→净化→稳压→色谱柱→检测器→记录仪

进样62气相色谱法流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线色谱峰：流出曲线上突起部分63不对称因子正常峰（对称）非正常峰前沿峰拖尾峰色谱峰——fs在0.95~1.05之间——fs小于0.95——fs大于1.05气相色谱法操作前准备样品溶液和对照品溶液的制备：定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制2份。仪器检查系统适用性试验：同高效液相色谱法理论板数分离度重复性：相对标准偏差应不大于2.0%拖尾因子64气相色谱法气相色谱法气相色谱实验条件的选择柱温的选择载气与流速的选择进样条件的选择气化室温度——一般稍高于样品沸点检测室温度——应高于柱温30～500C进样量——不可过大，否则造成拖尾峰66气相色谱法定性定量分析定性分析保留时间比较法定量分析：以峰高或峰面积定量峰面积的测量定量校正因子定量方法归一化法外标法内标法内标对比法67气相色谱法定量分析：以峰高或峰面积定量归一化法前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰依据：组分含量与峰面积成正比优点简便，准确定量结果与进样量、重复性无关（前提→柱子不超载）色谱条件略有变化对结果几乎无影响缺点：

所有组分必须在一定时间内都出峰必须已知所有组分的校正因子不适合微量组分的测定68气相色谱法定量分析外标法：以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法工作曲线法：i纯品→工作曲线，同体积样品与之比较c前提：进入检测器样品量与峰面积成正比外标一点法：一种浓度对照物对比样品中待测组分含量前提：截距为0，对照品浓度与待测组分浓度接近外标两点法：前提：选取两点对照品的浓度，需涵盖待测浓度外标法特点不需要校正因子，不需要所有组分出峰结果受进样量、进样重复性和操作条件影响大每次进样量应一致，否则产生误差69气相色谱法70气相色谱法定量分析-内标法内标法是以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法优点进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰无关适合测定微量组分缺点：制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子对内标物要求：内标物须为原样品中不含组分内标物与待测物保留时间应接近且R>1.5内标物为高纯度标准物质或含量已知物质定量分析-内标法内标法是根据待测组分与内标物的峰面积比与其浓度比在一定浓度范围内呈线性关系，对组分进行定量分析，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量的内标溶液，在相同条件下分别测定其中被测组分和内标物的色谱峰峰面积计算校正因子的计算含量计算71气相色谱法检验依据（《中国药典》2010年版一部471页）【处方】川贝母流浸膏45ml桔梗45g枇杷叶300g薄荷脑0.34g川贝枇杷糖浆由川贝母流浸膏、桔梗、枇杷叶、薄荷脑四味中药制备而成。薄荷脑具局麻作用，有薄荷的特殊香气，味初灼热后清凉，可掩盖苦味；在乙醇、三氯甲烷、乙醚中极易溶解，在水中极微溶解。《中国药典》采用挥发油测定法（附录XD）试验，用环己烷为溶剂提取、气相色谱法测定薄荷脑含量。72气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定薄荷脑对照品气相色谱图川贝枇杷糖浆气相色谱图【含量测定】照气相色谱法（附录ⅥE）测定。色谱条件与系统适用性试验改性聚乙二醇毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25μm）；柱温为110℃，分流进样，分流比为25:1，理论板数按萘峰计算应不低于5000。校正因子测定取萘适量，精密称定，加环己烷制成每1ml含15mg的溶液，作为内标溶液。另取薄荷脑对照品75mg，精密称定，置5ml量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀。吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法精密量取本品50ml，加水250ml，照挥发油测定法（附录XD）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸4小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取2次，每次3ml，用铺有无水硫酸钠0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含薄荷脑（C10H20O）应不少于0.20mg。73气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定校正因子测定精密称定环己酮75.15mg，置5ml量瓶中，加无水乙醇适量溶解并稀释至刻度，作为内标溶液。另精密称取薄荷脑对照品73.26mg，置5ml量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀。吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法精密量取本品50ml，加水250ml，照挥发油测定法（附录XD）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸4小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取2次，每次3ml，用铺有无水硫酸钠0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。实验数据：m内为75.15mg、m对为73.26mg；A内=851302.0、A对=798023.5、=841603.2、A供=814180.5。74气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定75气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定

检验依据（《中国药典》2010年版一部1222页）【检查】乙醇量应为60%～70%（附录ⅨM）测定:精密量取恒温至20℃的颠茄酊8ml和正丙醇5ml，置100ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取恒温至20℃的无水乙醇5ml和正丙醇5ml，置100ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液。取标准溶液和供试品溶液各2μl，连续进样3次，测得校正因子（f）分别为0.6925、0.6921、0.6918。AX/AS分别为1.466、1.458、1.431。求出该供试品乙醇量及其相对标准偏差（RSD）。76气相色谱法-颠茄酊中乙醇量的检查

77气相色谱法-颠茄酊中乙醇量的检查

78气相色谱法79适用性浸出物测定有效成分不清楚的无定量方法的有效成分溶解性能药用部位制剂处方溶剂→浸出物→含量→质量测定方法水溶性浸出物测定法醇溶性浸出物测定法挥发性醚浸出物测定法前处理粉碎二号筛（水、醇）四号筛（醚）80浸出物测定81水溶性浸出物测定法溶剂：水水溶性成分方法冷浸法热浸法不含或少含淀粉、黏液质浸出物测定水溶性浸出物测定法冷浸法:取供试品约4g，称定重量，置250～300ml的锥形瓶中，精密加入水100ml，塞紧，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液20ml，置己干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴蒸干后，于1