自身免疫性疾病及其免疫检测

第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测现在是1页\一共有76页\编辑于星期二第一节概述一、自身免疫性疾病的分类二、自身免疫性疾病的共同特征第二节自身免疫疾病与免疫损伤自身抗原、免疫调节异常、遗传因素第三节常见的自身免疫性疾病

第四节常见自身免疫性疾病的自身抗体检测第五节自身抗体检测的临床应用第六节自身免疫性疾病的相关实验检测现在是2页\一共有76页\编辑于星期二第一节概述自身免疫耐受（autoimmune-tolerance）:正常情况下，机体免疫系统能识别“自我”，对自身组织成分不发生免疫应答反应，或仅产生微弱的免疫应答，此为自身免疫耐受。自身免疫(autoimmunity):是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。自身抗体(autoantibody):针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体。现在是3页\一共有76页\编辑于星期二自身免疫性疾病(autoimmunedisease，AID)

因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。一、自身免疫性疾病分类现在是4页\一共有76页\编辑于星期二系统性自身免疫病(systemicautoimmunedisease)或器官非特异性或全身性自身免疫病器官特异性自身免疫病(organ-specificautoimmunedisease)或局限性自身免疫病按疾病累及的系统区分按器官特异性分为两类

结缔组织疾病神经肌肉疾病内分泌性疾病消化系统疾病泌尿系统疾病血液系统疾病生殖系统疾病皮肤组织疾病循环系统疾病现在是5页\一共有76页\编辑于星期二器官特异性非器官特异性桥本甲状腺炎扩张性心肌炎自身免疫性溶血性贫血系统性红斑狼疮原发性粘液水肿恶性贫血特发性血小板减少性紫癜干燥综合征甲状腺机能亢进自身免疫性胃炎特发性粒细胞减少症类风湿关节炎Addisino病自身免疫性肝炎绝经过早（少数病例）硬皮病1型糖尿病原发性胆汁性肝硬化男性不育（少数病例）多发性肌炎/皮肌炎重症肌无力原发性硬化性胆管炎交感性眼炎混合性结缔组织病多发性硬化症溃疡性结肠炎晶状体源性葡萄膜炎系统性血管炎脱髓鞘疾病克罗恩病抗磷脂综合征寻常型天疱疮自身免疫性肾小球肾炎肺肾出血综合征自身免疫病的“病谱”现在是6页\一共有76页\编辑于星期二1.多数病因不明2.患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加3.有遗传倾向4.患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在二、自身免疫性疾病的共同特征现在是7页\一共有76页\编辑于星期二5.疾病有重叠现象，即一个病人可同时患一种以上自身免疫病6.病程一般较长，多迁延为慢性7.病损局部可发现淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等浸润8.免疫抑制剂治疗可取得一定疗效现在是8页\一共有76页\编辑于星期二

在某些情况下，机体的自身耐受遭到破坏，禁忌细胞株活跃，机体免疫系统针对某些自身组织成份产生了免疫应答，就可能导致自身免疫病的发生。第二节自身免疫疾病与免疫损伤现在是9页\一共有76页\编辑于星期二

隐蔽抗原的释放：精子、眼内容物和脑自身成分的改变：RF共同抗原引发的交叉反应：链球菌一、自身抗原现在是10页\一共有76页\编辑于星期二淋巴细胞旁路活化多克隆刺激剂的旁路活化辅助刺激因子表达异常自身致敏T细胞与自身抗原应答二、免疫调节异常三、遗传因素HLA现在是11页\一共有76页\编辑于星期二第三节常见的自身免疫性疾病由于病理性的自身免疫应答可发生在体内任何组织器官，临床上常以病理损害的机制来区分各类自身免疫性疾病，而许多自身免疫性疾病与超敏反应的发生髻之密切相关，因此，可分为由Ⅱ型超敏反应引起的自身免疫性疾病，由Ⅲ型超敏反应引起的自身免疫性疾病及由T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病。当两种或两种以上的自身免疫病出现混合的临床表现时，称为混合性结缔组织病（mixedconnectivetissuedisease，MCTD）。现在是12页\一共有76页\编辑于星期二抗血细胞表面抗原的抗体引起的自身免疫性疾病(如:AIHA;ITP)抗细胞表面受体抗体引起的自身免疫性疾病(如:MG;Gravesdisease)细胞外抗原的自身抗体引起的自身免疫性疾病（如：Goodpasture综合征）一、由II型超敏反应引起的自身免疫性疾病现在是13页\一共有76页\编辑于星期二如：SLE；RA二、自身抗体—免疫复合物引起的自身免疫性疾病现在是14页\一共有76页\编辑于星期二如：DM1；MS三、T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病现在是15页\一共有76页\编辑于星期二

