第四章-核酸化学

姓名______________学号________________成绩_____________第四章核酸化学一、是非判断题1．DNA是生物遗传物质，RNA则不是。2．基因表达的最终产物都是蛋白质。3．脱氧核糖核苷中的糖环3’位没有羟基。4．B-DNA代表细胞内DNA的基本构象，在某些情况下，还会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构象。5．用碱水解核酸时，可以得到2’和3’-核苷酸的混合物。6．DNA的Tm值随（A+T）/（G+C）比值的增加而减少。7.若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpApC，则另一条链的碱基顺序为pGpApCpCpTpG。8.若种属A的DNATm值低于种属B，则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。9.原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。10.核酸的紫外吸收与其pH无关。11.生物体内存在的游离核苷酸多为5’-核苷酸。12.Z型DNA与B型DNA可以互变。13.生物体内天然存在的DNA分子多为负超螺旋。14.mRNA为生物体内种类最多、含量最丰富的RNA。15.tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。16.真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3’-OH。17.目前为止发现的修饰核苷酸大多存在于tRNA。18.对于提纯的DNA样品，测得OD260/OD280＜1.8，则说明样品中含有RNA。19.两个核酸样品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，则A的纯度大于B的纯度。20.核苷酸分子中的核糖为吡喃型结构。21.真核生物mRNA均含有polyA结构和帽子结构，原核mRNA则无。22.RNA分子可以热变性，并具有增色效应。二、选择题1．含有稀有碱基比例较多的核酸是：（）A．胞核DNA

