医学免疫学课件：第九章 B细胞

第九章B淋巴细胞

Blymphocytes学习要求掌握：B细胞抗原识别受体多样性产生的机制；B细胞主要表面分子及其生物学作用；B细胞的生物学功能。熟悉:B细胞中枢耐受的形成机制；B细胞的亚群及其异同。了解：B细胞分化发育的特点。9B细胞B细胞（Blymphocytes）由哺乳动物骨髓（Bonemarrow）或禽类法氏囊（Bursaoffabricius）中的淋巴样干细胞分化发育。静息B淋巴细胞定居于血液、淋巴结、脾、扁桃体及其他粘膜组织。B细胞占外周淋巴细胞总数的20％。在抗原刺激下，B细胞被激活、增殖、分化为效应细胞、产生抗体，参与特异性体液免疫应答；同时，B细胞也是重要的抗原提呈细胞（APC），并参与免疫调节。B细胞表面的分子及其作用B细胞的分类B淋巴细胞的功能主要内容B细胞的分化发育第一节B细胞的分化发育（一）BCR的基因结构及其重排；（二）抗原识别受体多样性产生的机制；（三）B细胞在中枢免疫器官中的分化发育；（四）B细胞中枢免疫耐受的形成。主要事件：功能性BCR的表达；自身免疫耐受。B细胞在骨髓中发育，细胞因子（SCF、IL-7）和黏附分子（VLA-4）是B细胞发育的必要条件。主要事件：功能性BCR的表达；自身免疫耐受。（一）BCR的基因结构及其重排BCR的胚系基因结构；BCR的基因重排及其机制；等位排斥和同型排斥。BCR（Bcellreceptor）：B细胞表面的mIg，辅助B细胞识别抗原，启动机体体液免疫应答。编码BCR的基因群在胚系阶段是分隔的，B细胞的发育过程中，数量众多的基因片段发生重排和组合，从而产生众多BCR。（一）BCR的基因结构及其重排1、BCR的胚系基因结构：（一）BCR的基因结构及其重排14号染色体长臂2号染色体长臂22号染色体短臂人BCR重链和轻链的胚系基因结构示意图2、BCR的基因重排及其机制V、D、J基因片段之间由内含子隔开，在淋巴细胞发育的过程中，通过基因片段的重排，形成VDJ重排后的DNA，转录为RNA，翻译为新生多肽，再经过加工、糖基化，产生BCR的重链或轻链。参与基因重排的重组酶：重组激活酶（RAG1/RAG2）、末端脱氧核苷转移酶（TdT）、DNA外切酶、DNA合成酶等。（一）BCR的基因结构及其重排重组酶：重组信号序列（Recombinationsignalsequences，

