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上节回顾大肠杆菌的培养特性?大肠杆菌的抗原结构包括哪几部分?致病性大肠杆菌有哪些种类?猪群大肠杆菌病的临床特点和典型病变?临床禽大肠杆菌病的表现形式有哪些?浅谈临床上大肠杆菌病的防制要点?沙门氏菌病(Salmonellosis)沙门氏菌(Salmonella)美国兽医微生物学家和病理学家,是美国授予的第一位兽医学博士。1884年任美国农业部畜牧局首任局长。他于1885年首次从病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌。在微生物学中通用的沙门氏菌一词,就是为纪念他而以他的名字命名。DanielElmerSalmon(1850-1914)一、概述沙门氏菌病是各种动物由沙门氏菌属细菌引起的疾病的总称,又称之为副伤寒。主要侵害幼龄动物,临床上表现为败血症、胃肠炎及其它组织的局部炎症。成年动物多呈散发性或偶尔呈地方性流行,妊娠动物可能发生流产。在人主要引起食物中毒,表现为急性胃肠炎。二、病原沙门氏菌属(Salmonella)是肠杆菌科中的一个重要成员,是一大属血清学相关的G-杆菌,无荚膜,不形成芽孢。除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏杆菌外,都有周身鞭毛,能运动。沙门氏菌可存活于绝大多数动物体内以及食品和外界环境中,对外界环境的抵抗力较强。沙门氏菌在普通光学显微镜下的菌体形态。沙门氏菌在电镜下的菌体形态。病原特点7-45℃均可繁殖。在适合的有机物中可存活数周、数月、数年。对干燥、腐败、日光等具有较强的抵抗力。在粪便中存活8个月。肉品熏腌处理不能被杀死,肠炎沙门氏菌在10-19%氯化钠中生存75天。对化学消毒剂抵抗力不强,常用消毒剂可杀死。培养与生化特点该属细菌不能利用乳糖、蔗糖和其他糖产酸产气。麦康凯培养基中含乳糖(中性红为指示剂;pH≤6.8,为红色;pH>6.8,为黄色)。沙门氏菌对四磺酸盐或亚硫酸盐有选择性的利用能力,可用这些化合物作为增菌培养基。因此,亮绿琼脂、SS琼脂和亚硫酸铋琼脂也常被用作该菌的选择性培养基。沙门氏菌在麦康凯琼脂上的典型特征。
沙门氏菌在SS琼脂上的典型特征。
沙门氏菌在亚硫酸铋(BS)琼脂上的典型特征。
抗原结构沙门氏菌具有:O抗原(菌体)58种H抗原(鞭毛)63种K(Vi)抗原(荚膜)其他表面物质抗原(菌毛)O抗原和H抗原是血清学分型的基础:目前已发现2500多种血清型,我国已发现250多个血清型。所有沙门氏菌都可致病,引起人畜致病的沙门氏菌的血清型主要有20种。根据感染宿主的范围宿主适应血清型:
由于长期生活在某些宿主体内,形成对宿主的偏嗜性,很少能使所适应的宿主之外的其他动物发病。非宿主适应血清型:
生活在多种宿主体内,能使多种动物致病。根据对人与动物致病情况分类侵害动物不侵害人:马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌。(动物马流白鸡伤)侵害人不侵害动物:伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌。(损人伤寒甲副伤)侵害动物也侵害人:鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌。(人畜共患鼠猪肠)三、流行病学传染源:病畜和带菌动物。健康动物带菌极为普遍。
