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荔枝果肉过氧化物酶提取与初步纯化蔡俊良09食工（2）20090802230研究内容

该试验对荔枝果肉多酚氧化酶的提取和初步纯化进行研究，以便对果肉POD的性质作进一步研究，拟为解决荔枝深加工中酶促褐变问题提供理论。POD活性测定方法

参照陈贻竹和王以柔的方法，并稍作修改。POD测定系统为3mL，其中含2.4mL磷酸缓冲液(pH7．0)、0．1mL1％过氧化氢、0．4mL1％愈创木酚。加入0．1mL酶液后启动反应，于波长470nm和室温下记录2min内OD值的变化。一个酶单位(u)定义为在测定条件下每分钟引起的光密度改变0．001所需的酶量。提取时间对POD酶活的影响在提取时间10min的时间内，酶活仅为763U／mL，随着提取时间的延长，POD酶活有所提高，当提取时间延长至30rain时，酶活增加到l177U／mL。随着浸提时间的进一步的延长，POD酶活几乎保持不变。提取液离子浓度对POD酶活的影响

随着离子浓度的逐步增加，提取液酶活不断增大；当提取液离子浓度增加到0.3mol/L时，提取液酶活达到最大值：而随着离子浓度的进一步增大，酶活则呈下降趋势。当提取液为蒸馏水（离子浓度为0）时，提取液酶活最低。一般情况提取酶活时应选用合适的缓冲液体系。提取液pH值对POD酶活的影响

当提取液pH值分别为5和7的时候，提取酶活都达到峰值。由POD的酶学性质可知，pH值5是POD的最适反应pH。这可能是造成提取液pH为5时，提取酶活也比较大的原因之一。但由于POD在pH为5时，酶活稳定性不高，因此选用pH7为提取液最佳pH值。提取液料液比对POD酶活的影响随着料液比的不断增加，提取液酶活不断增大。这主要是因为料液比不断增加时，POD酶充分溶出，酶活增大；另一方面，料液比的增大也使POD酶液稀释，酶活有所降低。当料液比为l：15(g

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