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文档简介

中药化学实验实验一薄层板的制备、活度测定及薄层层析、纸层析的应用1.掌握薄层层析（TLC）、纸层析（PC）的原理2.掌握薄层层析板的制备及薄层层析、纸层析操作的基本方法；一、实验目的要求薄层色谱（TLC）薄层色谱(ThinLayerChromatography)又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。薄层色谱（TLC）的优点是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。分离：一方面适用于少量样品（几到几十微克，甚至0.01μg）的分离；精制：另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样品。因此又可用来精制样品。跟踪化学反应：在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。

此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管或微量注射器滴加于离薄层板一端约1cm处的起始线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂或在紫外灯下显色。层析条件三要素被分离物质的极性展开剂的极性（固定相和流动相）吸附剂的活度（载体或担体如：氧化铝，硅藻土，纤维素等）1.混合单糖纸层析鉴别1）滤纸载体的制备：取圆形滤纸一张，用剪刀在其圆心处挖一小洞，另取一滤纸捻插入其中。2）样品：5%葡萄糖水溶液、5%鼠李糖水溶液、二者混合水溶液3）展开剂：正丁醇-冰醋酸-水（4:1:1）4）显色剂：邻苯二甲酸-苯胺试剂，喷雾后于105℃加热10分钟三、实验操作步骤及注意事项2.氧化铝薄层涂布(软板）取表面光滑，直径均匀的玻璃棒一支，依据所制备薄层的宽度、厚度要求，在玻璃棒两端套上厚度为0.3-1mm的塑料圈或金属环，将氧化铝粉末向前推，使其均匀铺在选定的载板上。24133.硅胶G薄层涂布（硬板）硅胶：水（1：3）于研钵中研磨均匀，放置片刻，随即用药匙取一定量，分别倒在一定大小的玻璃片上，均匀涂布成0.25-0.5mm厚度，轻轻振动玻璃板，使薄层面平整均匀，水平放置，室温晾干，于烘箱中110℃烘干活化1-2小时，冷后贮于干燥器内备用。样点直径不大于3mm斑点随着溶剂上行展开是要扩散的。初始斑点过大,展开后会与其他斑点重合,影响实验准确性。对于多成分物质,斑点会重叠的很严重

还会产生拖尾,影响实验精度。氧化铝活度测定

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