医疗器械生物学检验学习

医疗器械生物学检验学习第1页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB8368(9)-2005、GB18458.3-2005生物学要求

GB8369-2005和GB18458.3-2005生物学要求与GB8368－2005完全一致。采用GB/T14233.2－2005方法。第2页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB8368-2005生物学要求与GB8368-1998的差异性：

1.

“8.2无菌”规定输液器应经过确认过的灭菌过程。（无菌试验不再适宜作为出厂检验）

2.

“8.5”由“急性全身毒性”改为“毒性”，涵盖“细胞毒性、致敏、皮内反应、急性全身毒性、血液相容性”等多项生物学试验。第3页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB8368-2005

8生物要求8.1总则输液器按附录C.2给出的指南进行生物相容性评价。

根据GB/T16886.1-2001，输液器分类为与血路间接短期接触的外部接入器械。应根据GB/T16886.1要求进行生物学评价。第4页，共30页，2023年，2月20日，星期三8.2无菌（无菌保证水平10-6）一、灭菌过程确认：根据输液器灭菌方式，按GB18278（蒸汽）、GB18279（环氧乙烷）或GB18280（辐射）规定进行。二、无菌试验：（无菌保证水平10-2）

1.不适宜作为出厂检验，仅适用于检验机构。

2.GB/T14233.2-2005采用2005年版中国药典方法，培养周期改为14天。第5页，共30页，2023年，2月20日，星期三8.3热原包括两项试验：热原试验（家兔法，检验材料致热性）、细菌内毒素试验（检验生产过程微生物污染情况）；细菌内毒素试验用于常规检验，细菌内毒素限量改为每套输液器不超过20EU。（GB8368-1998规定小于5EU/套，家兔法为仲裁法）。第6页，共30页，2023年，2月20日，星期三

与1998版输液器标准相比，试验方法和判定指标均未变。

按GB/T14233.2-2005规定方法检验，溶血率应小于5％。

8.4溶血第7页，共30页，2023年，2月20日，星期三8.5毒性

根据GB/T16886.1-2001,输液器应考虑的生物学评价项目包括：细胞毒性、致敏、皮内反应、急性全身毒性、血液相容性。根据GB/T16886.4-2003，输液器血液相容性包括“凝血、血小板”方面评价。第8页，共30页，2023年，2月20日，星期三按GB/T14233.2-2005规定方法，输液器毒性要求判定指标：1.细胞毒性：浸提液法，应不大于2级2.致敏：最大剂量法，应无致敏反应3.皮内反应：应无皮内刺激反应4.急性全身毒性：应无急性全身毒性反应5.血液相容性：凝血和血小板试验与阴性对照品相比无明显差异。注：阴性对照品系指同类型已经临床认可的器械。第9页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T16886.1-2001中第3章规定了医疗器械生物学评价基本原则：3.7在下列任一情况下，应考虑对材料或最终产品重新进行生物学评价：

a)制造产品所用材料来源或技术条件改变时；

b)产品配方、工艺、初级包装或灭菌改变时；

c)贮存期内最终产品中的任何变化；

d)产品用途改变时；

e)有迹象表明产品用于人体时会产生不良作用。第10页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T14233.2-2005

内容简介与1993年版的主要差异性：与GB/T16886系列标准具有方法学等同性。针对输液（血）器具生物学评价需求增加了亚急性（亚慢性）全身毒性和血液/器械相互作用试验。

注：ISO10993-1:2003中增加了需进行亚急性（亚慢性）全身毒性评价的器械种类。第11页，共30页，2023年，2月20日，星期三

ISO10993-1:2003中规定需进行亚急性（亚慢性）全身毒性评价的器械种类：1.表面器械：与粘膜和损伤表面持久接触（超过30日）的器械。2.外部接入器械：与组织和循环血液接触≥24小时以上的器械。3.植入器械：与组织接触≥24小时以上、与血液接触的器械。第12页，共30页，2023年，2月20日，星期三与1993年版的主要差异性：2.正文中取消了合格判定指标。注：产品标准引用时注意规定判定指标。第13页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T14233.2-2005简介：无菌、热原、细菌内毒素试验：直接引用中国药典方法，并针对输液（血）器具特性增加了供试液制备等相应内容。2.急性全身毒性试验：增加了植物油浸提液腹腔注射，与当前国际通用急性全身毒性试验方法一致。3.溶血试验：增加了对低密度材料或其他不适宜采用称重取样的器械的取样量要求。第14页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T14233.2-2005简介：4.细胞毒性试验：有较大改动。针对输液（血）器具特性，对GB/T16886.5中规定的浸提液法进行了细化规定。毒性分级与当前国际上各实验室一致。2.致敏试验：有较大改动。对GB/T16886.10中规定的最大剂量致敏试验进行了细化规定。3.皮内反应试验：有较大改动。对GB/T16886.10中规定的方法进行了细化规定。第15页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T14233.2-2005简介：5.植入试验：对GB/T16886.6中规定的皮下和肌肉植入方法进行了细化规定，仅适用于非降解聚合物材料。可设计为同时进行亚急性（亚慢性和慢性）全身毒性试验。注：ISO10993-1:2003推荐扩展型试验方案，如在一扩展型方案中将致敏、刺激和皮内反应试验结合，或将急性、亚急性（亚慢性或慢性）全身毒性和植入试验结合起来。第16页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T14233.2-2005简介：6.亚急性（亚慢性）全身毒性试验：新增试验。依据最新ISO10993-11草案稿设计，可结合植入试验进行，延长接触期可评价慢性全身毒性作用。试验接触期：亚急性毒性为14天〜28天，静脉注射时小于14天；亚慢性毒性为90天（不超过动物寿命的10％），静脉注射时为14天〜28天；慢性毒性一般为6个月〜12个月。注：因不是成熟的规范性方法，作为资料性附录给出。第17页，共30页，2023年，2月20日，星期三GB/T14233.2-2005简介：7.与血液/器械相互作用试验：新增试验，对GB/T16886.4中规定的方法进行了细化规定。包括4类6项试验：①血栓形成：半体内试验；②凝血：体外试验，包括全血凝固时间、PTT试验；③血小板：体外试验，包括血小板聚集、血小板粘附试验；④补体激活：体外试验。注：因不是成熟的规范性方法，作为资料性附录给出。第18页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例

