实验生理基本理论

实验生理基本理论第1页，共68页，2023年，2月20日，星期四第一章绪论

第一节实验生理科学概述一、目的二、特点三、基本要求第2页，共68页，2023年，2月20日，星期四生理学药理学病理生理学实验生理科学实验课一、目的第3页，共68页，2023年，2月20日，星期四实验生理科学实验的基本理论：4学时经典性实验：16学时仿真性实验：穿插或用业余时间进行综合性实验：44学时探索性实验：20学时实验操作考核：4学时科研小组活动：部分学生利用业余时间进行第4页，共68页，2023年，2月20日，星期四1．实验对象均为活体2．影响因素多3．规范操作二、特点第5页，共68页，2023年，2月20日，星期四三、基本要求(1)积极准备阅读本书和有关理论了解实验的目的、要求、步骤和操作程序理解实验设计原理，预测实验结果1．实验前第6页，共68页，2023年，2月20日，星期四(2)设计好实验原始记录的表格(3)结合实验内容复习有关理论(4)未预习者不得参与实验(5)检查实验器材和药品第7页，共68页，2023年，2月20日，星期四2.实验中(1)提前到达，外出请假(2)保持整齐、清洁(3)保持安静，不进行无关活动(4)爱护公物，损坏仪器应报告(5)按步骤认真操作，注意保护实验动物和标本，节省实验器材和药品。(6)注意安全，严防触电、火灾、被动物咬伤及中毒事故的发生。第8页，共68页，2023年，2月20日，星期四(7)仔细、耐心地观察实验过程中所出现的现象，及时、真实、客观地记录实验结果，描记实验曲线或图形，并加上必要的文字注释，不可单凭记忆来描述实验结果，以免出错或遗漏，更不可随意修改。实验报告中应尽可能使用原始结果。应培养严谨求实的科学作风。第9页，共68页，2023年，2月20日，星期四(8)实验结果思考：①取得了什么结果？②为什么出现这种结果？③结果的生理或临床意义？④非预期结果的原因？第10页，共68页，2023年，2月20日，星期四3.实验后(1)整理实验仪器，注意复位，正常关机、清洁并防尘。(2)器械应清洗、抹干、清点、交还。损坏或短少？赔偿!第11页，共68页，2023年，2月20日，星期四(3)动物尸体、标本、纸片和废品应放到指定地点。抹干净实验台。自身安全意识环境保护意识。第12页，共68页，2023年，2月20日，星期四(4)值日生应搞好实验室的清洁卫生工作，离开实验室前应关灯、关窗、关水龙头。(5)整理、分析实验结果，认真、独立撰写实验报告并按时递交。第13页，共68页，2023年，2月20日，星期四第二节实验结果的处理(见后)第14页，共68页，2023年，2月20日，星期四第三节实验报告的写作文字简练、通顺书写清楚、整洁明确使用标点符号实验报告的格式和要求如下：第15页，共68页，2023年，2月20日，星期四1姓名、班次、组别、学号2实验序号和题目(日期.室温.气压)3实验目的简洁、清楚。4实验对象5实验方法略。6实验结果把经过处理的结果写上并附必要的原始资料。

第16页，共68页，2023年，2月20日，星期四7讨论和结论分析、推理（解释）。结论是对实验结果进行分析后所得到的概念或论点。结论应与本实验的目的相呼应，本实验未能验证的内容不要写到结论中。也不要罗列具体的经过或重复讨论的内容。结论的文字要精炼。（注明参考读物的出处）第17页，共68页，2023年，2月20日，星期四第二章实验生理科学常用仪器第一节BL-420生物机能实验系统

第二节MS-2000多媒体生物信号记录分析系统第三节721型分光光度计

第四节TDL-5型台式离心机第五节常用手术器械第六节常用生理溶液张力换能器

压力换能器第18页，共68页，2023年，2月20日，星期四一、蛙类手术器械1．剪刀2．镊子3．金属探针4．玻璃分针5．蛙心夹6．蛙板第19页，共68页，2023年，2月20日，星期四二、哺乳类手术器械1．手术刀2．剪刀3．镊子类4．止血钳5．咬骨钳6．颅骨钻7．动脉夹8．气管插营9．血管插管第20页，共68页，2023年，2月20日，星期四实验研究设计?第21页，共68页，2023年，2月20日，星期四杨斌指导、2003级学生伍国俊等的

“L-芝麻脂素的镇痛作用及机制研究”获二等奖秦箐.邝晓聪等指导、2003级学生何薇等的“茉莉花化学成分及其免疫活性研究”共两项成果获二等奖“挑战杯”第22页，共68页，2023年，2月20日，星期四

