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ICS65.020.20CCSB黑龙DB2301江省哈尔滨市地方标准DB1/T93—2021哈尔滨市市场监督管理局发布前言请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。由中国科学院东北地理与农业生态研究所农业技术中心提出。大豆根瘤菌菌株分离与纯化高效大豆根瘤菌菌株筛选技术规程于哈尔滨市田间高效大豆根瘤菌菌株筛选。用文件GB5环境空气质量标准GB15618土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准(试行)GB287农用微生物菌剂NY410根瘤菌肥料NY/T1536微生物肥料田间试验技术规程及肥效评价指南NY/T1735根瘤菌生产菌株质量评价技术规范SNT微生物菌种常规保藏技术规程义文件。豆根瘤菌获得大豆品种选择大豆根瘤采集净后，选取4至6个新鲜的颗粒饱满、深红色的大根瘤(带部分根)从根部分离。菌田间验证将采集的根瘤用0.1%升汞溶液表面灭菌3min，无菌水冲洗8次~10次。在无菌条件下，用镊子将d7d，将长出的单菌落采用划线培养法分离。根瘤菌琼脂培养基配方应符合NY410中的规定。大豆根瘤菌菌株确定接种液浸泡1min~2min，然后移植到试管根瘤菌琼脂斜面上。设不接种的阴性对照和接种已知菌的阳试验没有污染，在10-5稀释度中70%植株结有效瘤，用刀片将根瘤切开，若根瘤内部为粉红色、红色或色为有效根瘤，白色或绿色为无效根瘤，即确定接种菌为大豆根瘤菌菌株。大豆根瘤菌菌株保存栽根瘤菌复筛试验准备菌2次，每次121℃1h，然后置于阴凉通风处2d~3d。盆钵用5%次氯盆栽实施和管理证(待测根瘤菌接种)：将已表面灭菌的大豆种子在待测根瘤菌接种液中浸泡1min~2min，移植到灭菌~2株大豆，不施肥或只施无氮营养液。大豆根瘤菌与大豆品种的共生匹配性和固氮能力检测菌。计备地准备设置保护行、试验地区划(小区、重复间尽量保持一致)；小区单灌单排；测定土壤的有机质、全氮、、速效钾、pH等基本理化性质。菌菌株接种液准备品种准备

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