实验室检查免疫

实验室检查免疫第1页，共39页，2023年，2月20日，星期四

肿瘤标志物的概念

肿瘤标志物是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞产生和释放、反映肿瘤存在和生长的一类物质。这类物质能在细胞、组织、血液或体液中出现，可采用化学、免疫和分子生物学技术和方法对这类物质进行定性或定量检测。

第一节肿瘤标志物检查第2页，共39页，2023年，2月20日，星期四

肿瘤标志物临床应用的原则1.根据我国肿瘤标志物应用于肿瘤普查和筛查的经验，比较理想并有较好临床价值的是：甲胎蛋白（AFP）应用于原发性肝癌高发区人群普查EB病毒IgA抗体（EBV-IgA）应用于鼻咽癌高发区普查前列腺特异性抗原（PSA）应用于前列腺癌的初筛第3页，共39页，2023年，2月20日，星期四2、切忌仅根据某肿瘤标志物一时升高，轻易下诊断；即使明显升高也应根据临床症状、检查结果等综合分析判断。3、为了提高诊断的准确性，应用多变量分析，将几项相关的标志物组成联合标志物组，同时对某一肿瘤进行检测。4、观察肿瘤复发和疗效的监测是肿瘤标志物应用的重要方面。必须定期、动态地观察检测结果。5、要注意假阴性和假阳性问题第4页，共39页，2023年，2月20日，星期四肿瘤瘤体大小与术前肿瘤标志物的关系

结直肠肿瘤——CEA

卵巢癌——CA125

肺癌——CYFRA21-1（CK19）

显著相关

第5页，共39页，2023年，2月20日，星期四一、甲胎蛋白(AFP)

由卵黄囊和胚胎期肝细胞合成的胚胎蛋白，属胚胎性抗原标志物。正常肝细胞不合成AFP，当肝细胞癌变后，AFP可重新表达。肝脏来源和胚胎来源的AFP存在共同的免疫特异性。妊娠妇女怀孕6周开始合成AFP，至7~8个月达高峰，血和尿中AFP升高。分娩后3周降为正常。第6页，共39页，2023年，2月20日，星期四正常参考值范围：成人血浆或血清AFP<25g/L(免疫分析法测定)注意：胎儿血清中AFP升高。出生后，AFP合成受抑制，一年内降至正常水平。半衰期<5天第7页，共39页，2023年，2月20日，星期四临床意义(1)是原发性肝癌最敏感、最特异的肿瘤标志物，血中AFP>300~400g/L或含量不断增高，肝脏有占位病变者，基本可诊断为原发性肝癌。必须注意：约20~30%的原发性肝癌血清AFP正常。(2)睾丸癌、畸胎瘤等生殖腺胚胎性肿瘤患者AFP显著升高。第8页，共39页，2023年，2月20日，星期四(3)良性肝脏疾病，如肝炎、肝硬化等血清AFP水平也可升高，但常为轻中度。(4)原发性肝癌患者疗效评估和肿瘤复发、转移的监测。(5)肝硬化等肝脏疾病动态观察AFP浓度变化，对早期诊断原发性肝癌有重要价值。(6)产前诊断胎儿宫内死亡、神经管畸形、无脑儿等。第9页，共39页，2023年，2月20日，星期四二、癌胚抗原(CEA)1965年从胎儿和结肠癌组织中发现的，为一大分子多糖复合物。一般情况下，CEA由胎儿胃肠道上皮组织合成，出生后血清降至正常水平。CEA属非器官特异性肿瘤相关抗原，分泌CEA的肿瘤大多位于空腔脏器，如胃肠道、呼吸道、泌尿道等。第10页，共39页，2023年，2月20日，星期四正常参考值范围：

非吸烟健康人血清CEA浓度<5g/L(免疫分析法)注意：不同方法、不同试剂盒检测，正常参考范围可略有差异，应根据各医院的正常值。第11页，共39页，2023年，2月20日，星期四临床意义(1)良性疾病：部分重度吸烟者(20~40%)血清CEA升高。血清CEA升高还见于肠梗阻、尿毒症、胰腺炎、肝硬化、结直肠息肉、胃溃疡等(约20~30％)，但为短暂性、轻中度升高。(2)恶性疾病：CEA显著升高见于结直肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、甲状腺髓样癌等，一般无助于各肿瘤的早期诊断。第12页，共39页，2023年，2月20日，星期四（3）肿瘤患者血清CEA水平与肿瘤的进展相关，CEA值升高提示病变残存或进展；显著升高者，大多为肿瘤浸润，其中70%为转移癌。