莫曾南指导、我校2003级本科生谭爱花、廖存合写的论文“Meta-analysis

of

holmium

laser

enucleation

vs

transurethral

resection

of

the

prostate

for

symptomatic

prostatic

obstruction”

已经被British

Journal

of

Surgery

英国外科学杂志接受发表，将在最近一期刊出。该杂志2005年影响因子为3.722，是国际知名的外科学临床杂志。第23页，共68页，2023年，2月20日，星期四钟南山、袁隆平等第24页，共68页，2023年，2月20日，星期四2006年安德鲁·法尔和克雷格·梅洛

（RNA干扰机制）2005年巴里·马歇尔和罗宾·沃伦

（幽门螺杆菌）2004年理查德·阿克塞尔和琳达·巴克

（气味受体和嗅觉系统）诺贝尔生理学或医学奖第25页，共68页，2023年，2月20日，星期四第四章实验研究设计

第一节基本程序一、立题二、实验设计三、实验和观察四、实验结果的处理五、研究结论第二节第26页，共68页，2023年，2月20日，星期四1.选题原则(1)目的性做什么?为什么做?(2)创新性新技术/方法/理论,

修改完善原有的......(3)科学性科学依据(4)可行性主观/客观条件2.假说的建立预期结果一、立题研究设计的前提，决定研究方向和内容返回第27页，共68页，2023年，2月20日，星期四二、实验设计制定研究计划和方案：研究意义、内容、目标、方法、技术路线、实验手段、技术关键、设备、试剂、对象任务：控制干扰因素节省人力物力财力多因素多剂量多指标返回(目的、专业、统计学)第28页，共68页，2023年，2月20日，星期四三、实验和观察1.实验准备和预实验①理论准备理论及假说，方法和技术②实施准备设备、药物及试剂、实验方法及指标、对象③预实验熟悉技术、完善方案第29页，共68页，2023年，2月20日，星期四2.实验及记录①正式实验②原始记录文字、数字、图形、照片、表格、录像、电脑数据③结果判断错误操作?不合理?新发现?（及时、完整、准确、整洁）返回(方式、内容)第30页，共68页，2023年，2月20日，星期四四、实验结果的处理①整理原始数据或资料，计算各组数据的均值和标准差，表、图②统计学分析(绝不能有研究者的偏见、对数据任意取舍)第31页，共68页，2023年，2月20日，星期四原始资料①计量资料：用仪器、工具或其它定量方法对每个观察单位的某项标志进行测量，并把测量结果用数值大小表示出来的资料，有单位。如血压、呼吸、尿量、血流量等。（连续变量，均值和标准差）②计数材料：将观察单位按某种属性或类别分组，然后清点各组观察单位数所得的资料。（与否：阳性或阴性，有效与无效,生或死）第32页，共68页，2023年，2月20日，星期四计量性质实验

(高低、长短、快慢、轻重、多少等)（标注单位和数值定量，列成表格）

记录、整理结果第33页，共68页，2023年，2月20日，星期四做表格应注意：①将观察的项目列于表的左侧，由上而下逐项填入。②表的右侧可按时间或数量变化的顺序或观察的指标的不同由左至右逐格写入。③必要时可根据表格的数值绘图。第34页，共68页，2023年，2月20日，星期四曲线记录实验(标注说明、刺激记号、时间记号等）

整理曲线图第35页，共68页，2023年，2月20日，星期四绘图注意：①附绘图所依的数值表格。②横轴表示刺激条件或给药剂量大小，纵轴表示反应的强度，坐标轴应给予适当的注解。③图的大小应恰当。④在图的下方写上图号和标题。⑤图中各点间可用直线连接；如果不是连续的变化也可用柱形图表示。第36页，共68页，2023年，2月20日，星期四第37页，共68页，2023年，2月20日，星期四第38页，共68页，2023年，2月20日，星期四第39页，共68页，2023年，2月20日，星期四需要一定数量标本的结果并进行统计学处理返回记录对照资料！！！第40页，共68页，2023年，2月20日，星期四五、研究结论分析实验结果和现象概括出结论（紧扣假说）（严谨、精练、准确）返回结果整理、分析→变化的规律性→规律的成因及机制第41页，共68页，2023年，2月20日，星期四第二节实验设计三大要素一、处理因素二、受试对象三、实验效应第三节电刺激对大鼠体感Ⅱ区痛单位活动的影响山梗菜碱对家兔吗啡所致呼吸抑制的影响第42页，共68页，2023年，2月20日，星期四１.抓住主要因素过多？过少？２.确定因素的强度如刺激强度、药物剂量３.处理因素的标准化如刺激参数４.非处理因素的控制如温度一、处理因素返回第43页，共68页，2023年，2月20日，星期四二、受试对象1.动物：蛙、大鼠、小鼠、兔（选择）2.人返回模型、特征第44页，共68页，2023年，2月20日，星期四三、实验效应1.实验方法的选择：