B．线粒体DNA

C．tRNA

D．mRNA2．决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是：（）A．–XCCA3`末端

B．TψC环；C．DHU环

D．额外环

E．反密码子环3．构成多核苷酸链骨架的关键是：（）A．2′3′-磷酸二酯键

B．2′4′-磷酸二酯键

C．2′5′-磷酸二酯键

D．3′4′-磷酸二酯键

E．3′5′-磷酸二酯键4．

DNA变性后理化性质有下述改变：（）A．对260nm紫外吸收减少

B．溶液粘度下降C．磷酸二酯键断裂

D．核苷酸断裂5.关于RNA分子，下列哪个为错误的？（）A、都是单链线形分子；B、单链回折可形成发夹结构；C、在70℃以上时出现增色效应；D、RNA的Tm值较DNA低6.关于核苷酸的叙述，下列哪个为错误的？（）A、细胞中游离的核苷酸均为5’-核苷酸B、核苷酸中的糖苷键均为C-N糖苷键C、核苷酸中的糖苷键均为β-糖苷键D、核苷酸是含碱基的磷酸酯E、碱基与糖环平面垂直7.对DNA双螺旋结构的描述，下列哪个为错误的？（）A、两条链反向平行旋转B、嘌呤与嘧啶碱基互补配对C、维持双螺旋结构稳定的主要力是氢键D、DNA双螺旋结构具有多态性E、碱基堆积形成分子中心的疏水区8.对DNA超螺旋的叙述，下列哪个为错误的？（）A、在外加张力作用下，双螺旋DNA形成超螺旋B、双螺旋DNA处于拧紧状态时形成正超螺旋C、细胞所有天然存在的DNA超螺旋均是正超螺旋D、超螺旋DNA结构紧密有利于组装成染色体E、负超螺旋比正超螺旋容易解链9.关于tRNA的生理功能和结构，下列哪个为错误的？（）A、转运氨基酸，参与蛋白质的合成B、tRNATyr及tRNAPro可以作为RNA反转录的引物C、氨酰tRNA可调节某些氨基酸合成酶的活性D、5’端为pG….或pA….结构E、tRNA三级结构为倒L型10.关于核酸变性的描述，下列哪个为错误的？（）A、紫外吸收值增加B、分子黏度变小C、共价键断裂，分子变成无规则线团D、比旋光减小E、浮力密度升高11.胰核糖核酸酶水解RNA，产物是（）A、3’-嘧啶核苷酸B、5’-嘧啶核苷酸C、3’-嘧啶核苷酸和以3’-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸D、5’-嘧啶核苷酸和以5’-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸E、3’-嘧啶核苷酸和5’-嘧啶核苷酸；12.胸腺嘧啶除了作为DNA的主要组分外，还经常出现在下列哪种RNA分子中（）A、mRNA；B、tRNA；C、rRNA；D、hnRNA；E、snRNA13.RNA经NaOH水解，其产物是（）A、5’-核苷酸B、2’-核苷酸C、3’-核苷酸D、2’-核苷酸和3’-核苷酸的混合物E、2’-核苷酸、3’-核苷酸的混合物和5’-核苷酸；14.对DNA片段作物理图谱分析，需要用（）A、核酸外切酶；B、DNAaseI；C、DNA连接酶；D、DNA聚合酶I；E、限制性内切酶三、填空题1.20世纪50年代，Chargaff等人发现各种生物体DNA碱基组成有的特异性，而没有的特异性。2.DNA双螺旋中只存在种不同碱基对，T总是与配对，C总是与配对。3.核酸分子中的糖苷键均为型糖苷键，糖环与碱基之间的连键为键，核苷与核苷之间通过键连接形成多聚体。4.核酸在260nm附近有强吸收，这是由于。5.给动物喂食用3H标记的，可使DNA带有放射形，而RNA不带放射形。6.双链DNA中若含量多，则Tm值高；DNA样品的均一性愈高，其熔解温度愈；DNA所处介质的离子强度越低，其熔解过程的的温度范围越，熔解温度越，所以DNA应保存在较浓度的盐溶液中，通常为mol/L的NaCl溶液。7.双链DNA热变性后，或在pH2以下，或pH12以上时，其OD260，同样条件下，单链DNA的OD260。8.变性DNA的复性与许多因素有关，包括、、、、等。9.双链DNA螺旋距为3.4nm，每匝螺旋的碱基数为10，这是DNA的结构；RNA分子的双螺旋区以及RNA-DNA杂交双链具有与型DNA相似的结构，外型较为；d（CGCGCG）寡聚体的结构时发现它为螺旋，称为形DNA，外形较为。10.常用二苯胺法测定含量，用苔黑酚法测含量。11.维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素为，其次大量存在于DNA分子中的弱作用力如、和也起一定作用。12.测定DNA一级结构的方法主要有Sanger提出的法和GilbertM提出的法。13.DNA测序的解决得益于两种新技术的帮助：和。14.Oligo(dT)-纤维素可以用来分离纯化真核生物的。15.真核生物mRNA帽子结构的简写形式为。16.tRNA分子各部分的功能：氨基酸壁是、DHU环是、反密码环是、TΨC环是。17.提取RNA的关键步骤是。18.用琼脂糖凝胶电泳分离超螺旋DNA、线性DNA及开环DNA，其迁移率速度最大的是，最小。名词解释⒈增色效应；⒉分子杂交；⒊碱基互补；⒋DNA一级结构；⒌限制性内切酶；⒍核酸变性和复性；⒎DNA双螺旋结构；⒏DNA组成的Chargaff规则；⒐DNA超螺旋；⒑Sanger测序；⒒PCR；问答题⒈根据给定的条件回答相应的问题：T7噬菌体DNA，其双螺旋链的相对分子质量为2.5×107，计算DNA链的长度（核苷酸对的平均相对分子质量为650）；相对分子质量为130×106的病毒DNA分子，每微米的质量是多少？编码92个核苷酸的tRNA的基因有多少？编码细胞色素C（104个氨基酸）的基因有多长？（不考虑起始和终止序列）编码相对分子质量为9.6万的蛋白质的mRNA，相对分子质量为多少？λ噬菌体DNA长17μm，一突变体DNA长15μm，问该突变体缺失了多少碱基对？⒉核酸的种类和生物功能是什么？⒊试述下列因素如何影响DNA的复性过程：⑴阳离子存在；⑵低于Tm的温度；⑶高浓度的DNA链。⒋PCR反应的原理和内容？⒌简述Sanger测序和自动测序的原理？答案一、是非题1.错2.错3.错4.对5.对6.对7.错8.错9.错10.错11.对12.对13.对14.错15.对16.对17.错18.错19.错20.错21.错22.对二、选择题1.C2.E3.E4.B5.A6.B7.C8.C9.D10.C11.C12.B13.D14.E三、填空题⒈种、组织；⒉2、A、G；⒊β、C-N糖苷、3-5磷酸二酯键；⒋碱基环共轭键；⒌T；6.G+C、窄、宽、低、高、1；7.增加、不变；8.样品均一度、浓度、片段大小、离子强度；9.B、A、粗短、左手、Z、细长；10.DNA、RNA；11.碱基堆积力、氢键、离子键、范德华力；12.酶、化学；13.高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳、限制性内切酶；14.mRNA；m7G5ppp5Nm-；16.携带氨基酸、识别氨酰tRNA合成酶、识别密码子、核糖体；17.防止RNAase活性；18.超螺旋DNA、开环DNA四、名词解释1．单链核苷酸ε(P)值大于双链核苷酸；因此核酸变性时,ε(P)值增高，称增色效应。2．不同来源的分子，经热变性后，在冷却复性过程中，异源核酸分子间通过碱基配对形成杂交分子。3．两条核苷酸链上的碱基分别通过氢键，其中一条链上的嘌呤碱必须与另一条链上的嘧啶碱配对，AT形成两个氢键;GC形成三个氢键。4．A、T、G、C通过3`，5`-磷酸二酯键连接，C1--碱基，C2--脱氧。5．具有严格碱基序列专一性的内切酶，能降解外源而对自身序列无作用。6．变性：双螺旋区氢键的断裂，变成单键，不涉及共价键，磷酸二酯键断裂降解。复性：两条分开的链重新闭合为双螺旋称复性，复性可部分恢复理化性质。7．两条反平行多核苷酸链绕中心轴缠绕形成的右手螺旋。8．Chargaff等科学家用纸层析及紫外分光光度技术分析了各种生物的DNA的碱基组成。结果显示：A=T；G=C；A+C=G+T；A+G=C+T，结果说明：A与T；G与C配对。9．在闭合状态下增加或减少螺旋所产生的张力使分子发生的扭曲称为超螺旋。10．不是逐个测定DNA核苷酸序列，而是把DNA变成一端固定，在不同碱基的核苷酸处打断的四套末端标记的DNA片段。每套DNA片段打断的位置位于一种特异碱基。11．在适量模板，引物，4种dNTP,TaqDNA聚合酶,Mg2+的存在条件下，经过变性、退火、延伸三步为一循环的DNA扩增过程。五、问答题1．（1）（2.5×107/650）×0.34=13µm(2)650/0.34=1.9×106/µm(3)92×0.34=31.28nm(4)104×3×0.34=106nm(5)(96000/110)×3×320=837818(6)(17-15)×1000/0.34=5880bp2．略3．(1)阳离子可以中和DNA中带负电荷的磷酸基团，减弱DNA链间的静电作用，促进两条互补的多核苷酸链的相互靠近，从而促进DNA的复性。温度升高开始DNA变性，因此温度降低到熔点以下可以促进DNA的复性。DNA链的浓度增加可以加快互补链随机碰撞的速度，从而促进DNA的复性。4．原理变性：通过加热使双链DNA变成单链DNA退火：温度突然降低引物与模板链局部形成杂交链⑶延伸：在DNA聚合酶的作用下进行DNA链延伸