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文档简介

双向免疫扩散试验纯度检测方法二：一实验目的学习双向免疫扩散实验原理掌握双向免疫扩散实验操作方法基本概念抗原：抗原（antigenicity）是指能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。抗体：抗体(antibody)指机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。图1双向免疫琼脂扩散孔型○○○○

○

○○○

○

○○○○○三孔型双孔型梅花孔型双排孔型三试剂与器材1.缓冲液：4.65gTris加水溶解，加115ml0.1MHCl，最后补水至1000ml，pH为8.2。2.凝胶液：5g琼脂糖加500ml上述缓冲液，微波炉加热煮沸溶解。注意用中小火，以免暴沸。3.待测样品：I号峰、II号峰、III号峰4.羊抗人IgG抗体、羊抗人LDL抗体、羊抗人apoA-I抗体。5.生化培养箱、微波炉、刻度吸管、培养皿、下口径2mm滴管等四操作步骤

1.制板：用移液管吸取热琼脂20ml，平铺于直径9cm培养皿中。2.打孔：待琼脂凝固后，按图1梅花孔型打孔，孔径2mm,孔与孔距离3-4mm。用针挑去孔内琼脂。3.用微量加样器将羊抗人IgG抗体、羊抗人LDL抗体及羊抗人apoA-I抗体各5-10ul加入周边孔中，中间孔加不同峰的液体。4.将培养皿置于生化培养箱内，于37℃温育，隔天观察结果。六复习

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