病菌可潜伏于消化道、淋巴组织和胆囊内,当外界不良因素使动物抵抗力降低时,病菌可活化而发生内源性感染。传播途径:经粪、尿、乳汁及流产的胎儿、胎衣和羊水排出病菌,污染饲料和饮水,经消化道传给健畜。经病畜和健畜交配或用病猪的精液人工授精都可感染。易感动物:
人、各种家畜家禽及其他动物对沙门氏菌属中许多血清型都有易感性。不分年龄大小都可感染,但以幼年易感。
猪多发生于1~4月龄仔猪。牛多发生于30~40日龄犊牛。羊多发生于断乳前后的羔羊。马多发生于6月龄以内的幼驹。禽多发生于2~3周龄以内的雏禽。流行特征:一年四季均可发生,多为散发或地方流行。多雨潮湿季节多发。受饲养管理及外界条件的影响。四、病原菌分离与鉴定采样:不同沙门氏菌病的采样部位
母畜流产—死胎。公畜沙门氏菌病—睾丸肿块和结节。副伤寒—患病者粪便或病变组织。家禽—雏禽:卵黄囊、肝、脾、胆囊、肠内容物。成年禽:病变卵、心包膜、胆汁、肠内容物。公禽:睾丸、输精管。分离:直接分离:对无污染病料,在普通或鲜血培养基上划线,培养24小时鉴定。增菌培养:对污染病料,用增菌培养(四磺酸钠)。取1:10肝碎块(体积1ml)加入四磺酸培养基10ml,24小时后,增菌液移种至选择性培养基(麦康凯、SS琼脂),将可疑菌落划线于三糖铁琼脂(酚红指示剂)。鉴定:生化试验
大肠杆菌:划线、穿刺线上全部转成黄色,基底部不变。
沙门氏菌:穿刺线上呈黄色,如产生H2S则出现黑色,斜面上仍为红色。血清学试验五、致病机理毒力质粒:增强细菌对寄主肠黏膜上皮细胞的黏附与侵袭作用,提高细菌在网状内皮系统中的存活与增殖,抵抗补体介导的杀伤。内毒素:脂多糖组分脂质A,可引起发热,白细胞变化及中毒性休克等。肠毒素:使动物发生沙门氏菌性肠炎,分为耐热和不耐热肠毒素两种。细胞毒素:导致沙门氏菌病肠炎的重要特征病变—肠上皮细胞的损伤。沙门氏菌的致病力与毒力因子有关猪沙门氏菌病
(仔猪副伤寒
Swineparatyphoid)一、病原各国所分离菌株的血清型和致病力很不一致,主要有:猪霍乱沙门氏菌及Kunzendorf变种—败血症和肠炎猪伤寒沙门氏菌及Voldagsen变种—溃疡性小肠结肠炎,坏死性扁桃体炎和淋巴结炎鼠伤寒沙门氏菌—急性和慢性肠炎肠炎沙门氏菌—急性和慢性肠炎过去,仔猪副伤寒与猪瘟、猪丹毒、猪肺疫、猪气喘病合称为五大传染病。二、发病特点1-4月龄仔猪发病。大猪带菌,呈隐性感染。以消化道传播为主要方式。急性型呈败血症变化。慢性型病猪发生弥漫性纤维素性坏死性肠炎,临床表现为顽固下痢。继发感染时可发生卡他性或干酪性肺炎。三、流行病学传染源:发病猪、带菌猪或带菌的人(间歇排菌)。传播媒介:污染饲料、饮水,特别是动物蛋白质。传播途径:消化道。流行特点部分发病,部分呈隐性或慢性经过,一旦气候变化,营养不全,特别是缺乏维生素、钙磷比例失调,环境脏,拥挤为诱因。以上因素与长途运输等,使猪处于应激状态而易发病。往往继发于猪瘟等其他传染病,副伤寒容易掩盖猪瘟。四、临床症状急性型(败血型):多见断奶后不久的仔猪,发病率低,但死亡率高。