①生理学、生物化学、毒理学、免疫学等②整体方法、局部分析法③整体、器官/系统、细胞/分子水平④急性（在体/离体）、慢性第45页，共68页，2023年，2月20日，星期四①特异性：②客观性：③灵敏度：④精确度：⑤可行性：⑥认可性：（低→假阳性）（避免主观因素的影响）（低→假阴性）（又称准确度，含精密度、正确度）技术/设备依据或经鉴定2.实验指标（检测指标）选择的基本条件：返回研究对象中某些可被检测仪或研究者感知的特征或现象。第46页，共68页，2023年，2月20日，星期四图1计量的精密度、正确度和精确度的示意图（圆心O为被测量的“真实值”，黑点为其测得值）图(a)：正确度较高、精密度较差；图(b)：精密度较高、正确度较差；图(c)：精确度(准确度)较高，即精密度和正确度都较高。精密度：多次测得值的一致性正确度：测得值与真实值的接近程度第47页，共68页，2023年，2月20日，星期四第三节实验设计三大原则一、对照原则三、重复原则二、随机原则第四节第48页，共68页，2023年，2月20日，星期四1.空白对照

不给任何处理

2.假处理对照3.安慰剂对照双肓4.历史对照

5.自身对照

（处理组与对照组前后效应）6.标准对照(阳性对照)

标准方法或同类药物7.相互对照

多个平行实验组互为对照一、对照原则返回第49页，共68页，2023年，2月20日，星期四(1)假处理对照组：麻油+假烫伤(37℃水)(2)单纯阻断假处理组：RU38486+假烫伤(3)烫伤对照组：麻油+95℃水(切片证实)(4)烫伤+GR阻断组：RU38486+烫伤iv生理盐水1mliv甘露醇1ml第50页，共68页，2023年，2月20日，星期四二、随机原则机会均等，减少误差返回分层随机第51页，共68页，2023年，2月20日，星期四三、重复原则

P≤0.05或P≤0.01生物个体差异小处理因素强度较大实验技术较先进计量资料高效实验设计大动物例数可以较少返回重现性与重复数动物计量资料计数资料小动物（小鼠、大鼠、蛙）≤10≥30

中等动物（豚鼠、兔）≥6≥20

大动物（猫、猴、犬）≥5≥10第52页，共68页，2023年，2月20日，星期四第四节常用实验设计方法一、完全随机设计二、配对设计三、配伍设计四、拉丁方设计五、正交设计第53页，共68页，2023年，2月20日，星期四单因素设计(t、F、x2)编号，取随机数字，奇数A，偶数B，加一个随机数兔号1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

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15

16

数字84

42

17

53

31

57

24

55

06

88

77

04

74

47

67

21

76组别BBAAAABABBABBAAA调整B76/9=4一、完全随机设计：16只大白兔随机分为二组，A组9只，调1只到B组：第17位随机数为76，76/9得余数4，故A组的第4只兔即6号兔调到B组第54页，共68页，2023年，2月20日，星期四单因素设计(配对t)配对并编号，取随机数字，奇数第1个为A，偶数第1个为B

对数1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

数字31

16

93

32

43

50

27

89

87

19

20

15

第1个ABABABAAAA

BA

第2个BABABABBBBAB二、配对设计：第55页，共68页，2023年，2月20日，星期四双因素设计(双因素F)三、配伍设计：第56页，共68页，2023年，2月20日，星期四四、拉丁方设计：三因素设计(三因素F)ABCDBADCCDBADCAB

标本号1

23

4

用1

ABCD

药2BDAC

顺3CADB

序4

DCBA

n×n第57页，共68页，2023年，2月20日，星期四五、正交设计：高效多因素设计记为L9(34)，L表示正交实验，L的右下标表示实验次数，括号内数字表示水平数，右上角的数字表示因素数下例表示做9次实验，每个因素有三个水平，安排4个因素

(适于药物配比)(四种药物三个剂量)第58页，共68页，2023年，2月20日，星期四实验号药物A药物B药物C药物D1低低低低

2低中中中

3低高高高

4中低中高

5中中高低

6中高低中

7高低高中

8高中