(36)-2.3.3血细胞的细胞化学染色（一）

五、血细胞的细胞化学染色因此细胞化学染色有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变，可用作血细胞类型的鉴别，以及对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、发病机制探讨等有一定价值。是以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，将骨髓涂片按一定程序染色，然后在显微镜下观察细胞化学成分及其变化的一项检查方法。各种类型血细胞中的化学成分、含量及其分布不尽相同，在病理情况下也可发生改变。1三、血细胞化学染色

（一）过氧化物酶染色（POX）

（二）苏丹黑B染色（三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）

（四）酸性磷酸酶染色（ACP）（五）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色（六）a—醋酸萘酚酯酶染色（NSE）（七）糖原染色（PAS）

（八）铁染色

2023/4/112（一）过氧化物酶染色（POX）原理：血细胞中的过氧化物酶能分解试剂中的底物H2O2，释出新生态氧。使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，然后与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒，沉着于细胞质中。临床意义：主要用于急性白血病类型的鉴别诊断。急性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈强阳性反应；急性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应；急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。POX染色对急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别最有价值。2023/4/1132023/4/114

原理：成熟阶段中性粒细胞内的AKP在PH9.4-9.6缓冲液中能水解基质液中的α-磷酸萘酚钠，产生α-萘酚，其与重氮盐偶联，形成不溶性灰黑色偶氮染料沉淀，定位于酶活性处。

（三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）：2023/4/115（三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）：结果：碱性磷酸酶主要分布在成熟阶段的中性粒细胞（分叶核、杆状核），其他血细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色到棕黑色颗粒。阳性程度：

-胞浆中无紫黑色颗粒

+胞浆中有一层棕黑色不透明或局限地方有紫黑色颗粒

++胞浆中颗粒占胞浆1/2或遍布整个胞浆，但较疏松

+++胞浆中颗粒占3/4，颗粒染色浓

++++仅见核影，其余均是黑色2023/4/116血涂片染色后，观察血片100个成熟中性粒细胞，阳性反应细胞所占百分率即为阳性率；对所有阳性反应细胞逐个按反应强度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后相加，即为积分数值。参考值：成人阳性率：10～40%积分值：40～80分。2023/4/117中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）+++++++++++++-嗜酸粒细胞-临床意义病理情况下：1、感染性疾病活性增高，病毒感染时活性略低或正常。2、慢粒活性明显减低，积分常为0。类白血病时活性极度增高。3、急粒时积分值减低，急淋时积分多增高，急单时正常或减低。4、再障时活性增高，PNH时活性减低。5、其他。2023/4/119（六）a—醋酸萘酚酯酶染色原理：

a—醋酸萘酚酯酶又称非特异性酯酶（NSE），能将基质液中的a—醋酸萘酚酯水解，产生a—萘酚，再与重氮染料偶联，形成不溶性的有色沉淀，定位于胞质内。结果：胞质中出现有色沉淀者（灰黑色或棕黑色）为阳性反应。原单核细胞为阴性反应或弱阳性反应，幼单核细胞和单核细胞呈阳性反应。粒系细胞一般为阴性或弱阳性反应。淋巴细胞一般为阴性反应。2023/4/1110非特异性脂酶染色（NSE）

临床意义：急单呈强（+）；急粒弱（+）或（-）；急淋（－）用于急白类型的鉴别。同时结合氟化钠抑制试验，对急单诊断更有价值。2023/4/1111

M5a型白血病骨髓象NSE染色（＋）同一标本NaF抑制试验（＋）2023/4/1112急性单核细胞白血病急性粒细胞白血病+NaF+NaF2023/4/1113（七）糖原染色（PAS）原理：过碘酸能将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与Schiff液中的五色品红结合，形成紫红色化合物，定位于胞质内。结果：胞质中出现红色者为阳性反应。阳性反应物可呈颗粒状、小块状或弥漫均匀红色。糖元是细胞代谢时能量的来源，糖元在粒系中，原粒（－），早幼粒以下阶段为（+），单核及淋巴细胞亦有少量，幼红细胞和红细胞均呈阴性。2023/4/1114（七）糖原染色（PAS）临床意义：1、红血病、红白血病时幼红细胞呈强阳性反应（呈均匀红色或块状）。有助于与其他红细胞系统疾病的鉴别，某些红系良性疾病，如缺铁贫、巨幼贫、溶血性贫血中的有核红细胞常呈阴性。M6

，Bonemarrowsmear,PASstain2023/4/1116（七）糖原染色（PAS）临床意义：2、鉴别诊断：㈠急粒，原粒细胞呈阴性反应或弱阳性反应，阳性反应物质为细颗粒状或均匀淡红色。㈡急淋，原淋或幼淋细胞常呈阳性反应，阳性反应物质呈粗颗粒状或块状。㈢急单，原单核细胞大多呈阳性反应，呈弥漫均匀红色或细颗粒状。2023/4/1117（七）糖原染色（PAS）临床意义3、其他：M7和MDS中的小巨核细胞呈阳性，戈谢细胞呈强阳性，尼曼-匹克细胞胞质空泡呈阴性。骨髓转移性腺癌呈强阳性。2023/4/1118细胞化学：

常见急性白血病细胞化学染色特点急淋急粒急单

POX-+-+++-or+PAS+,块状或-or+-or+

颗粒状弥漫淡红色弥漫淡红色

NSE

--or++