多靶点细胞技术2014(八)

癌症治疗的两大难题：复发和转移安全：毒副反应机理：肿瘤的免疫逃逸,

机体的免疫耐受疗效：

手术后病人：预防肿瘤的复发转移

无法手术的病人:肿瘤的缩小，疾病的缓解

晚期肿瘤患者：提高生活质量第一页，共30页。癌症疗法的未来——NEJM“TwoHundredYearsofCancerResearch”(2012SARosenberg)-Cancertreatmentplatformsitsonfourlegs:Surgery,chemotherapy,radiotherapyandimmunotherapy.局部治疗系统性的治疗非靶向放疗化疗靶向手术免疫疗法癌症的四种形式第二页，共30页。Science2013(342)

20DECEMBER

1432-1433肿瘤免疫治疗：2013年度首要突破第三页，共30页。

“Inlarge,long-livedanimals,likemostofthewarm-bloodedvertebrates,inheritablegeneticchangesmustbecommoninsomaticcellsandaproportionofthesechangeswillrepresentasteptowardmalignancy.Itisanevolutionarynecessitythatthereshouldbesomemechanismforeliminatingorinactivatingsuchpotentiallydangerousmutantcellsanditispostulatedthatthismechanismisofimmunologicalcharacter.”——SirFrankMacfarlaneBurnet诺贝尔生理学或医学奖1960肿瘤免疫治疗理论—“免疫监视”理论(ImmuneSurveillanceTheory)“肿瘤免疫编辑”(TumorImmunoediting）

Elimination:免疫消除Equilibrium:免疫平衡Escape:免疫逃逸发病时健康时第四页，共30页。肿瘤的免疫治疗分类靶点阻断剂免疫刺激剂过继细胞治疗DC疫苗

2010年4月,美国FDA批准

DCProvenge®(sipuleucel-T)用于治疗前列腺癌第五页，共30页。免疫细胞治疗技术简称中文全称CIK细胞因子诱导的杀伤细胞TIL肿瘤浸润淋巴细胞DC树突状细胞DC-CTL树突状细胞-杀伤性T淋巴细胞CART嵌合抗原受体的T淋巴细胞第四种肿瘤治疗模式将患者自体的免疫细胞在体外培养、活化、扩增，再回输入患者体

内进行治疗的一种生物治疗技术。自体免疫细胞治疗技术种类采血分离刺激体外培养收集回输回输液制备细胞因子及抗原肿瘤患者第六页，共30页。DC递呈抗原树突状细胞（DC）初始型T细胞细胞毒性T细胞（CTL）肿瘤细胞

肿瘤获得性免疫的基本原理CTL的抑制肿瘤细胞杀伤CTL激活第七页，共30页。DC是人体最强大的抗原递呈细胞，能够直接摄取、加工和呈递抗原，刺激体内的初始型T细胞活化，是机体特异性免疫应答的“启动者”。什么是DC?肿瘤细胞识别与杀伤抗原加工递呈

CTL激活第八页，共30页。第一信号第二信号第三信号1.抗原蛋白被剪切成短肽2.与MHC分子形成复合物递呈3.三级信号：MHC-肽复合物、共刺激分子、细胞因子MHC-肽复合物T细胞受体CTL细胞激活的分子机制第九页，共30页。多靶点抗原肽自体免疫细胞治疗技术MultipleAntigensSpecificCellTherapy

多抗原负载促成熟皮下注射采集DC前体未成熟DCDC+淋巴细胞共培养静脉回输CTL诱导成熟DCCTL激活多靶点抗原肽避免肿瘤免疫逃避序贯回输打破机体免疫耐受第十页，共30页。多靶点组合抗原的优势激活针对不同抗原靶点的特异性T淋巴细胞1）增强CTL对肿瘤细胞的杀伤力度2）减少肿瘤细胞发生免疫逃避的可能第十一页，共30页。0天8天14天21天左右DC细胞诱导采血约100-150ml或单采DC、淋巴细胞混合，CTL诱导DC皮下注射，体内诱导特异性CTLCTL静脉回输，体外诱导特异性CTL序贯回输治疗第十二页，共30页。肿瘤的潜伏期长达10年以上癌细胞反复进行分裂，约30次后大小约0.7cm时，初次被影像学识别为“癌症”；早期癌症被发现时的大小约是1cm，重量约是1g，其中癌细胞的个数约是10亿个；据统计，肿瘤发展到临床诊断，所经过的时间约为10年，这期间是防治的黄金时间。第十三页，共30页。45岁进入了肿瘤发病高峰，且肿瘤风险随年龄增加呈几何倍数上升65岁的老年人患肿瘤的几率是25岁年轻人的50多倍40岁后肿瘤发病率逐年增长第十四页，共30页。DC疫苗的临床研究与应用美国FDA批准

DCProvenge®(sipuleucel-T)用于治疗前列腺癌-2010年第十五页，共30页。临床试验计划--前瞻性、多中心、随机、对照、大样本1、题目：多靶点抗原肽自体免疫细胞（DC／CTL）治疗肿瘤的前瞻性、多中心、随机、对照、大样本临床研究2、目的：①安全性和有效性的验证,②为临床应用提供循证医学的证据3、时间：3-5年4、病种：10-15个病种5、设计：多中心、随机、对照、大样本6、例数：100-300例/病种；1000-3000例７、分批