(仅供参考）1.无菌：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，应无菌生长。2.热原：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，应无热原。第19页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例3.细菌内毒素：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，每套产品细菌内毒素限量应小于20EU。或：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，每套产品内腔注入浸提介质40mL，细菌内毒素限量应小于0.5EU/mL。注：细菌内毒素限值在产品标准中规定，宜尽可能低。推荐输液、输血、注射器具细菌内毒素限量每件不超过20EU，与脑脊液接触和胸内应用医疗器械每件不超过2.15EU。

第20页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例4.急性全身毒性：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，应无急性全身毒性。5.溶血：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，溶血率应小于5％。6.细胞毒性：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，细胞毒性应不大于2级。第21页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例7.致敏：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，应无致敏反应。8.皮内反应：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，应无皮内刺激反应。9.植入：按GB/T14233.2-2005规定的肌肉植入方法试验，植入4周炎性反应不大于Ⅲ级，纤维囊腔形成不大于Ⅱ级。第22页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例10.亚急性全身毒性：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，采用大白鼠静脉注射12d，设定单剂量组，采用按GB/T16886.12要求制备的剂量浓度。试验期间每日观察动物一般状况，试验终结时进行临床病理学检查（血液学、肝、肾功能）和组织病理学检查（肝、肾）。分析评价供试品组与对照组动物的反应，应无毒性反应。或：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，采用大白鼠皮下植入28d，试验期间每日观察动物一般状况，试验终结时进行临床病理学检查（血液学、肝、肾功能）和组织病理学检查（肝、肾）。分析评价供试品组与对照组动物的反应，应无毒性反应。第23页，共30页，2023年，2月20日，星期三11.亚慢性全身毒性：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，采用大白鼠腹腔注射90d，设定单剂量组，采用按GB/T16886.12要求制备的剂量浓度。试验期间每日观察动物一般状况，试验终结时进行临床病理学检查（血液学、肝、肾功能）和组织病理学检查（肝、肾）。分析评价供试品组与对照组动物的反应，应无毒性反应。或：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，采用家兔肌肉植入90d，试验期间每日观察动物一般状况，试验终结时进行临床病理学检查（血液学、肝、肾功能）和组织病理学检查（肝、肾）。分析评价供试品组与对照组动物的反应，应无毒性反应。产品标准中引用示例第24页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例12.体内静脉血栓形成：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，采用两只成年犬，试验样品和对准品在犬静脉内留置6h后取样观察。分析评价试验样品与对照品血栓形成情况，两者应无明显差异。（或：试验样品血栓形成应不大于2级）13.全血凝固时间：按GB/T14233.2-2005规定的“试管法”试验，试验样品组凝血时间与对照组应无明显差异。第25页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例14.部分凝血激活酶时间（PTT）：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，分析比较试验样品与阴性对照品平均凝血时间，两者应无明显差异。（或：试验样品平均凝血时间应不小于空白对照的50％）第26页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例15.体外自发性血小板聚集：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，分析比较试验样品与阴性对照品血小板聚集率，两者应无明显差异。（或：试验样品血小板聚集率应不大于X％）第27页，共30页，2023年，2月20日，星期三产品标准中引用示例16.血小板粘附：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，分析比较试验样品与阴性对照品血小板粘附率，两者应无明显差异。（或：试验样品血小板粘附率应不大于X％）17.补体激活：按GB/T14233.2-2005规定方法试验，分析比较试验样品C3a浓度与各对照品之间的差异，试验样品C3a浓度应不大于XXXXXng/mL。第28页，共30页，2023年，2月20日，星期三

以上引用示例仅供参考，在确定试验步骤和判定指标时注意：根据产品特性：如细菌内毒素限量要根据器械的接触部位来确定；亚急性（亚慢性）全身毒性试验中的剂量浓度、接触途径、检查项目等需具体分析确定。2.在验证和与阴性对准品比较的基础上：血液相容性评价需在验证和与临床认可或经确认过的器械（材料）进行比