DB32T 3762.3-2020新型冠状病毒检测技术规范 第3部分：核酸荧光PCR检测程序_第1页
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ICS11.020C2江苏省地DB32方标准DB/T3762.3—2020TechnicalspecificationsforSARSCoV2detectionPartReal-timefluorescencePCRtestprocedure江苏省市场监督管理局发布前言BTGB/T1.1-2009给出的规则起草。江苏省卫生健康委员会提出。。4.2操作人员资质及防护要求PCR与设施、设备与耗材、试剂与材料、样与核酸提取、扩增体系配制与扩增、结果判定。范性引用文件凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB489实验室生物安全通用要求原卫生部办公厅实验室工作导则原卫生部检验中心病毒实验室生物安全指南国家卫生健康委定义文件4环境与设施4.1实验室资质及级别要求二级实验室(BSL-2)进行，同时采用生物安全三级实验室(BSL-3)的个人防护；感染性材料或活病毒在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测操作应在BSL-2进行。核酸扩增应在基因扩增实验室进行,临床检测机构基因扩增实验室应满足B设备与耗材5.1设备CR5.2耗材防水靴套、微量移液器及各种配套带滤芯Tip头、1.5mLEP管、冻存管、冻存盒。与材料.1试剂PCR2材料消毒剂：75%乙醇；有效氯5500mg/L的消毒液(需每天新鲜配制)；生理盐水或磷酸盐缓冲液(PH=7.4)；4%NaOH或含1g/L蛋白酶K的磷酸盐缓冲液或0.1%二硫苏糖醇的磷酸盐缓冲液。理与核酸提取样本前处理K一步试验。核酸提取.1核酸提取按照核酸提取试剂盒或核酸提取仪操作说明进行。，连同样本转运盒进行盒内外消毒后转出生安柜。性手术衣、脱一次性手术衣放入中号垃圾袋，包扎垃圾袋。消毒垃圾袋外表面、核前应以塑料袋覆盖机器如核酸提取仪、2.4.5将核酸交核酸检测人员。样本转入病毒样本专用专人保管冰箱。扩增体系配制与扩增位置和样本编号。毒样本专用专人保管冰箱。仪器上设置扩增参数进行扩增。9结果判定9.1阈值设定。9.2质控标准9.2.1样本内参基因要求参RNP基因出现典型的扩增曲线呈S型，且Ct值小于或等于35。9.2.2一般要求9.2.3阴性对照9.2.4阳性对照SCt于或等于30。9.3结果判断个：a)同一份样本中新型冠状病毒2个靶标(ORF1ab、N)实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性。9.3.3不确定结果：在对照成立下，如果检

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