(4）监测CEA有助于肿瘤术后观察及疗效判断。一般情况手术切除肿瘤后6周，CEA水平恢复正常，否则提示肿瘤残存。应注意：约7~10%患者肿瘤复发时血清CEA升高不明显。第13页，共39页，2023年，2月20日，星期四(5)胃液、唾液、尿液中CEA浓度明显升高于血清，且较血中升高出现早，故对胃癌、膀胱癌的诊断价值高于血清标本。第14页，共39页，2023年，2月20日，星期四三、CA15-31984年Hilkens等以人乳脂肪球糖蛋白制备的单克隆抗体所识别的抗原，主要位于乳腺癌细胞，分子量为400Kd，分子结构至今不清楚。

正常参考值范围<25KU/L(免疫分析法)第15页，共39页，2023年，2月20日，星期四临床意义(1)50~70%乳腺癌患者血清CA15-3浓度明显升高，晚期患者约100%出现升高。(2)是监测乳腺癌术后复发的最佳指标。(3)50%肺癌、40~50%的胃肠道肿瘤、30%卵巢癌出现升高。(4)透析肾衰患者（20%）、慢肝（5%）、良性乳腺疾病（4%）可能会出现升高。第16页，共39页，2023年，2月20日，星期四四、CA-1251981年Bast用卵巢囊腺癌细胞系作抗原制备的单克隆抗体OC125结合的上皮性卵巢癌抗原，分子量为200Kd的糖蛋白。存在于上皮性卵巢癌组织和病人血清中。

正常参考值范围<35KU/L(免疫分析法)第17页，共39页，2023年，2月20日，星期四临床意义(1)轻度升高可见于健康妇女、3~6%良性卵巢疾病或非肿瘤患者，如行经期等。(2)是上皮性卵巢癌和子宫内膜癌的标志物，约80%的患者出现升高。此外，透明细胞癌、未分化卵巢癌等均可升高。(3)肿瘤复发CA-125升高先于临床症状，因此，监测血清CA-125水平有助于肿瘤复发、转移的观察。第18页，共39页，2023年，2月20日，星期四(4)非卵巢恶性肿瘤也有一定的阳性率，是一种较广谱的肿瘤标志物，约50%胰腺癌、40%肺癌等可出现升高。(5)良性和恶性胸腹水中CA125升高，羊水中也有较高水平。(6)早期妊娠妇女（3个月内），CA125有升高的可能。慢性肝病（57%）、腹膜炎（59%）、子宫良性疾病（20%）、心和肾脏功能不全（10%）出现升高。第19页，共39页，2023年，2月20日，星期四五、CA19-91979年Koprowski将人结直肠细胞株SW1116表面分离出的单唾液酸神经节糖苷脂作抗原，制备的单克隆抗体识别的肿瘤相关抗原，分子量约36Kd。胎儿的胰腺、肝脏、肠等组织也存在此种抗原。正常参考范围<37KU/L（免疫分析法）第20页，共39页，2023年，2月20日，星期四临床意义（1）胰腺炎、胆囊炎、胆管壶腹癌时，血清CA19-9水平升高，尤其是诊断胰腺癌敏感性为70～95％，特异性为72～90％，是重要的辅助诊断指标。（2）胃癌阳性率为50％、结直肠癌为60％、肝癌阳性率为51％。（3）急性胰腺炎、胆囊炎、肝硬化、肝炎等疾病，CA19-9也有升高，注意鉴别诊断。第21页，共39页，2023年，2月20日，星期四

六、前列腺特异性抗原(PSA)PSA是由前列腺上皮细胞合成的糖蛋白，仅存在于前列腺上皮细胞的胞质、导管上皮和粘液内，具有糜蛋白酶样和胰蛋白酶活性，在血中半衰期仅为2~3.5天。PSA在血清中以游离型和结合型存在，结合型PSA在前列腺癌病人血清中约占80%，称为复合PSA（C-PSA)；20%的PSA为非结合形式，称为游离PSA（F-PSA）。第22页，共39页，2023年，2月20日，星期四正常参考值范围正常男性血清T-PSA<4.0g/L

;F-PSA<0.8g/L

；F-PSA/T-PSA比值>0.25注意：PSA水平受年龄、前列腺的体积、前列腺损伤性检查的影响。第23页，共39页，2023年，2月20日，星期四

临床意义

（1）PSA是目前诊断前列腺癌最敏感的特异性标志物，具有器官特异性。可用于前列腺癌的早期诊断、疗效监测及预测复发。T-PSA>4.0μg/L对前列腺癌诊断的阳性率为50~80%。（2）前列腺肥大、前列腺炎等良性疾病也可见T-PSA和F-PSA的轻度升高。第24页，共39页，2023年，2月20日，星期四(3)前列腺癌血清结合型PSA明显升高，游离型显著下降。特别当T-PSA4.0~20.0μg/L，测定PSA类型有助于鉴别良性和恶性疾病。当游离型PSA(F-PSA)／结合型PSA(T-PSA)比例<0.1时，诊断前列腺癌的敏感性和特异性分别为92%和90%。>0.25提示可能为前列腺增生，特异性达90％，正确性>80％。第25页，共39页，2023年，2月20日，星期四（4）约有5％前列腺癌患者T-PSA在正常范围，但前列腺酸性磷酸酶升高，同时检测可提高前列腺癌的诊断率。第26页，共39页，2023年，2月20日，星期四

