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文档简介

医学检验技术专业分子诊断学检验试卷注意事项:1、出卷人: 本试卷共2、本试卷共4页,满分100分,考试时间为60分钟。3、答题时请使用蓝、黑钢笔或圆珠笔。项目-一一-二二三四五总分得分一、名词解释:(3x6=18分)1质粒2、同工酶3、基因4、基因组5、端粒6、荧光定量PCR二、 填空题: (1x25=25分)1、 核酸的最大吸收峰波长在 nm,蛋白质的最大吸收峰在 nm,可以用紫外分光光度题答要不内线封密发通过A260与A280的比值来判定有无污染;纯的DNA的A260/A280比值为 。题答要不内线封密2、 聚合酶链反应技术是常用的用于扩增目的DNA片段的技术,该项技术的核心部分是不断对三个步骤的循环来实现对目的DNA扩增的,该三个步骤依次为 、 和 。3、 科学家感兴趣的外源基因又称为 ,其来源有几种途径:化学合成、酶促合成cDNA、制备的基因组DNA及 技术。4、 核酸的基本单位是 ,它们之间是通过 连接而成。5、核酸分离纯化的原则包括保证一级结构的完整性和 ,为了保证核酸的完整性,应该尽量避免有害的物理、化学和 因素。6、 质粒DNA分子一般有3种构型,分别为 、 和 。7、影响电泳分离结果的主要因素包括 、 和分子形状;分子量和分子形状相同的粒子,带电量越 ,泳动速度越慢。8、 根据采用的载体性质不同,将重组DNA分子导入受体细胞的方法有 、 和转染。9、 引物设计的原则是在 和 间取得平衡。三、 选择题(2x15=30分)1、 基因是()A具有特定遗传效应的DNA片段B一个单倍体细胞中的染色体数C遗传单位 D生物体的细胞内基因的分子总量2、 抗药性质粒也称为()AF质粒BR质粒CCol质粒 D接合型质粒 E自传递型质粒3、 染色体的基本单位是()ADNA BRNAC核小体D线粒体E叶绿体4、 大多数质粒在自然状态下是一种()A线性双链DNA B闭合双链DNAC线性单链DNA D线性单链RNA5、 EB作为核酸分子电泳的指示剂,其原理是()A是一种转性染料 B在紫外线下发射荧光C能特异性的结合核酸分子D是一种可视物质 E能插入核酸分子之间并能在紫外光下产生荧光

6、ACE76、ACE7、限制性核酸内切酶酶切DNA后产生(5'-磷酸基团和3'-羟基基团的末端5'-磷酸基团和3'-磷酸基团的末端以上都不是可识别并切割特异DNA序列的酶是(B3'-磷酸基团和5'-羟基基团的末端D5'-羟基基团和3'-羟基基团的末端)B限制性核酸内切酶EDNA酶(DNase)8、在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的是A限制性核酸外切酶D非限制性核酸内切酶C非限制性核酸外切酶A化学合成法B筛选基因组文库C筛选cDNA文库D聚合酶链式反应EDNA合成仪合成9、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是()A细菌染色体DNA的一部分B细菌染色体外的独立遗传单位C病毒基因组DNA的一部分D真核细胞染色体DNA的一部分E真核细胞染色体外的独立遗传单位10、 有关理想质粒载体的特点,正确的是()A为线性单链DNAB含有多种限制性酶的单一位点C含有同一个限制酶的多个切点D复制收到宿主控制E不含耐药基因11、 基因工程的操作程序可简单的概括为()A目的基因和载体的分离、提纯与鉴定B限制酶的应用C将载体和目的基因结合成重组体D将重组体导入宿主细胞并筛选E分、切、接、转、筛12、 实验室内常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是()ATaq酶 BT4DNA连接酶CDNA聚合酶IDDNA聚合酶IIEDNA聚合酶III13、 PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为()A模板B引物CdNTPD镁离子EpH值14、 在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增()ATaqDNA聚合酶加量过多 B引物量过多CAB都可D缓冲溶液中镁离子含量过高 EABD都可15、 PCR延伸选择的温度是()A72°CB55°CC60°CD94°CE80°C四、问答题(27分)1、 试述基因工程的基本操作步骤?(9分)2、 PCR过程中引物设计的基本原则有哪些?(9分)3、 简述核酸分子杂交的基本原理?(9分)医学检验技术专业分子诊断学检验试卷注意事项:出卷人:本试卷共2、注意事项:出卷人:本试卷共2、本试卷共4页,满分100分,考试时间为60分钟。题答要不内线封密一、名词解释:(3x6=18分)1题答要不内线封密一、名词解释:(3x6=18分)1、质粒2、同工酶3、基因4、基因组项目-一一-二二三四五总分得分得分评卷人5、端粒6、荧光定量PCR得分评卷人二、填空题:(1x25=25分)1、 , 2、 得分评卷人得分评卷人三、选择题(2x15=30分)123456789101112131415得分评卷人四、问答题 (27分)答案不够写转到反面分子诊断学试卷答案一、名词解释:(3x6=18分)1、 质粒:是指在细胞的染色体或核区DNA之外,能够自主复制的DNA分子。2、 同工酶:催化的化学反应相同,酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。3、 基因:是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列4、 基因组:一个单倍体生物所含有的全部DNA。5、 端粒:以线性染色体的形式存在于真核基因组DNA末端的特殊结构。6、 荧光定量PCR:通过荧光信号对PCR过程中的产物量进行实时监测,精确计算出PCR的初始模板量。二、 填空题:(1x25=25分)1、260,280,1.8。2、—变性―,_退火,延伸。3、—目的基因一,PCR。4、—核苷酸―,, 3'-5'磷酸二酯键 。5、尽量排除其他分子污染, 生物。6、闭环,开环, 线性。7、电荷,大小,大。8、转化,转导。9、扩增特异性, 扩增效率。三、选择题(2x15=30分)12345678910ABABEABDBB1112131415EBBCA四、问答题(27分)1、试述基因工程的基本操作步骤?(参考答案)狭义基因工程的基本五步:切、接、转、增、检。从供体中分离出基因组DNA,用限制性内切酶分别将外源DNA和载体分子切开。接,用DNA连接酶含有外源基因的DNA片段接到载体分子上,构成DNA重组分子转,借助细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中。增,短时间培养转化细胞,以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中。e检,筛选和鉴定经转化处理的细胞,获得外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞。2、 PCR过程中引物设计的基本原则有哪些?(参考答案)(1) 引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74°C,不适于TaqDNA聚合酶进行反应。(2) G+C含量:应在40%-60%之间。(3) 碱基分布的随机性:应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C。(4引物自身:不能含有自身互补序列,否则会形成发夹样二级结构。(5)引物之间:两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体,尤应避免3’端的互补重叠。引物3’端最好选T,错配的几率与A相比大大的降低了。3、 简述核酸

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