进行：第1批：肝癌、肺癌、大肠癌、宫颈癌、白血病、肾癌第2批：乳腺癌、胰腺癌、胃癌、食管癌、卵巢癌第3批：脑癌、肺癌、白血病......第十六页，共30页。试验多中心、随机、平行对照、开放性研究受试者100例根治性切除术或射频消融后的原发性肝细胞癌患者分组按照1:1的比例随机分配入组，每组各50例HCC治疗临床试验

主要终点指标:1）术后受试者HCC复发或转移率2）至复发或转移时间（TTR)

次要终点指标:1）

HBeAg的血清学转换或HBsAg的变化2）血清HBVDNA病毒载量的变化3）生活质量变化研究中心：南方医科大学南方医院肝病中心中山大学附属肿瘤医院生物治疗中心中山大学第三附属医院第十七页，共30页。ClinicalTIdentifier:NCT02026362第十八页，共30页。案例分析

周某，男，36岁诊断：原发性肝癌确认日期：2013-1-24BCLC分期：ATNM分期：Tis，N0，M0病理诊断：无第十九页，共30页。既往治疗：

TACE，时间：2013-1-29；2013-3-8是否放疗：否手术名称：消融术，时间：2013-4-27联合治疗

口服拉米夫定，时间：2013-1-25起至现在DC-T治疗第1次治疗：;第2次治疗：第3次治疗：;第4次治疗：第二十页，共30页。安全性分析：

治疗期间（13-5-1、7-17、9-14、11-21）检查血常规、尿常规、血生化等基本无异常，回输后无任何不良反应。

疗效性分析：患者在其它治疗结束后，持续细胞治疗，出现影像学（CT）

变化，肿瘤持续缩小

2013-4-26（最后1次介入前），肝右叶占位缩小，9.4*7.5CM

2013-6-6（第1次细胞治疗前），肝右叶占位缩小，8.1*7.2CM

2013-7-18（第2次治疗前），肝右叶占位缩小，7.8*5.6CM

2013-9-18（第3次治疗后），肝右叶占位缩小，

7.6*5.5cm2013-11-21（第3次治疗后复查），肝右叶占位缩小，7.5cm*5.5cm，2014-01-18

（第4次治疗后），肝右叶占位缩小，7.4cm*5.6cm，第二十一页，共30页。案例分析

娄某，女，51岁诊断：宫颈癌（2006-6）入院诊断：2012-2宫颈癌伴全身转移TNM分期：Tis，NK，NK病理诊断：无第二十二页，共30页。既往治疗：

手术名称：未知是否化疗：是，化疗时间：5次化疗（2012-3-14,4-4,4-25,5-16,6-7）是否放疗：否其它治疗：无联合治疗：无SMART治疗:8次

治疗时间：2012-6-14,7-18,9-17,10-23,11-21,12-202013-2-21,4-11第二十三页，共30页。安全性分析：

治疗期间（12-6-5,7-18,9-17,11-21,13-1-24,2-21,4-13）检查血常规、尿常规、血生化等基本无异常，回输后无任何不良反应。

疗效性分析：患者在无其它有效治疗手段后，接受8个疗程细胞治疗后，生活

质量得到显著改善。接受细胞治疗前：患者在5个周期的化疗后，全身状态差，恶病质、轻度腹水

只能卧床，医生判断预计生存期不到3个月。接受细胞治疗后：在接受3次细胞治疗后，患者全身状态明显得到改善，并能

起床，在接受5个治疗后，腹水消失

，已能正常生活并外出

旅行，生活质量显著提高。

第二十四页，共30页。80年代晚期发现CTLA-41996年CTLA-4抗体出现1999年CTLA-4抗体成为药物2010年

使用CTLA-4抗体的黑色素瘤患者平均多活4个月，近1/4患者存活至少超过两年2011年FDA批准了CTLA-4抗体90年代早期发现PD-12008年39位病人，5种不同肿瘤，5位患者症状减轻，肿瘤减小；有几位患者存活期超乎想象2012年300位PD-1治疗，31%黑色素瘤，29%肾癌，17%肺癌的患者肿瘤有减小2013年6月

CTLA-4抗体与PD-1抗体合用，在1/3黑色素瘤患者中更好更快消灭肿瘤CTL抑制的研究CTL的抑制第二十五页，共30页。国际交流与合作国际会议时间会议名称地点2011年国际细胞治疗协会（ISCT）2012年国际细胞治疗协会（ISCT）美国2013年国际细胞治疗协会（ISCT）新西兰2013年冷泉港亚洲会议（CSHAsia）中国.苏州2013年美国基因与细胞治疗学会（ASGCT）美国2014年国际细胞治疗协会（ISCT）法国2014年美国基因与细胞治疗学会（ASGCT）美国国际合作第二十六页，共30页。首例DC产品：2010年4月美国FDA批准，Provenge®