突然发病,呆顿,虚弱,发热(41-42℃),初便秘后下痢,耳/腹部及四肢皮肤深红。潜伏期多为3-30天,根据不同的临床表现,有急性型和慢性型之分。急性副伤寒:猪耳朵、鼻端等肢体末梢皮肤瘀血,呈弥漫的紫红色。
猪沙门氏菌感染造成全身性败血症,于耳翼、腹部、臀部及四肢末端皮肤呈暗红色发绀。
沙门氏菌感染猪全身皮肤密布点状出血。
沙门氏菌感染导致败血症病例,全身皮肤瘀血并有紫斑。
亚急性型、慢性型(结肠炎型):最为常见,临床表现与肠型猪瘟相似。典型僵猪,精神不振,食欲减退,怕冷喜热。眼角有黏液性分泌物。便秘和下痢交替,粥样粪便,含纤维素、坏死组织、饲料凝块,呈灰白色或暗绿色。严重脱水消瘦。后期皮肤出现弥漫性湿疹,被毛粗乱。病猪腹泻,排出暗绿色粥样稀便病猪脱水消瘦,全身的骨形标志明显。慢性副伤寒猪耳朵瘀血、耳尖干性坏疽。
五、病理特征急性型:败血症变化。耳、腹部皮肤出血点或斑块,肝、脾、肾有充血、出血现象,淋巴结有出血,有特征性的:脾肿大,色暗带有蓝色,脾髓不软化,脾间质增生。肠系膜淋巴结呈索状肿胀,呈浆液性、出血性炎症。败血症性出血,实质器官瘀血肿大,呈暗红色,表面散在点状出血胃黏膜出血,肿胀,胃底黏膜发生弥漫性出血。脾瘀血和充血,脾脏瘀血肿大,表面有点状出血,并见紫红色的出血斑肾出血,肾脏发生实质性病变,被膜下有较多的点状出血。心外膜出血,右心扩张,心外膜有多量出血斑点,或呈条纹状出血感染猪肺脏水肿、肿大,肺小叶间隔增宽,肺脏表面具有多发点状出血及少量纤维素。肺淤血水肿,肺脏瘀血水肿并伴发点状出血(多见于尖叶、心叶和膈叶前下部)淋巴结出血,肠系膜淋巴结充血、肿大,表面有点状出血,切面有大理石样花纹亚急性型、慢性型:特征性病变为坏死性肠炎回盲结肠黏膜坏死。盲肠、结肠肠壁增厚。与猪瘟扣状溃疡不同,散在坏死连成大块坏死,坏死处往往形成灰白色溃疡,其表面覆盖坏死组织、饲料污垢物。脾肿胀、坚厚,脾、肝有黄灰色坏死灶,胆囊黏膜坏死。肠系膜淋巴结索状肿胀有出血。肠壁淋巴小结肿大,大肠壁的淋巴小结肿大,浆膜下可见米粒大小灰白色颗粒。感染猪肠道部分外观严重充血与变厚,肠壁浆膜下可见大量米粒大小灰白色颗粒。坏死性肠炎。盲肠、结肠黏膜坏死。肠假膜形成,局部肠黏膜坏死,与渗出的纤维蛋白一起形成污秽淡绿色假膜。慢性副伤寒猪结肠和回盲瓣黏膜上弥漫散在麦麸状坏死性纤维素性炎灶。肠黏膜坏死和溃疡,肠黏膜坏死脱落和融合,形成溃疡和大面积的纤维素性坏死。肝散在小点坏死。胆囊黏膜坏死。六、诊断慢性型病例:根据症状和病理变化、结合流行病学,即可作出初步诊断。急性型病例:诊断较困难,确诊要进行细菌检查及实验室诊断。实质脏器→细菌分离→镜检。生化试验。血清学检查:平板凝集试验。PCR。根据流行病学,临床症状和病理变化只能做出初步诊断,确诊需要进行沙门氏菌的分离鉴定。鉴别诊断猪瘟:稽留热、抗生素治疗无效、脾梗死、扣状溃疡、淋巴结呈大理石样。猪丹毒:G+菌、架子猪、“打火印”(方形或菱形)、关节肿大、心内膜炎。猪肺疫:咽喉肿胀(锁喉风)、胶冻样浸润、纤维素性胸膜肺炎、关节炎。猪痢疾:传播缓慢、持续下痢、血便、肠道表层坏死出血。水肿病:眼睑、头部水肿、身体麻痹、体温正常、组织器官水肿。弯曲菌病:坏死性肠炎,急性肠出血或下痢。注意与猪瘟,猪痢疾和弯曲菌所引起的坏死性肠炎相区别:常规预防:初生仔猪争取早吃初乳断奶前后(1个月以上),应给仔猪口服仔猪副伤寒弱毒冻干菌苗,或在本地流行地区,定期给仔猪接种来预防本病的发生。
