华西医科大学组织学与胚胎学-1绪论

绪论Introduction主要内容发展史组织学与胚胎学基本规律研究方法学习方法

同步练习忠告：

你想学好这门科学吗？你先了解它的历史吧！

Lvshaowen

你要研究生命吗？你首先研究细胞吧！

MG.Schleiden一、组织胚胎学发展史

上的重大事件公元前，古希腊，亚里士多德（Aristotle)最早对胚胎发育进行唯物的观察，改变了神造万物的迷信观。1590，荷兰，Hans父子发明了显微镜（10倍）。1609，意大利，伽利略（Galileo)发明望远镜。1651，英国，哈维（Harvey)及Redi观察到胚胎发育源于卵，发表了《论动物的生殖》。1661，意大利，马尔裴基（Malpighi).用放大镜观察了动、植的微细结构，发现了蛭的毛细血管和血液循环。1665，马尔裴基和英国的虎克（Hooker)

研制了新型显微镜，虎克观察软木塞，发现了“Cell”。1668，Hedi提出了“一切生命来自卵”。1672，荷兰，格拉夫（Graaf)发现卵子。

Bonnet,Malpighi等主张“卵源说”。1677，荷兰，列文胡克（Leeuwenhoek)发现精子。主张“精源说”。

Spallanzani进行了人工受精实验，揭示了胚胎始于受精卵之迷。1745，Bonnet发现蚜虫的孤雌生殖，成为“先成论”的主流。1768，德国，沃尔夫（Wollff)首次提出“胚层”的概念，发表了“渐成论”。1801，法国，比沙（Bichat)首用法文Tissu＝编织物（21种）→Tissue＝组织。1819，德国，迈尔（Mayer)创用希腊文

Histo(组织，8种）+logy＝组织学。1828，德国（爱沙尼亚），贝尔（Baer)创立了比较胚胎学，提出了胚层学说和贝尔法则。（各种动物胚胎演变、发育愈早愈相似）。1831，布朗（Brown)发现了细胞核。1838-1839，德国，施莱登（Schleiden)

和施万(Schwann，雪旺)创立了细胞学说，被誉为十九世纪三大发现之一。（守恒定律，进化论）1841，瑞士，柯立克（Kolliker)阐明精子也是一种细胞。1844，柯立克进一步认为卵也是细胞，通过分裂发育成个体。1855，德国，雷马克（Remark)提出三胚层学说。

1856，德国，魏尔啸（Virchow)提出细胞是一切疾病的基础，建立了细胞病理学。1859，英国，达尔文（Darwin)发表《物种起源》，称贝尔法则正是种与种间亲缘关系和物种进化的路线特征。1860，德国，穆勒（Mǘller)和海克尔（Haeckel)提出“重演律”。1870，德国，阿伯（Abbe)提出显微镜理论。1873，意大利，Golgi法创立（镀银显示整个神经元）。1892，德国，Nissl法创立。发现Nissl体。1903，西班牙，Cajal法创立（镀染神经纤维，胞体轴突和神经原纤维）。1906，Golgi和Cajal获诺贝尔奖。1932，德国，科诺尔（Knols)和卢斯卡（Ruska)

发明了电子显微镜。1935，德国，斯佩曼（Spemann)提出诱导学说，发展了实验胚胎学，获诺贝尔奖。1985，Knols和Ruska因发明电镜获诺贝尔奖。1986，Binnig和Rohrer因发明扫描隧道显微镜，获诺贝尔奖。1978，英国诞生了第一例“试管婴儿”，成为体外受精技术走向成熟的划时代事件。鉴于我国学者张觉民对生殖生物学的杰出贡献，当选为美国科学院院士。1997，用成体细胞核移植成功的克隆羊

