输血相容性检测室内质控操作规程

..jz*jz*.输血相容性检测室内质控操作规程【目 的】标准输血科各级检验人员室内质控操作程序，确保检验结果准确、牢靠。【适用范围】适用于输血相容性检测工程。【职 责】输血科全体员工均遵守执行。〔一〕 ABO、RhD血型室内质控操作规程【检验原理】选择型别的红细胞和血清，依据其与在用试剂标准血清：抗A、抗B、抗D、ABO血型反定型红细胞及ABO标本一样的试剂和方法进展检测，以监控试验室进展ABO、RhD血型检测过程中应用的试剂、设备及试验流程，并评估试验结果的有效性。【主要试剂组成】1A1RhD〔+〕红细胞2B型RhD〔+〕红细胞3A4B血清5O型RhD〔+〕红细胞6RhD〔-〕红细胞血型鉴定试剂：标准血清：抗A，抗B，抗DABOAc，Bc，OcABO【主要仪器】卡式专用离心机【检验方法】首先将质控品、标准血清及ABO操作步骤按不同检验方法〔平板法、试管法、微柱凝胶法〕具体如下：平板法：在玻片上〔或纸片上〕按表1加样各1滴〔50ul〕，混匀〔直径约20mm大小〕，前后缓慢摇摆玻片，21395mm×12mm或75mm×12mm1加样各150ul1000rpm时间1分钟或转速3400rpm时间15秒〕，判定结果，并记录。表1 平板法、试管法ABO及RhD血型室内质控加样表抗A+样本抗B+样本抗D+样本4%Ac+样本4%Bc+样本4%Oc+样本111333抗A+样本抗B+样本抗D+样本4%Ac+样本4%Bc+样本4%Oc+样本222444抗抗A+样本 抗B+样本5 5抗D+样本5.抗D+样本6柱凝胶法：取4张待检ABO1分别参与第1张卡的1-3孔中各1滴〔50ul〕，将样本2分别参与第2张卡的1-3孔中各1滴〔50ul〕，将样本5分别参与第3张卡的1-31滴〔50ul643孔内。使用卡式专用离心机离心，取出，肉眼判定结果，并记录。【建立参考值】首次使用质控品或不连续使用时，需要连续做三天试验，结果全都，方可定为参考值；更换不同批号质控品时，需旧质控品同时做，连续两天，旧批号质控品在控，批号质控品质控品结果全都，可确定参考值；更换试剂时，需旧批号试剂同时做两次质控品，两次结果全都，可确定参考值；不同仪器或不同方法学均要单独定值。质控规那么：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。【失控判定】阳性结果与预期结果比较消灭超过1+凝集强度的差异，或阴性质控消灭阳性结果时，均视为失控。失控缘由分析：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。失控解决方案：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。【记录表格】“输血相容性检测室内质控参考值登记表“ SXK-JL65“输血相容性检测室内质控登记表“………………SXK-JL66SXK-JL67【本卷须知】室内质控品、标准血清、标准红细胞保存在2～8℃，严禁在室温长期存放。用后剩余质控品不宜与质控品混合，以防污染，不同批号质控品不得混用。红细胞质控品：轻拿轻放，防止猛烈震荡；假设发生凝集，出血菌落或严峻溶血，不得使用；假设消灭稍微溶血可用生理盐水对其进展洗涤，重悬浮后使用。【参考资料】....jz*jz*长春愽迅生物技术“ABO、RhD血型检测质控品〔微柱凝胶法〕说明书“长春愽迅生物技术“ABO、RhD血型检测卡〔微柱凝胶法〕说明书“上海血液生物医药有限责任公司“抗A抗B血型定型试剂〔单克隆抗体〕说明书“D〔IgM+IgG〕血型定型试剂〔单克隆抗体〕说明书“〔二〕不规那么抗体筛检室内质控操作规程【检验原理】选择血清，标本其与在用试剂抗人球蛋白检测卡〔微柱凝胶〕中的阳性及阴性结果，通过每天或每批与待检标本一样的试剂和方法进展检测，以监控试验室进展不规那么抗体筛检过程中应用的试剂、设备及试验流程，并评估试验结果的有效性。【主要试剂组成】质控品：样本1 O型血清样本2 IgG型抗D〔+〕AB血清不规那么抗体筛检试剂：抗人球蛋白不规那么抗体筛检卡〔微柱凝胶〕Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗体筛检红细胞【主要仪器】 卡式专用离心机【检验方法】 微柱凝胶法，具体操作步骤如下：将质控品、抗体筛检红细胞从冰箱取出后平衡至室温。取1张抗人球蛋白不规那么抗体筛检卡做好标记。将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗体筛检细胞用低离子强度盐溶液稀释至0.8%，对应参与上述检测卡1～650ul/管。31，后32，50ul/管。37℃孵育器中15分钟。即刻使用卡式专用离心机离心，取出，肉眼判定结果，并记录。【建立参考值】首次使用质控品或不连续使用时，需要连续做三天试验，结果全都，方可定为参考值；更换不同批号质控品时，需旧质控品同时做，连续两天，旧批号质控品在控，批号质控品质控品结果全都，可确定参考值；更换试剂时，需旧批号试剂同时做两次质控品，两次结果全都，可确定参考值；不同仪器或不同方法学均要单独定值。