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文档简介

实验十醋酸纤维薄膜电泳血清白蛋白分析第1页/共19页实验十、醋酸纤维薄膜电泳－－

血清蛋白分析和

人体动脉血压的测定第2页/共19页一、目的和要求

１、了解电泳的原理，掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作２、学习动脉血压的原理，测定收缩压与舒张压第3页/共19页二、实验原理

（一）电泳

在外界电场的作用下，生物大分子从电极一侧向另一侧移动的现象

1、蛋白质

由氨基酸通过肽键连接而成第4页/共19页第5页/共19页2、等电点(isoelectricpoint,pI)

在一定的pH条件下，当其正、负电荷数相等时，整体便失去了所有电荷，这时的pH称为等电点（pI）。氨基酸在等电点时电泳移动速度为零在碱性环境中，蛋白分子负电阳极在酸性环境中，蛋白分子正电阴极第6页/共19页3、醋酸纤维素薄膜

(CelluloseAcetateMembranes)

采用醋酸纤维素为支持物的电泳方法叫醋酸纤维薄膜电泳，具有很高的流速和热稳定性以及非常低的吸附，将其溶于丙酮等有机溶剂中，即可涂布成均一细密的微孔薄膜第7页/共19页第8页/共19页4、血清蛋白电泳

将抽取的血液置入不加抗凝剂的试管中，使血凝固后，析出的上清液就是血清。血清中主要含白蛋白、球蛋白。第9页/共19页

血清蛋白电泳是一种临床化验检查项目。由于蛋白的绝大部分均由肝脏合成，所以，各种蛋白质的质与量的变化，除与免疫性疾病等有关外，主要反映肝脏的生理、病理情况第10页/共19页

血清中各种蛋白质的等电点均低于pH7.0，在pH8.6的缓冲液中带负电，向正极移动，分子小且带电荷多者，则移动速度较快第11页/共19页pI%球蛋白6.86~7.312~20球蛋白5.126.5~122球蛋白5.064~91球蛋白5.062~5清蛋白4.6457~72第12页/共19页（二）血压测定

1、血压

是指血管内的血液对于单位面积血管壁的侧压，目前采用千帕(KPa)为单位。以前采用mmHg表示。收缩压：收缩期动脉血压的最高值(高压)

舒张压：舒张期动脉血压的最低值(低压)

第13页/共19页2、血压测定方法此次实验采用Korotkoff氏听诊法正常的收缩压/舒张压(mmHg)

收缩压:<130mmHg

舒张压:<85mmHg第14页/共19页无光泽面座位号1.50.5三、实验方法（一）电泳

1、薄膜的使用

在毛（无光泽）面划线，并写上座位号（如右图）

2、浸润第15页/共19页3、点样

（毛细管，一根，放回）4、电泳

点样面朝下点样端置于负极5、染色

染色10min6、漂洗脱色各5min（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）最后，水洗第16页/共19页（二）侧血压

1、血压计的构造：减压计、袖带、气球

2、安静时收缩压/舒张压（

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