“多莉”，在英国爱丁堡诞生。轰动世界。

组织←结构发生→两性细胞形成↓细胞↓器官功能受精卵↓↓系统→人体←分裂、分化组织学（Histology）

研究机体微细结构及其相关功能的科学。胚胎学（Embryology）

研究个体发生和生长及其发育机理的科学。二、组织学与胚胎学基本规律．

1.细胞

概念

细胞是机体形态结构、生理功能和生长发育的基本单位。

结构

细胞膜细胞质

Ri、RERSER、MiGo、LyMt、Mf、Mb

细胞核细胞超微结构模式图核糖体（Ri.)：合成蛋白质。粗面内质网（RER):合成蛋白质。高尔基复合体（Go.):浓缩、加工、包装。形成糖蛋白类分泌物及溶酶体。滑面内质网（SER):合成类固醇激素，参与糖、脂代谢，灭活激素，解毒，调节离子交流。

线粒体（Mi.):产生ATP，供给能量。溶酶体（Ly.):消化分解细胞内异物。微管（Mt.):参与支架，运输，变形运动。微丝（Mf.):参与支持，变形运动，胞质流动。微体（Mb.过氧化物体):氧化多种有毒物质，解毒。染色质（Chromatin):由DNA与蛋白质组成。染色体（Chromosome):细胞分裂时染色质的细丝螺旋盘曲。常染色质：分裂后子细胞染色体部分解螺旋，电子密度高。异染色质：未解螺旋的染色体。

2．细胞外基质

概念

细胞产生的非细胞物质。

组成

纤维基质体液（血浆、淋巴、组织液）

功能；①参与构成细胞生存的微环境，对细胞起支持、联系、营养、保护作用②对细胞的分化、运动、信息沟通有重要影响。3．组织

概念

细胞群和细胞外基质组成。

基本组织上皮组织结缔组织肌组织神经组织1.光学显微镜和电子显微镜技术

（1）●标本制备

LM TEM 取材

(3-5)mm3 1mm3

固定 甲醛、酒精、戊二醛、四氧化鋨、苦味酸多聚甲醛 包埋 石蜡、火棉胶树脂 切片 石蜡、超薄切片50-80nm

冰冻切片5-10μm 染色

HE 重金属电子染色 结果 嗜碱性物质-蓝色电子密度高-黑色嗜酸性物质-红色电子密度低-色浅

三、研究方法（2）●分辨率LM:0.2μm

EM:0.2nm（3）计量单位1μm=1/1000mm1nm=1/1000μm

（4）●HE染色

概念：H（Hematoxylin，苏木精）碱性染料

E（Eosin，伊红）酸性染料

原理：电耦合现象

H+→X-→盐→蓝色（胞核）=嗜碱性

E-→Y+→盐→红色（胞质）=嗜酸性

与两者亲和力都不强=中性组织或细胞内的成分被某些碱性染料染色后呈紫红色，称异染性。

●（5）重金属电子染色

概念

利用重金属（醋酸铀，柠檬酸铅）浸染超薄切片的染色方法。

正染色

当电子束→密度大，吸附重金属多的结构→电子散射多→射落到荧光屏的电子少→成暗像（黑色）称电子密度高。反之，浅染的部分称电子密度低。

负染色

若被染结构着色浅淡，而其周围部分染成黑色，则为负染色。2．组织化学和细胞化学术（1）概念

通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内某种（糖、脂、酶、核酸）化学成分，进行定位、定量及其与功能相关的研究。（2）●PAS反应

