消毒及灭菌的方法

消毒及灭菌的方法消毒及灭菌的定义：度消毒〔High-levelDisinfection〕、中程度消毒〔Intermediate-levelDisinfection〕、低程度消毒〔Low-levelDisinfection〕三种方式。芽孢、霉菌及病毒，而到达完全无菌之过程。几种非热灭菌技术:灭菌20℃以下，细胞原生质内水分结冰，破坏其胶体状态并机械挤压，刺伤菌体而死亡。真空：抽去空气呈低氧或绝氧状态，抑制正常呼吸枯燥：导致菌体脱水和盐类浓度增高，抑制代谢活动正常进展灭菌的无线电波，与其他波段的无线电波相比，其具有波长短，振荡周期短，似光波性和频率很高等特点。凝固；染色体、细胞膜、酶系统发生变性。γ射线(γ-rayradiation)灭菌γ磁波。γ射线灭菌机理：低剂量的γ射线诱发生物变异。高剂量γ射线使水分子电离，H+OH－，直接作用菌体细胞本身；电离产降解或其他物质分解，造成死亡。灭菌法转成气态渗透到生物体内，使生物致死。常用熏蒸灭菌剂〔HCHO〕R—NH2+HCHOR—NH2•CH2O系统和细胞膜、细胞壁的构造R—SH+CH2OCH2R—S—CH2CH2OH抑制氧化酶和脱氢酶的活性，破坏菌体正常代谢高压杀菌技术100MPa－1000MPa的压力作用〔四级构造的生命活动受到影响甚至停顿，这就可以到达灭菌、杀虫和效高压脉冲电场杀菌技术12－40Kv／cm，脉冲时间为20μs－18μs的条件下，可有效地对食品进展灭菌，且以双矩形波最为有效。脉冲强光杀菌技术JosephDunn等人争论说明，脉冲强光对多数微生物有致死作用。物理方法1、温度 度进展灭菌、消毒或防腐，是最常用而又便利有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活从而起灭菌作用低温１〕干热灭菌法:灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底牢靠，灭菌快速，但物品或试验动物的尸体等的灭菌。地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。２〕湿热灭菌法:加速蛋白质变性而快速死亡。和风味，又进展了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62°C，30分钟既可到达消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死1%2%果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。假设承受间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中全部的微生物。具体做法是：37°C2天再重复上述步骤，三次左右，就可到达灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学试验用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进展公斤/2121°C。在这种状况下，微生物〔包括芽孢〕在15~20分钟便会被杀死，而到达灭菌目延长灭菌时间。降低灭菌效果。２、辐射用越来越广，目前主要应用在以下几个方面：１〕接种室、手术室、食品、药物包装室常应用紫外线杀菌。品，因大量微生物被杀灭，再用冷冻保藏，可使保存期延长。３、过滤比细菌还小的病毒仍旧能留在液体培育基内，有时会给试验带来肯定的麻烦。化学方法是起消毒剂的作用，而不是灭菌剂。的药物，称为防腐剂。但是一种化学药物是杀菌还是抑菌，常不易严格区分。消胞也有损伤作用，所以只能用于体表、器械、排泄物和四周环境的消毒。常用的化学消毒剂有：洁尔灭〔苯扎氯铵、溴苄烷胺，0.1%~0.5%〕、过氧乙酸〔0.1%~0.5%〕、石碳酸〔3%~5%〕、来苏水〔甲醛溶液，1%~5%〕、氯化汞〔0.1%~1%〕、碘酒〔1%~5%〕、碘伏〔0.3%~0.5%〕、酒精钠〔火碱，2%〕等。危害患者安全。概念〔GMP指南〕。要求人们设定无菌的相对标准。FDA10-6〔即产品的无菌保证1980USPXX中，如今已为世界各国普遍承受和承受。指南〕。用物理或化学方法杀灭传播媒〔GB〕。通常是指杀灭或除去全部活的微生物〔包括生殖体和芽孢〕。化〔GB〕。通常是指杀死病原微生物的生殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。〔GMP指南〕。〔GMP指南〕。常用消毒剂消毒剂 常 用量 用 乙醇①70%~75%水溶液70%2%甘油用于皮肤、器具等消毒供洗手用消毒异丙醇75%水溶液用于皮肤、器具等消毒甲醛37%~40%8~9ml，再参加4~5gm3熏蒸量，密12~24h。刺激性强戊二醛2%水溶液用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。洁尔灭〔苯扎溴铵〕0.1%水溶液用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重成效。抗菌谱较窄。杜灭芬〔消毒宁〕0.05%~0.1%水溶液用于皮肤、器具等消毒过氧乙酸0.2%~0.5%水溶液0.5%水溶液③1g/m3用于器具等消毒,抗菌谱广，可用于皮肤消毒,杀灭某些病毒熏蒸 但性质不稳定乳酸①0.33~1mol/L熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用12h以上麝香草酚5%50%乙醇喷洒墙面、地面，杀霉菌常用灭菌法1〕干热灭菌法常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。菌。135~1453~5h，以上，170~1801h以上，180~2000.5~1h。200℃45min，180℃2h。有空隙，以利空气流淌，否则使箱内温度不均，局部物品灭菌不彻底。2〕湿热灭菌法通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。100℃，一般处理汽灭菌的物品。②低温间隙灭菌〔巴斯德灭菌法〕：将物品先用60~80℃加热〔或煮沸〕1h，然后置20~25℃保存24h〔或常温过夜〕，使其中残存的芽孢萌发成生殖体，但很费时。③高压蒸汽灭菌〔热压灭菌法〕：超过一个大气压时，水的沸点高于100℃，的物品。常用条件为：115.5℃30min121.5℃20min126.5℃15min留意事项：必需完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度到达规定的要求。留意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是全都的，曲线〔象冻干曲线一样〕。定期检查灭菌器内温度的准确性。化学灭菌法利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷〔又称氧化乙烯〕。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多〔不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解。〕滤过除菌法利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理，除去对热不稳定的药毒。过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。0.22μm。由于各厂家生产的一样规格〔压力维持试验或起泡点试验〕。一个过滤器的使用时间应依据品种验证后确定，一般不应超过8小时。辐射灭菌法辐射有两种类型：一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微X射线、γ射线。260nm左右能破坏核酸，1m处不低于70μ〕40μW/cm2以上。130~60min。〔70%〕2023h，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必需更换。200nm此，它主要用于空气和物体外表消毒，特制的紫外灯装置也可用于水的消毒。时使人头晕、胸闷、血压下降。180℃左右。热效应特点是由表及里。和消毒效果也不同。微波有肯定穿透力，但不强。微波对人