第四节常见自身免疫性疾病的自身抗体检测

自身抗体（autoantibody）是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱)

分类:

脏器特异性自身抗体

脏器非特异性自身抗体现在是16页\一共有76页\编辑于星期二自身免疫性疾病的重要标志高滴度存在于自身免疫性疾病患者与疾病的活动性相关参与免疫病理性损伤一、自身抗体的特性现在是17页\一共有76页\编辑于星期二自身抗体免疫球蛋白补体淋巴细胞细胞因子自身免疫性疾病的主要实验检测现在是18页\一共有76页\编辑于星期二标志抗体相关疾病dsDNASLESmSLESSBSS着丝点抗体PSS（局限型）Scl-70抗体PSS（弥漫型）AKA、抗CCP抗体RAJo-1抗体PM/DM高滴度RNP抗体MCTD肝肾微粒体抗体（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝炎平滑肌抗体（SMA）Ⅰ型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常见自身免疫性疾病的标志抗体现在是19页\一共有76页\编辑于星期二间接免疫荧光法（IIF）ELISA免疫印迹法（Western-blot）酶免疫斑点法检测自身抗体常用的方法现在是20页\一共有76页\编辑于星期二抗核抗体（ANA）抗可提取性核抗原抗体（ENA）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）类风湿因子（RF）抗角蛋白抗体（AKA）抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）抗心磷脂抗体（ACLA）常检测的自身抗体现在是21页\一共有76页\编辑于星期二

抗核抗体::以真核细胞（如HEp-2细胞、肝细胞）的各种细胞核成分为靶抗原所检测的自身抗体的总称。二、抗核抗体的检测与应用现在是22页\一共有76页\编辑于星期二抗核抗体谱现在是23页\一共有76页\编辑于星期二以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗体等；以相关疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗体等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线粒体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；以抗原的化学名称分类命名，如抗DNA、抗RNP、抗组蛋白抗体,抗核小体抗体等。抗核抗体谱的分类和命名现在是24页\一共有76页\编辑于星期二间接免疫荧光法（indirectimmunofluorescence,IIF）酶免疫斑点法ELISA免疫印迹法

（Western-blot）

抗核抗体检测方法现在是25页\一共有76页\编辑于星期二间接免疫荧光法示意图HEp-2细胞肝组织切片荧光标记抗体病人血清（待检抗体）现在是26页\一共有76页\编辑于星期二

细胞核细胞浆细胞骨架细胞周期

均质型核糖体型肌蛋白型中心体型斑点型线粒体型波形纤维蛋白型纺缍体型核仁型高尔基体型细胞角蛋白型纺缍丝型着丝点型溶酶体型原肌球蛋白型中间体型周边型颗粒型纽带蛋白型PCNA型核点型(dots)IIF检测ANA荧光染色模型现在是27页\一共有76页\编辑于星期二均质型

抗dsDNA抗体抗组蛋白抗体(histone)抗ssDNA抗体抗核小体抗体(nucleosome)现在是28页\一共有76页\编辑于星期二斑点型（nRNP/Sm）

高滴度的抗U1-nRNP为MCTD的特征。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性。斑点型（SSA/SSB）抗SSA最常出现于SS及新生儿红斑狼疮（100%）。抗SSB抗体几乎仅见于女性，可出现于SS和SLE。现在是29页\一共有76页\编辑于星期二周边型

可见于胶原病、PBC、CAH等患者

现在是30页\一共有76页\编辑于星期二核点型（DOTS）

见于SLE、SS、PBC、风湿病

抗着丝点型

PSS局限型标志抗体现在是31页\一共有76页\编辑于星期二抗原纤维蛋白型

仅见于5%～10%的PSS，男性高于女性

抗RNA多聚酶Ⅰ型抗体

仅见于硬皮病患者，阳性率为4%现在是32页\一共有76页\编辑于星期二抗PM-Scl（PM-1）抗体

见于重叠综合征（多发性肌炎PM/皮肌炎DM/弥漫性PSS）

现在是33页\一共有76页\编辑于星期二抗Scl-70型

PSS弥漫型的标志抗体现在是34页\一共有76页\编辑于星期二增殖细胞核抗原Ⅰ型（PCNA）

SLE特异性抗体，与发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关现在是35页\一共有76页\编辑于星期二抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体抗线粒体抗体（AMA）SLE标志抗体原发性胆汁性肝硬化标志抗体现在是36页\一共有76页\编辑于星期二抗Jo-1抗体抗高尔基体抗体多发性肌炎（PM）标志抗体偶见于SLE和SS现在是37页\一共有76页\编辑于星期二抗肌动蛋白抗体见于自身免疫性慢性活动型肝炎

