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文档简介
第二节柠檬酸生产工艺重点:柠檬酸生物合成途径;柠檬酸生物合成的代谢调节;三羧酸循环的调节。难点:柠檬酸生物合成的代谢调节;糖酵解及丙酮酸代谢的调节。一、柠檬酸发酵生产工艺(一)柠檬酸合成途径柠檬酸又名枸橼酸,学名α-羟基丙烷三羧酸,是生物体主要代谢产物之一。
柠檬酸合成途径:丙乙酰COA葡萄糖酮→柠檬酸酸草酰乙酸氧化脱羧羧化EMP(二)柠檬酸生物合成的代谢调节2、柠檬酸生物合成代谢调节的特点:1)TCA环的起始酶:柠檬酸合成酶是一种调节酶。但在黑曲霉中,柠檬酸合成酶没有调节作用,这是黑曲霉TCA环的第一个特点。2)第二个特点:黑曲霉菌体内α-酮戊二酸脱氢酶缺失或活力很低(TCA环被阻断)。3)氧和pH值对柠檬酸发酵的影响很大。(二)柠檬酸生物合成的代谢调节3、柠檬酸积累的原因:①Mn2+缺乏→抑制蛋白合成→NH4↑有一条呼吸活动强的不产生ATP的侧呼吸链;②由于丙酮酸羧化酶是组成型酶,不被调节控制。丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA和CO2的固定两个反应的平衡,以及柠檬酸合成酶不被调节,增强了合成柠檬酸的能力。③由于顺乌头酸水合酶在催化时建立了以下平衡:柠檬酸:顺乌头酸:异柠檬酸=90:3:7同时控制Fe2+含量时,顺乌头酸酶活力降低,使柠檬酸积累。④随着柠檬酸积累,pH降低到一定程度时,使顺乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶失活,更有利于柠檬酸的积累及排出细胞外。(三)柠檬酸发酵生产工艺(三)柠檬酸发酵生产工艺3、种子罐培养:培养基:玉米淀粉水解糖+淀粉水解滤渣;空消:种子罐、分过滤器,130℃,30分;实消:列管加热至80℃,直接进蒸汽至125℃,15-20分;接种:冷却至35±1℃,接麸曲种1‰;培养:35±1℃,罐压:0.1Mpa,风量:1:0.1-0.16,时间16-30小时。(三)柠檬酸发酵生产工艺4、发酵:培养基:玉米淀粉水解糖;空消:发酵罐、分过滤器,130℃,30分;实消:列管加热至80℃,直接进蒸汽至125℃,15-20分;接种:冷却至35±1℃,接种子罐菌种10%;培养:温度:35±1℃,罐压:0.1Mpa,风量:1:0.1-0.15,时间:50-60小时。二、柠檬酸提取生产工艺1、发酵液过滤:带式过滤机2、中和:滤液中除含柠檬酸外,还含可溶性的残糖以及蛋白质、金属离子等杂质。利用柠檬酸钙难溶于水的特点,与杂质分
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