制种技术 液体菌种生产

制种技术——液体菌种生产固体菌种与液体菌种的特点固体菌种：1，棉籽壳木屑菌种；2，麦粒菌种传统的较常用的菌种，培养时间1-2个月液体菌种：母种培养基不加凝固剂——琼脂而制成可以大规模工厂化生产的菌种，培养时间5-7天可以生产一批。但不便运输和长期保存。（一）、液体菌种制作的原理食用菌液体菌种制作是在发酵罐中，采用液体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获得大量的菌丝体或代谢产物。

（二）、液体菌种的特点1.原料来源广泛原料主要是一些农副产品，土豆、麸皮、玉米粉、可溶性淀粉、黄豆粉、蛋白胨粉等。2.菌丝体生长快速菌丝体在适宜温度下，代谢旺盛，生长快速。3.生产周期短食用菌深层发酵一般仅需2-7d就可获得大量的菌丝体，而固体培养则需30-60d。4.工厂化生产、无季节性食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培养菌体的，不受季节性限制。（三）、液体菌种制作的用途1.生产液体菌种食用菌经深层发酵2-7d的幼嫩菌丝体，可以用来作为食用菌栽培用的原种和栽培种，具有生长壮，萌发快，萌发点多的特点，分别称为二级种子液或三级种子液。2.制备药物或提取生化制品许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药物成分或生化制品的材料。

3.制作饮料、保健品食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→热水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配，可研制成功能饮料、保健品。4.制作畜禽饲料食用菌液体培养物，经过浸提或提取有用成分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。（四）、液体菌种制作的主要工艺

1.液体菌种制备液体菌种制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度的菌丝体。⑴斜面菌种制备制备方法（培养基配方和操作步骤）同试管斜面母种的制备，在此不再多讲了。⑵摇瓶种子制备

液体菌种培养基如同母种培养基

主要工艺流程：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→接种→振荡或搅拌培养管理思考题：液体菌种培养基如同母种培养基的配制，二者的区别在哪里？1.是否加凝固剂（常用的凝固剂是什么？）培养与固体颗粒菌种不同⑵摇瓶菌种的制备

主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→接种→振荡或搅拌培养管理生长快，周期短，每批只需5-7天及可终止培养使用。（五）、液体菌种制作的主要设备1.摇床食用菌为需氧菌，液体菌种培养需要增加氧气的供应，因此，不断振荡有利于菌丝体的快速生长。摇床是液体菌种生产常用的设备，通常培养10-50L以下用摇床。又称浅层培养。振荡培养的作用分散菌丝体形成菌丝球状有利于氧气供应搅拌型发酵罐2.种子罐和发酵罐一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐为500-1000L。

又称深层发酵。分散菌丝体形成菌丝片段状有利于氧气供应适宜大规模供氧培养，不同于厌氧发酵，为有氧发酵。两种搅拌方式叶片搅拌或涡轮搅拌---培养吹入无菌空气----气体吹入沸腾式---搅拌培养无菌空气的过滤形成一级、二级过滤器--滤芯滤膜的级别空气过滤

技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。一般细菌直径在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400nm，所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。当然如果选的太小，成本将大幅度提高。规模化培养的发酵罐液体菌种发酵设备包括四大系统：温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；物料系统由加料管、出料管等组成。工厂化栽培蛹虫草、金针菇、黑木耳、杏鲍菇

都是液体菌种无菌气体吹入沸腾式---搅拌培养创新模式规模化培养的发酵罐---四大系统协调液体菌种的发酵罐是先灭菌后接种再培养灭菌——接种——培养，三合一功能技术含量高，效益高，技术人员薪酬高（六）、液体菌种深层发酵培养生产量较大时，一般用自动控制发酵罐培养，即深层发酵培养。仪表控制的主要参数：1.液体培养基2.菌龄3.接种量4.温度5.通气量6.搅拌速度7.酸碱度8.罐压9.泡沫控制10.培养时间11.产物分离（七）、液体菌种制作的技术关键液体菌种的制备液体菌种制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度的菌丝体。1.斜面菌种制备制备方法（培养基配方和操作步骤）同试管斜面母种的制备，在此不再多讲了。健壮的试管斜面母种是基础2.摇瓶种子液制备

主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→接种→振荡或搅拌培养→发酵罐培养管理种子液制备分为二级、三级---逐级扩大把握菌种质量（纯度、活力）是关键3.发酵罐的使用----制备液体菌种培养期间应注意观察，并做好记录。包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。培养过程中，可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球密度合适（从视镜观察）即可终止培养。智能调控发酵罐规模化、工厂化栽培---液体