应用本场分离株制成单价灭活苗,常能收到良好的免疫效果。紧急预防:发生本病后,将病猪隔离治疗,被污染的猪舍应彻底消毒。
耐过的带菌猪,应隔离育肥,予以淘汰。
未发病的猪可用药物进行预防(拌料:金霉素或磺胺二甲基嘧啶100g/吨)七、仔猪副伤寒的防制药物防治:沙门氏菌对大多数抗菌素都有抗药性。沙门氏菌生长在许多普通抗生素无法达到的、受到保护的细胞内小环境里。抗菌素预防效果比治疗效果好,注意定期更换药物。口服时水中投药比饲料拌药效果好。常用药物:磺胺类药物:以磺胺增效合剂较好,常用:
TMP(三甲氧苄氨嘧啶)0.2gSD(磺胺嘧啶)1.0g
蒸馏水10ml20-25mg/kg体重静脉和肌注,每天2次。免疫预防:仔猪副伤寒弱毒冻干苗(C500弱毒株):出生后1月用。中国兽药监察所房晓文等选用抗原性良好的猪霍乱沙门氏菌强毒株,在含有醋酸铊的普通肉汤中传代培养,经传数百代后,筛选得到该菌的致弱毒株。多价副伤寒弱毒菌苗、单价灭活苗。利用当地优势分离株制备单价灭活苗,常比多价效果好。加强饲养管理:隔离病猪,冲洗猪栏及水槽,严格消毒,降低接触感染。严格控制猪群及工作人员从污染地进入清洁区。改善管理,避免突然改变环境,降低猪群的应激因素。禽沙门氏菌病
(Avium
Salmonellosis)禽沙门氏菌病概述由沙门氏菌属中的一种或几种沙门氏杆菌所引起的禽类急性或慢性疾病的总称。按病原体抗原结构的不同可分为三类:鸡白痢:鸡白痢沙门氏菌引起。
禽伤寒:鸡伤寒沙门氏菌引起。禽副伤寒:其它有鞭毛的沙门氏菌引起。鸡白痢(PullorumDisease)以3周龄以下雏鸡的发病率和死亡率为最高,常发生败血症。而成年鸡呈慢性经过或隐性感染,主要侵害生殖系统。禽伤寒(FowlTyphoid)发生于成年鸡和3周龄以上青年鸡,3周龄以下雏鸡偶尔发病,发生败血症,主要呈慢、隐性感染。禽副伤寒(Avium
Paratyphoid)
常在2-5周龄感染发病,对鸡及其它禽的危害虽不如上二者大,但其病原广泛侵害各种动物与人类,引起沙门氏菌病,公共卫生上重要。人感染沙门氏菌病的病原,主要来自副伤寒禽、肉、蛋及产品。有人报道,除人外,从动物中分离的沙门氏菌,家禽占50.1%。鸡白痢本病是由鸡白痢沙门氏菌引起的禽类感染,主要危害鸡和火鸡。临床表现以雏鸡拉白色糊状稀粪为特征,死亡率高。成年鸡多为慢性经过或隐性感染。一、病原学鸡白痢沙门氏菌O抗原包括O1、O9、O121、O122和O123五种。除无鞭毛外,其他特性与大多数沙门氏菌相同。本菌对热和常规消毒剂的抵抗力不强,但在自然环境中的耐受力较强,如在尸体中可存活3个月,在干燥的粪便及分泌物中可存活4年之久。二、流行病学主要感染2-3周龄以内的雏鸡,成年禽呈慢性经过或隐性感染。肉用鸡、肉卵兼用型鸡易感性高于单纯产卵鸡。本病是典型的经蛋垂直传播疾病之一,亦可通过多种途径水平传播。饲养管理不善,饲料营养不全,潮湿、拥挤,通风不良等因素可加剧本病的爆发。三、临床症状雏鸡和雏火鸡:蛋内感染大多在孵化过程死去,或孵出病弱雏。出壳后感染常于4-5日龄无症状急性死亡。7-10日龄发病增多,2-3周龄达高峰。