显示多糖和蛋白多糖的一种组织化学方法。

多糖+HIO4→多醛+schiff剂→紫红色↓

3.其它研究方法（1）免疫组织化学术

应用抗原抗体特异性结合的原理，检测组织、细胞内肽类、蛋白质及膜表面抗原和受体的技术。（2）原位杂交

是一种核酸分子杂交技术，根据碱基配对的原则，利用已知碱基序列的核酸探针，与待测的核酸进行特异性原位结合。对核酸进行定位定量检测。（3）放射自显影

通过活细胞对放射性物质的特异性摄入，以显示该细胞的功能状态，或该物质在组织和细胞内的代谢过程。（4）图像分析术

可定义为：从一幅图像中提取特定数据的定量处理技术。是在计算机技术、体视学理论等基础上发展起来的。

形态计量学是定量分析生物组织宏观或微观水平的二维或三维结构的科学，包括平面测量学和体视学。

平面测量学是反映二维图像特征的理论和方法，是体视学推论的基础。

体视学是研究二维与三维相互转换的理论与技术的科学。（5）细胞培养术

模拟体内条件，对细胞、组织、器官进行体外培养。研究其代谢、增殖、分化、形态和功能，以及各种理化因子对活细胞的直接影响。

（6）组织工程

利用细胞培养术，在体外模拟构建组织或器官的技术。（皮肤、软骨、骨肌腱、骨骼肌、血管和角膜等）四、学习方法

1．结构与功能2．局部与整体

3．理论与实践4．静态与动态

5．平面与立体

6.组织学研究的四个水平组织细胞细胞外基质★细胞分布形态亚细胞结构（细胞生物学）

分子功能（分子生物学）同步练习一、填空1.组织是由________和_____________构成。2．组织切片的常用染色方法为ＨＥ染色，其中Ｈ代表________，Ｅ代表_________。Ｈ可将细胞核染成________色，Ｅ可将细胞质染成_______色。

细胞细胞外基质苏木精伊红紫蓝红同步练习二、单项选择1.用光镜观察的组织切片厚度一般为（）

A.50-80nmB.50-80μmC.5-10μmD.5-10nmE.5-10mm

2.用电镜观察的组织切片厚度一般为（）

A.50-80nmB.50-80μmC.5-10μmD.5-10nmE.5-10mmCA同步练习二、单项选择3.光镜的分辨率可达（）

A.0.2nmB.0.2μmB.2nmD.2μmE.2mm4.电镜的分辨率可达（）

A.0.2nmB.0.2μmC.2nmD.2μmE.2mmBA同步练习

答案：HE染色是采用苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)对组织切片进行染色的最常用的染色方法。苏木精是一种碱性染液,将细胞核染成蓝色；配制后的伊红是一种酸性染液,将细胞质染成红色。三、名词解释:HE染色附录资料：不需要的可以自行删除2023/3/25

低氧血症

一、定义

低氧血症是指血液中含氧不足，动脉血氧分压（PaO2）低于同龄人的正常下限。主要表现为血氧分压与血氧饱和度下降。成人正常动脉血氧分压(PaO2)：80～100㎜Hg。各种原因如中枢神经系统疾患，支气管、肺病变等引起通气和（或）换气功能障碍都可导致缺氧的发生。因低氧血症程度、发生的速度和持续时间不同，对机体影响亦不同。低氧血症是呼吸科常见危重症之一，也是呼吸衰竭的重要临床表现之一。2、肺泡通气不足（限制性及阻塞性）成人静息状态下有效肺泡通气量4L/min；

限制性通气不足主要见于呼吸肌活动障碍、胸廓顺应性降低、大量胸腔积液、积气时肺扩张受限；阻塞性通气不足主要见于气管痉挛、管壁水肿或纤维化、异物、渗出物等。3、弥散功能障碍：

①肺泡膜面积减少（肺实变、肺不张、肺叶切除）；②肺泡膜厚度增加（肺泡上皮、毛细血管内皮、基底膜；肺水肿、肺纤维化、肺泡毛细血管扩张等）；③心输出量增加、肺血流增快、血液与肺泡接触时间过于缩短，导致低氧血症。44、肺泡通气/血流比例失调

