细菌形态与结构观察

学习要求1、初步了解病原生物学和免疫学实验技术的概念和内容；2、熟悉病原生物学实验室的注意事项；3、掌握显微镜的使用和保护方法；4、掌握细菌的基本形态和特殊结构；5、掌握细菌的革兰染色法；6、了解细菌的运动特点。4/4/20231第一页，共45页。介绍实验室有关的内容

1、总论微生物实验寄生虫实验免疫学技术2、实验室注意事项评分标准清洁卫生操作规程显微镜管理等4/4/20232第二页，共45页。实验内容1、显微镜使用和保护（录像）2、细菌的镜下形态观察（学生操作）3、细菌的特殊结构（学生操作）4、革兰染色（学生操作）5、细菌的动力观察录像（教师示教）4/4/20233第三页，共45页。4/4/20234第四页，共45页。实验小结1、显微镜油镜的使用和保护2、细菌的基本形态①球菌②杆菌③螺形菌

3、细菌的特殊结构①荚膜②鞭毛③芽胞④菌毛4、细菌的革兰染色法5、注意事项：评分、卫生、操作、管理。4/4/20235第五页，共45页。end4/4/20236第六页，共45页。细菌的基本形态观察(发片)1、球菌镜下形态：①葡萄球菌②链球菌③肺炎链球菌④脑炎奈瑟菌2、杆菌镜下形态：①大肠埃希菌②破伤风梭菌③产气荚膜梭菌④变形杆菌3、螺形菌革兰染色片：

霍乱弧菌或水弧菌

4/4/20237第七页，共45页。细菌的特殊结构(示教片)1．肺炎球菌荚膜染色示教片（示荚膜）2．变形杆菌鞭毛染色示教片（示鞭毛）3．破伤风梭菌芽胞染色或革兰染色示教片（示芽胞）4/4/20238第八页，共45页。

细菌的革兰染色革兰染色法是细菌检验中最常用的一种染色法。利用革兰染色法，可将细菌分为两大类，有助于鉴别细菌和选择用药等。1、革兰染色法原理

2、革兰染色法操作步骤3、革兰染色结果通过革兰染色可以观察到什么？细菌的形态、排列、荚膜、芽胞4/4/20239第九页，共45页。革兰阴性菌因其细胞壁中肽聚糖含量少，结构疏松，脂类物质含量高而被酒精脱色，经复染呈红色。革兰染色原理：革兰阳性菌因细胞壁中含有大量的肽聚糖和磷壁酸，且结构致密，可保留结晶紫与碘的复合物，并不被酒精脱色而显示为紫蓝色。4/4/202310第十页，共45页。

革兰染色方法(录像）

涂片自然干燥火焰固定染色染色过程：

已固定的涂片加结晶紫1分钟，水冲洗滴加碘液1分钟，水冲洗95%酒精20~30秒稀释石炭酸复红1分钟，水冲洗待干镜检初染媒染脱色复染一般用室温干燥，注意必须完全干燥后方可固定。涂片在酒精灯火焰上快速通过3～4次以固定细菌，并使其不易从玻片上脱落。注意不要将涂片直接放在火焰上烤，以免破坏细菌结构。

4/4/202311第十一页，共45页。

用灭菌的接种环取无菌生理盐水1-2环，置于玻片中。接种环灭菌，待接种环冷却后，挑取适量培养物混合于盐水中，涂抹均匀使成一层薄膜（若检材是液体则不必加生理盐水）薄膜涂抹的面积约1.5×2.0cm。按上法制备大肠杆菌涂膜。4/4/202312第十二页，共45页。4/4/202313第十三页，共45页。葡萄球菌（革兰染色）4/4/202314第十四页，共45页。葡萄球菌（革兰染色）4/4/202315第十五页，共45页。葡萄球菌电镜照片4/4/202316第十六页，共45页。链球菌（革兰染色）4/4/202317第十七页，共45页。链球菌（革兰染色）4/4/202318第十八页，共45页。链球菌电镜照片4/4/202319第十九页，共45页。奈瑟菌（革兰染色）4/4/202320第二十页，共45页。双球菌（革兰染色）4/4/202321第二十一页，共45页。双球菌电镜照片4/4/202322第二十二页，共45页。大肠埃希菌（革兰染色）4/4/202323第二十三页，共45页。大肠埃希菌（革兰染色）4/4/202324第二十四页，共45页。大肠埃希菌电镜照片4/4/202325第二十五页，共45页。霍乱弧菌（革兰染色）霍乱弧菌电镜照片4/4/202326第二十六页，共45页。荚膜荚膜4/4/202327第二十七页，共45页。荚膜4/4/202328第二十八页，共45页。荚膜4/4/202329第二十九页，共45页。变形杆菌鞭毛染色（示鞭毛）

4/4/202330第三十页，共45页。变形杆菌鞭毛电镜照片（示鞭毛）

4/4/202331第三十一页，共45页。破伤风梭菌（示芽胞）革兰染色和芽胞染色4/4/202332第三十二页，共45页。破伤风梭菌芽胞染色（示芽胞）

4/4/202333第三十三页，共45页。破伤风梭菌革兰染色（示芽胞）

4/4/202334第三十四页，共45页。破伤风梭菌芽胞电镜照片（示芽胞）

4/4/202335第三十五页，共45页。产气荚膜梭菌革兰染色（示荚膜）4/4/202336第三十六页，共45页。4/4/202337第三十七页，共45页。4/4/202338第三十八页，共45页。4/4/202339第三十九页，共45页。4/4/202340第四十页，共45页。霍乱弧菌（革兰染色）霍乱弧菌电镜照片4/4/202341第四十一页，共45页。4/4/202342第四十二页，共45页。4/4/202343第四十三页，共45页。4/4/202344第四十四页，共45页。1、实验时不迟到、不早退。2、实验时要保持实验室内的整洁、安静。3、正确使用显微镜，观察完毕应把镜头和载玻片上的镜油擦净。

4、各实验小组的实验用品、由各组保管使用，不得随意与他组调换或挪用。如需补发或增添，应说明原因。5、每次实验后应清点实验器材、用品数量，如有遗失或损坏应按规定赔偿。动物及标本要按规定处理，不可擅自拿走。6、实验结束后，各组应自觉清理实验器材，值日生做好全室清洁工作，关好门窗、水电，经指导教师检查合格后方可离开实验室。

1、要按时完成实验报告。2、实验报告要保证准确、工整、美观。3、实验课结束要将实验报告交病原生物学实验室评分存档。

1、操作考