质控规那么：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。【失控判定】阳性结果与预期结果比较消灭超过1+凝集强度的差异，或阴性质控消灭阳性结果时，均视为失控。失控缘由分析：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。失控解决方案：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。【记录表格】“输血相容性检测室内质控参考值登记表“ SXK-JL65“输血相容性检测室内质控登记表“………………SXK-JL66SXK-JL67本卷须知室内质控品、抗筛细胞、保存在2～8℃，严禁在室温长期存放。用后剩余质控品不宜与质控品混合，以防污染，不同批号质控品不得混用。参考资料长春愽迅生物技术“不规那么抗体筛检质控品说明书“长春愽迅生物技术“抗人球蛋白检测卡不规那么抗体筛检操作说明书“长春愽徳生物技术有限责任公司“不规那么抗体检测试剂〔人红细胞〕使用说明书“〔三〕穿插配血室内质控操作规程【检验原理】分散胺介质法：红细胞外表带有大量的负电荷，以防止其产生自发性聚拢，其悬浮在电解质中形成Zeta电位，Zeta离子溶液降低介质的离子强度，削减红细胞四周的阳离子云，以促进红细胞和血清〔血浆〕中的抗体结合，其后参与分散胺溶液〔Polybrene，为高价阳离子多聚物、肝素中和剂〕，以中和红细胞外表带有的负电荷，使红细胞外表带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的分散，最终参与悬浮液〔Resuspending〕，中和分散胺〔Polybrene〕阳离子作用，使正常的红细胞非特异性分散散开，试验结果为阴性，但假设红细胞被相应的抗体致敏，那么会被分散胺分散，试验结果为阳性。微柱凝胶法：选择的血清和相应的细胞，标本其与在用试剂抗人球蛋白检测卡〔微柱凝胶〕中的阳性及阴性结果，通过每天或每批与待检标本一样的试剂和方法进展检测，以监控试验室进展穿插配血过程中应用的试剂、设备及试验流程，并评估试验结果的有效性。【主要试剂组成】质控品：样本1 AB型RhD〔+〕红细胞样本2 O型RhD〔+〕红细胞样本3 RhD〔-〕红细胞样本4 O血清样本5 IgG抗DAB血清穿插配血检测试剂：LIMPolybreneResuspending〕抗人球蛋白穿插配血检测卡〔微柱凝胶〕【主要仪器】 卡式专用离心机【检验方法】首先将质控品、分散胺介质从冰箱取出后平衡至室温。操作步骤按不同检验方法〔试管法、微柱凝胶法〕进展。分散胺介质法 为试管法，操作步骤如下：取4支〔95mm×12mm75mm×12mm〕试管做好标记.依据组合1〔样本4+样本1〕、组合24+样本2〕、组合35+样本1〕、组合4〔样本53150ul〕。各管参与低离子溶液〔LIM〕0.65ml，混合均匀后，各管参与分散胺〔Polybrene〕溶液2滴〔100ul〕，并混合均匀。用离心机3400rpm时间100.1ml液体。轻轻摇动试管，目测红细胞有无分散，如无分散，那么必需重做。最终参与悬浮液〔Resuspending〕2滴〔100ul〕，轻轻摇动试管混合并同时观看结果。如分散散开，表示由Polybrene引起的非特异性凝集，抗体筛检结果为阴性。假设凝集不散开，那么为红细胞抗原抗体结果的特异性反响，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。2、微柱凝胶法操作步骤如下：取1张待检抗人球蛋白穿插配血检测卡〔微柱凝胶〕做好标记。14+样本124235+样本145+样本350ul。37℃孵育器中15分钟。即刻使用卡式专用离心机离心，取出，肉眼判定结果，并记录。【结果解释】穿插配血室内质控依据其检测作用可分为IgG组和IgM组如表2。组合质控品组合检测结果检测作用表2 穿插配血室内质控组合质控品组合检测结果检测作用组合1样本4+样本1+检测IgM类抗原抗体反响组合2样本4+样本2-检测IgM类抗原抗体反响组合3样本5+样本1+检测IgG类抗原抗体反响组合4样本5+样本3-检测IgG类抗原抗体反响【建立参考值】首次使用质控品或不连续使用时，需要连续做三天试验，结果全都，方可定为参考值；更换不同批号质控品时，需旧质控品同时做，连续两天，旧批号质控品在控，批号质控品质控品结果全都，可确定参考值；更换试剂时，需旧批号试剂同时做两次质控品，两次结果全都，可确定参考值；不同仪器或不同方法学均要单独定值。质控规那么：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。【失控判定】阳性结果与预期结果比较消灭超过1+凝集强度的差异，或阴性质控消灭阳性结果时，均视为失控。失控缘由分析：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。失控解决方案：按“输血相容性检测的室内质控程序“执行。【记录表格】“输血相容性检测室内质控参考值登记表“ SXK-JL65“输血相容性检测室内质控登记表“………………SXK-JL66SXK-JL67【本卷须知】室内质控品保存在2～8℃，严禁在室温长期存放。用后