、肺泡通气/血流比例失调

V/Q=0.8

部分肺泡通气不足（肺动静脉样分流、功能性分流）

部分肺泡血流不足（死腔样通气）

5、肺内动静脉解剖分流增加

提高氧浓度不能提高分流静脉血的氧分压。6、氧耗量增加：

发热、寒战、呼吸困难、抽搐等，伴有通气功能障碍。三、病理生理改变

低氧血症对机体的影响包括短期效应及长期效应。低氧血症首先兴奋呼吸中枢，增加通气量以提高PaO2；同时通过增加心率和搏出量使心输出量增加。继之，促红细胞生成素分泌增多，红细胞比容增加，从而增加血氧含量。以上效应的结果是增加机体的供氧量。PaO2降低使肺血管收缩，短期内可改善肺V/Q比值，增加氧输送，但其长期结果是使肺动脉压升高、心肌做功增加，导致肺源性心脏病的发生。低氧血症可使呼吸氧耗增加，导致慢性营养不良。四、分级

低氧血症是指动脉血氧分压（PaO2）低于正常值下限，或低于预计值10mmHg。正常人PaO2随年龄增长而逐渐降低。计算公式：

PaO2=（100-0.3×年龄）±5mmHg。轻度：PaO2›50mmHg,SaO2›80%,常无紫绀。中度:PaO230∼50mmHg,SaO260%∼80%,常有紫绀。重度：PaO2‹30mmHg,SaO2‹60%,紫绀明显。紫绀出现与否与低氧血症并不完全一致。一般来说，紫绀出现意味着中等程度以上的低氧血症，但除外：严重贫血、氰化物或一氧化碳中毒、肺心病等。低氧血症临床上常根据PaO2(mmHg)和SaO2来划分低氧血症的严重程度。五、临床表现

.正常组织器官氧合的必要条件：1、适当的PaO2以维持一定的动脉血氧饱和度2.血液中输送氧的血红蛋白的质和量3.适当的心输出量4.组织器官周围血管及微循环情况5.氧解离曲线对各系统的影响中枢神经系统：PaO2降至60mmHg，出现注意力不集中、智力和视力轻度减退；降至40-50mmHg，会引起头痛、定向与记忆力障碍，精神错乱嗜睡；低于30mmHg，神志丧失乃至昏迷；低于20mmHg，只需数分钟即可造成神经细胞不可逆性损伤。循环系统：PaO2降低、PaCO2升高，反射性心率加快、心肌收缩力增强，严重时可直接抑制心血管中枢，造成心脏活动受抑和血管扩张、血压下降和心律失常等严重后果。呼吸系统：PaO2<60mmHg，作用于颈动脉体和主动脉体的化学感受器可反射性兴奋呼吸中枢、增强呼吸运动、甚至呼吸窘迫；PaO2<30mmHg，低氧血症对呼吸中枢的抑制作用强于兴奋作用。肾脏：常合并肾功能不全，如及时治疗，肾功能可恢复。消化系统：消化不良、胃黏膜糜烂、坏死、溃疡、出血、肝脏转氨酶升高。酸碱平衡和电解质：乳酸增多、代谢性酸中毒、高钾血症等。六、诊断和鉴别诊断

目前仍以动脉血气分析为主肺功能检测及胸部影像学检查鉴别诊断低氧血症、缺氧和氧供不足，这三个概念很多人混为一谈，明确这些概念对于我们的临床工作大有裨益。低氧血症是指循环系统中的氧分压低于正常，定义为PaO2低于60mmHg，PaO2是判断有无低氧血症的唯一指标。

缺氧是指因氧供减少、耗氧增加或利用氧障碍引起细胞发生代谢功能和形态结构异常变化的病理过程。缺氧的诊断却比较困难。缺氧时线粒体不能进行有氧氧化，而进行无氧酵解。由于无氧酵解产生大量乳酸，因此血液中乳酸的含量是判断有无缺氧的重要指标，血乳酸浓度超过1.5mmol/L即为缺氧。但是，不是所有的缺氧都存在血液中乳酸浓度升高，如在低血容量休克早期组织存在缺氧，但由于血管收缩，组织中产生的乳酸聚集在局部组织中而未进入循环系统，血液中的乳酸可不升高；同样，血液中乳酸含量升高并不都存在缺氧，如肝硬化的患者输注大量含乳酸的液体可导致血液中