现在是38页\一共有76页\编辑于星期二抗双链DNA抗体

抗dsDNA抗体与细胞核DNA（外围区）脱氧核糖磷酸框架结合。

抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗体。其抗体滴度与疾病的活动程度有相关性，抗体滴度的动态测定为监控治疗提供了有效的实验室手段。抗双链DNA抗体现在是39页\一共有76页\编辑于星期二检测方法及应用间接免疫荧光检测，是目前国内外临床常规检测抗dsDNA抗体最常用的方法。抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%～100%，但其敏感性仅为30%～50%，因此抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。检测方法及应用现在是40页\一共有76页\编辑于星期二

抗dsDNA抗体SLE特异性抗体，与病情活动度相关。现在是41页\一共有76页\编辑于星期二抗核小体抗体

核小体（nucleosome）是真核生物细胞核染色质的基本单位。凋亡细胞是核小体的重要来源，当SLE患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低，导致核小体在患者体内大量存积，激活B细胞产生抗核小体抗体（Antinucleosomeantibody,AnuA）。

现在是42页\一共有76页\编辑于星期二检测及应用AnuA的检测通常采用ELISA检测法。AnuA具有同抗ds-DNA抗体相同的诊断特异性，可达到95%，在系统性硬化（SSc）病中可有20%～50%低浓度阳性率，其他自身免疫性疾病中该抗体均为阴性。AnuA的表达与SLE病情活动分数相关。检测及应用现在是43页\一共有76页\编辑于星期二

抗ENA抗体谱:可提取核抗原抗体的总称

临床常检测的抗ENA抗体谱主要包括：

抗Sm抗U1-RNP抗SSA抗SSB抗Jo-1抗Scl-70抗rib-P蛋白三、抗ENA抗体谱的检测与应用现在是44页\一共有76页\编辑于星期二抗可提取性核抗原（ENA）抗体现在是45页\一共有76页\编辑于星期二

双向免疫扩散（ID）对流免疫电泳（CIE）免疫印迹法（Western-blot）

ELISA酶免疫斑点法ENA检测方法现在是46页\一共有76页\编辑于星期二免疫印迹法

SDS电泳转移电泳酶免疫检测免疫印迹法现在是47页\一共有76页\编辑于星期二现在是48页\一共有76页\编辑于星期二抗可提取性核抗原（ENA）抗体抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%~30%）抗nRNP抗体：MCTD95%~100%（高滴度）抗SSA抗体：PSS60%~75%，其它CTD抗SSB抗体：

PSS10%~40%，其它CTD抗Scl-70抗体：SSc25%~75%,标记性抗体抗Jo-1抗体：PM/DM25%，标记性抗体抗rRNP抗体：

SLE特异性抗体（10%~30%）现在是49页\一共有76页\编辑于星期二抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophilcytoplasmicautoantibodies,ANCA）是一组以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病密切相关的自身抗体，对系统性血管炎、炎症性肠病等疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。

四、与小血管炎相关的自身抗体检测与应用现在是50页\一共有76页\编辑于星期二

荧光染色型

靶抗原

胞浆型(cANCA)

蛋白酶3（PR3）杀菌/通透性增高蛋白（BPI）

核周型(pANCA)髓过氧化物酶（MPO）组织蛋白酶G（Cath-G）乳铁蛋白（LF）白细胞弹性蛋白酶（HLE）

非典型型(aANCA)兼有两种特性ANCA荧光染色型与靶抗原现在是51页\一共有76页\编辑于星期二周边型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）主要见于炎症性肠病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）现在是52页\一共有76页\编辑于星期二胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)主要见于Wegener’s肉芽肿及微小多动脉炎现在是53页\一共有76页\编辑于星期二RA早期诊断相关自身抗体

抗角质层蛋白抗体（AKA）：1979年Young等报告靶抗原：filaggrin（40KD）抗核周因子（APF):1964年Nienhuis等报告靶抗原：profilaggrin（37-41KD）及其降解产物抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）：1993年Simon等报告靶抗原：filaggrin（40KD）抗Sa抗体：1994年Despres等报告靶抗原:50/55KD非酰基多肽，半抗原-瓜氨酸抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）：1998Schellekens五、与RA相关自身抗体的检测与应用现在是54页\一共有76页\编辑于星期二