特征是拉白色糊状粪便,污染肛门附近绒毛。成年鸡:一般呈慢性经过,无症状或症状轻微。食欲降低、渴欲增加,常伴有腹泻。因卵黄性腹膜炎,腹膜增生,表现为“垂腹”,产蛋率、孵化率、受精率下降。病鸡精神沉郁,两翅下垂,拉灰白色稀粪。病雏绒毛被粪便粘集在一起封住肛门。有些病鸡出现关节肿胀、跛行。四、病理变化雏鸡和雏火鸡:急性病例无明显可见的病变。病程稍长者可见心肌、肺、肝、肌胃出现黄白色或灰白色结节,雏鸡卵黄吸收不良。肝脏肿大,胆囊充盈;脾脏有时肿大、坏死。盲肠有干酪物充斥,形成所谓的“盲肠芯”。若累及关节,可见关节肿胀、发炎。成年鸡:卵巢和卵泡变形、变色、变质,内容物变为油脂样或干酪样。卵泡脱落导致卵黄性腹膜炎。公鸡睾丸萎缩,脓肿,输精管官腔增大,充满浓稠物。病雏卵黄吸收不良,内容物变性变质。病鸡心脏白色结节。病鸡肺脏出现黄白色坏死灶。病鸡肌胃坏死。病鸡盲肠有干酪物充斥,形成所谓的“盲肠芯”。病鸡脾脏肿大,肝脏肿大充血,胆囊充盈。病鸡肝脏肿胀,可见坏死斑点。病鸡肝脏上的灰白色坏死灶。有些病鸡出现关节肿胀。
病鸡卵巢变性、变形和坏死。成年鸡卵巢变性、变色和坏死。成年鸡卵巢变性、变形和坏死。禽伤寒本病是由鸡伤寒沙门氏菌引起鸡、鸭和火鸡的一种急性或慢性败血性传染病。特征是黄绿色下痢,肝脏肿大呈青铜色。一、病原学鸡伤寒沙门氏菌与鸡白痢沙门氏菌在生化特性上有些差异,可通过鸟氨酸脱羧试验鉴别,前者不能脱羧,而后者能迅速脱羧。鸡伤寒沙门氏菌O抗原包括O1、O9、O12三种,没有抗原型的变异。二、流行病学鸡和火鸡对本病最易感。本病主要发生于成年鸡(尤其是产蛋期的母鸡)和3周龄以上的青年鸡,3周龄以下鸡偶尔发病。可水平传播亦可垂直传播。三、临床症状雏鸡和雏火鸡:与鸡白痢相似。成年鸡:突然停食、精神萎顿,冠和肉髯苍白。体温升高1-3℃。排黄绿色稀粪。死亡率低,康复禽成为带菌者。四、病理变化雏鸡和雏火鸡:与鸡白痢相似。成年鸡:心包发炎、积水。胆囊充盈,肝脏、脾脏与肾脏充血肿大,有小坏死结节,肺和腺胃有灰白色坏死灶。卵巢变形、变色、变性,卵泡破裂导致腹膜炎。禽副伤寒本病是由多种有鞭毛能运动的泛嗜性沙门氏菌引起的家禽疾病的总称。主要危害雏鸡和火鸡,可造成幼禽严重死亡,母禽感染后会明显影响产蛋率、受精率和孵化率。该病原体以鼠伤寒沙门氏菌最为常见,其能感染各种动物和人类,具有重要的公共卫生意义。一、流行病学易感动物:幼禽对副伤寒最易感,常在2-5周龄感染发病,一月龄以上带菌很少死亡。传染源:本种动物和哺乳动物。传播媒介:饲料(动物蛋白),饮水,老鼠、鸟均可成为传染媒介。可垂直、水平传播。二、主要症状与病理变化雏鸡:同鸡白痢,病程长。病变:肺不常见结节,肠道出血严重,肠道有干酪样肠芯。成年鸡:带菌,慢性多,卵巢、输卵管严重坏死,腹膜炎严重,关节炎可见。鸡副伤寒:小肠出血卡他性炎。鸡副伤寒:盲肠干酪性凝栓。鸡副伤寒:肝脏呈棕色,散在坏死点。鸡副伤寒:感染鸡关节炎、关节肿大。禽沙门氏菌病的防制根据流行病学、临诊症状和病理变化,只能做出初步诊断,确诊需做沙门氏菌的分离和鉴定。鸡白痢可采取鸡的血液或血清做平板凝集试验。鸡白痢沙门氏菌全血平板凝集试验鸡白痢
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