七、神经元特异性烯醇化酶（NSE)NSE是烯醇化酶的一种同工酶（γγ亚基）,分子量为87Kd，参与糖酵解，催化2磷酸甘油变成烯醇式磷酸丙酮酸。NSE是小细胞肺癌和神经母细胞瘤的肿瘤标志物。正常参考范围血清<15μg/L(免疫分析法）第27页，共39页，2023年，2月20日，星期四

临床意义（1）小细胞肺癌患者NSE水平明显高于肺腺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌等，可用于鉴别诊断和监测小细胞肺癌放疗、化疗效果。（2）神经母细胞瘤患者NSE异常升高，可用于鉴别诊断及疗效评价。（3）神经内分泌细胞肿瘤患者血清NSE也可升高。第28页，共39页，2023年，2月20日，星期四（4）也存在于红细胞内，标本溶血会影响检测结果。第29页，共39页，2023年，2月20日，星期四(1)乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与亚型：是病毒吸附易感细胞的受体成分，可诱导机体产生特异性保护性抗体抗-HBs。HBsAg主要有4种亚型：adw、ayw、adr、ayr。我国HBV感染以adr亚型多见，少数民族基本为ayw。可以出现不同亚型HBV的重复感染。第二节乙肝病毒标志物检测第30页，共39页，2023年，2月20日，星期四HBsAg血清、唾液、精液等中存在表明有急性乙肝或慢性乙肝或无症状携带者，可以维持数月、或长期存在，是HBV现行感染的重要指标。典型HBV感染，HBsAg在ALT和症状出现前2~4周检出，急性乙肝恢复后1~4个月消失。是乙肝早期诊断的主要指标。最新文献报道：HBsAg浓度可以反映体内HBVcccDNA的水平，作为抗病毒治疗的有用评价指标（派罗欣、PEG-IFN-γ）。第31页，共39页，2023年，2月20日，星期四

抗-HBs是一种保护性抗体，能清除已感染的HBV或防止HBV感染。可持续数年，滴度与保护作用平行，一般认为具有20~30IU/ml机体具有保护力。是评价乙肝疫苗有效性的重要标志。一般在HBsAg转阴后出现，常示疾病恢复。既往感染过HBV，现已恢复。被动免疫第32页，共39页，2023年，2月20日，星期四HBeAg

急性乙肝或慢性乙肝均可阳性，急性乙肝持续阳性者，可发展为慢性乙肝。是HBV复制活跃和血清具有强传染性的标志。

e抗原阳性孕妇，HBV母婴传播率很高。

HBeAg抗-HBe的转换是抗病毒药物疗效评价指标。第33页，共39页，2023年，2月20日，星期四抗-HBe

急性乙肝阳性表示病情恢复，传染性降低。慢性乙肝阳性应结合HBV-DNA检测，若HBV-DNA阴性，表示病毒复制减少；若HBV-DNA阳性，可能是前C区基因变异病毒株感染。HBeAg和抗-HBe双阳性，可能为野生株和变异株同时存在，预后差。或为转换之中。第34页，共39页，2023年，2月20日，星期四抗-HBc包括IgG、IgM和IgA，目前常检测的是总抗-HBc。不是中和抗体，而是反映肝细胞受HBV侵害的指标。抗HBc-IgM阳性是HBV感染后在血液中最早出现的抗体，通常在ALT升高时出现。是诊断急性乙肝和判断病毒复制活跃的指标。约5~15%慢性乙肝患者抗HBc-IgM阳性，在活动期更为明显。是既往HBV感染的指标，可数年不消退。第35页，共39页，2023年，2月20日，星期四前S抗原和抗-前S前S抗原出现较早，与HBeAg和HBV-DNA显著相关，可作为HBV早期感染的指标，并反映HBV复制。抗-前S的出现与抗-HBs相关，是HBV的中和抗体，可作为清除病毒和疾病预后的参考指标。第36页，共39页，2023年，2月20日，星期四HBV自限性感染不同病毒标志物检测时相图Incubation(4-12weeks)ActiveInfection(2-12weeks)Improve(2-16weeks)Recovery(Years)SymptomsHBsAganti-HBcTotalanti-HBsTimeRelativeConcentrationant