类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）为抗变性IgGFc的自身抗体，主要是IgM型

致病机理：RF与体内变性IgG结合形成免疫复合物，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎性介质导致组织炎性损伤，使患者发生骨关节炎及血管炎。现在是55页\一共有76页\编辑于星期二1.胶乳颗粒凝集实验定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定IgM-RF

2.速率散射比浊法（ARRAY、IMAGE）定量、准确、快速，测定IgM-RF

3.ELISA定量、准确，可测定不同类型的RF检测方法现在是56页\一共有76页\编辑于星期二

（1）RF在RA、SLE、PSS等多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。疾病阳性率（%）RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25临床应用现在是57页\一共有76页\编辑于星期二（2）RF滴度与RA患者临床表现呈正相关，

IgM-RF效价>80IU/ml并伴有严重关节功能障碍时通常提示患者预后不良。

（3）IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节

症状密切相关，常伴随IgM-RF同时出现，在正常人及非RA患者中很难检出。

（4）IgA-RF与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。现在是58页\一共有76页\编辑于星期二AKA主要见于RA，阳性率36%~59%，特异性95%~99%，其出现可以先于临床表现；高滴度可预示较严重的RA类型。抗角蛋白抗体（AKA）现在是59页\一共有76页\编辑于星期二常用方法：ELISA临床意义：RA特异性自身抗体，敏感性65%~85%，特异性为94%~98%；高浓度抗CCP抗体是RA发生关节侵蚀的危险因子之一，定量检测有助于判断预后。抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）现在是60页\一共有76页\编辑于星期二自身免疫性肝病是与自身免疫密切相关的特殊类型的肝病，其诊断和治疗完全不同于一般的慢性病毒性肝炎

自身免疫性肝炎(AIH)

原发性胆汁性肝硬化(PBC)

原发性硬化性胆管炎(PSC)

重叠综合征六、与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用现在是61页\一共有76页\编辑于星期二

在多种累及肝胆疾患的自身免疫疾病中，自身抗体在发病机制中起重要作用自身免疫性肝病具有相对特异性自身抗体谱自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断及鉴别诊断具有重要意义自身免疫性肝病与自身抗体现在是62页\一共有76页\编辑于星期二自身免疫性肝病及其自身抗体谱疾病类型相关自身抗体

自身免疫性肝炎（AIH）

Ⅰ型AIHANA/ASMAⅡ型AIHanti-LKM-1anti-LC-1Ⅲ型AIHanti-SLA(可溶性肝抗原)

原发性胆汁性肝硬化（PBC）

AMA(M2/M4/M8/M9)anti-gp210，sp100ACA

原发性硬化性胆管炎（PSC）pANCA

自身免疫性肝病及其自身抗体谱现在是63页\一共有76页\编辑于星期二

抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）抗促甲状腺素受体抗体（TSH-RAb）七、与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用现在是64页\一共有76页\编辑于星期二重症肌无力（MG）自身抗体谱：

抗骨胳肌抗体（ASA）、抗乙酰胆碱受体(AchR)抗体多发性硬化（MS）自身抗体谱：

抗髓鞘碱性蛋白（MBP）抗体、抗脑苷脂抗体、抗神经结苷脂抗体急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病（格林―巴利综合征）自身抗体谱：抗髓鞘糖脂抗体、抗髓鞘硫脂抗体

八、与神经系统自身免疫性相关自身抗体的检测与应用现在是65页\一共有76页\编辑于星期二

大多数自身免疫患者血清中可测到高效价的自身抗体，特别是有些自身抗体的检测已纳入某些自身免疫性疾病的诊断标准中，自身抗体检测已是临床免疫检测的一项重要的实验室指标。第五节自身抗体检测的临床应用现在是66页\一共有76页\编辑于星期二

筛查性试验与确诊性试验项目的合理组合选择相关的自身抗体检测项目切忌盲目的全面检测实验中应同步设置阳性和阴性对照一、自身抗体检测的一般原则现在是67页\一共有76页\编辑于星期二

95%～99%可排除SLE

（－）SLE治疗缓解病情特重（大量IC沉积消耗抗体）（＋）低滴度常见于RA等其它自身免疫性疾病高滴度可作为诊断SLE的依据ENA抗体谱检测（－）不能排除抗dsDNA、Sm、rib抗体（＋）可帮助诊断ANA初筛二、实验室方法的选择及结果的确认现在是68页\一共有76页\编辑于星期二自身免疫性疾病ANA阳性率（%）SLE80~100MCTD95~100RA20~40PSS85~95PM/DM30~50SS70~80溃疡性结肠炎26慢性活动性肝炎30~40其它风湿病20~50ANA在自身免疫性疾病中的检出率

现在是69页\一共有76页\编辑于星期二