RSS）：位于V-D-J基因片段两侧的保守序列。重组激活酶基因（Recombinationactivatinggene，RAG）编码重组激活酶RAG1和RAG2，特异性识别并切除V、（D）、J基因片段两侧的重组信号序列。末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）：可将数个N-核苷酸通过一种非模板编码的方式加到DNA的断段。DNA外切酶、DNA合成酶等。NNNN3、等位排斥和同型排斥等位排斥（allelicexclusion）：B细胞中一条染色体上的重链（或轻链）基因重排成功后，抑制另一条同源染色体上重链（或轻链）基因的重排。保证一个B细胞克隆只表达单一的BCR。同种型排斥（isotypeexclusion）：指κ轻链和λ轻链之间的排斥，保证了一个Ig分子中只含有一种轻链。κ轻链基因表达成功即抑制λ轻链基因的表达。人Ig中κ链和λ链之比约65:35，小鼠约为95:5。一对等位基因编码两种产物。一个B细胞克隆只能产生单一特异性的BCR或抗体。一个B细胞克隆只能表达一种类型的轻链。（二）抗原识别受体多样性产生的机制胚系阶段分隔的基因片段，在细胞发育过程中通过多种机制发生重排，产生数量巨大的特异性抗原受体，以识别不同的抗原。组合多样性（combinationaldiversity）；连接多样性（junctionaldiversity）；受体编辑（receptorediting）；体细胞高频突变（somatichypermutation）。1、组合多样性（combinationaldiversity）众多V区基因片段的组合。在V、（D）、J基因片段重排时，只取用众多V、（D）、J基因片段中的1个。人VH排列组合的种类可达：45（VH）×23（VD）×6（VJ）=6210种Vκ和Vλ的组合种类分别达200和120种。理论上IgV区基因片段的多样性约为1.9×106。2、连接多样性（junctionaldiversity）重排过程中V、D、J片段之间的连接并不准确，可以插入、替换或缺失核苷酸，从而产生新的序列，显著增加BCR和Ig的多样性。密码子错位，后序列不变；框架移位，后序列完全改变；N序列插入：TdT能将N-核苷酸插入待接DNA断端。3、受体编辑（receptorediting）一些完成基因重排并成功表达BCR（mIgM）的B细胞识别自身抗原后未被克隆清除，而是发生RAG基因重新活化，导致轻链VJ基因再次重排，合成新的轻链，替代自身反应性轻链，从而使BCR获得新的特异性。若受体编辑失败，则细胞凋亡。4、体细胞高频突变（somatichypermutation）在已完成基因重排的基础上，成熟B细胞在外周淋巴器官的生发中心接受抗原刺激后发生的突变，可导致抗体的亲和力成熟。编码V区CDR部位的基因序列发生碱基的点突变。（三）B细胞在中枢免疫器官中的分化发育祖B细胞（pro-Bcell）前B细胞（pre-Bcell）未成熟B细胞（immatureBcell）成熟B细胞（mature/naїver）BcellIg/Ig替代性BCR复合物表达于Pro-B和Pre-B细胞，属免疫球蛋白家族。λ5链和Vpre-B链组成假轻链（L），组成替代BCR。传递Pre-B细胞进一步分化必不可少的信号。B细胞的发育阶段（四）B细胞中枢免疫耐受的形成前B细胞发育至未成熟B细胞，膜表面开始表达mIgM，接受自身抗原刺激，形成免疫耐受。①克隆清除（clonedeletion）；②受体编辑；③失能（anergy）。第二节B细胞的表面分子及其作用（一）B细胞抗原受体复合物（二）B细胞共受体（coreceptor）（三）协同刺激分子（四）其他表面分子（一）B细胞抗原受体复合物（BCR复合物）B细胞表面最主要的分子。BCR复合物：mIg+Ig（CD79a）/Ig（CD79b）。1个mIg分子与2个Ig/Ig二聚体组成。膜免疫球蛋白（mIg）结合特异性Ag，结合位点位于V区CDR内。H链胞内区很短，不能传递信号。成熟B细胞mIg为mIgM和mIgD，浆细胞不表达mIg。Ig/Ig（CD79a/CD79b）IgSF成员，胞质区较长；胞质区含有ITAM基序，转导信号。（一）BCR复合物（二）B细胞共受体（coreceptor）CD19/CD21/CD81：B细胞活化辅助受体。增强B细胞对抗原刺激的敏感性：把信号传递到细胞核内所必须簇集的BCR数目至少降低至1/100。CD21表达于成熟B细胞、FDC、咽部及宫颈上皮细胞，为补体受体（CR2）、EB病毒（EBV）受体。（三）协同刺激分子CD40；CD80和CD86；粘附分子。1、CD40

组成性地表达于成熟B细胞，属TNFRSF。配体为CD40L（CD154），表达于活化T细胞。两者结合是B细胞活化的第二信号。（三）协同刺激分子2、CD80和CD86静息B细胞不表达或低表达，活化B细胞表达增强，作为APC，为T细胞提供协同刺激信号（第二信号）。（三）协同刺激分子APC能否向T细胞提供协同刺激信号，决定T细胞能否激活。若有协同刺激信号，T细胞被激活；否则，T细胞成为无应答性细胞，或发生凋亡。3、粘附分子表达于B细胞的黏附分子有ICAM-1、LFA-1等。

Th细胞对B细胞的辅助以及B细胞向T细胞提呈抗原，均需细胞-细胞间接触，黏附分子在此过程中起很大作用。（三）协同刺激分子（四）其他表面分子CD20：表达于除浆细胞外的各发育阶段的B细胞，通过调节钙离子跨膜流动，调控B细胞增殖和分化。B细胞特异性标志，治疗性单抗识别的靶分子；美罗华（利妥昔单抗）---非霍奇金淋巴瘤、慢淋CD22：含有ITIM基序，负调节CD19/CD21/CD81共受体。CD32：CD32b（FcRIIB），负调节B细胞活化及Ab分泌。4、丝裂原受体:美洲商陆（PWM）和脂多糖（LPS）受体多克隆活化（四）其他表面分子第三节B细胞的分类根据是否表达CD5分子，分为：CD5+B1

细胞和CD5-B2细胞两个亚群。B1细胞表面表达CD5，由于发育在先，故称为B1细胞，主要产生低亲和力的IgM，参与固有免疫。B2细胞表面不表达CD5，即为通常所指的B细胞，参与体液免疫。（一）B1细胞具有自我更新能力，占B细胞总数的5~10%；

定居于腹膜腔、胸膜腔和肠道黏膜固有层中；功能：固有免疫细胞产生抗细菌多糖抗体，抗微生物感染；无需Th辅助，不发生Ig类别转换。产生多反应性自身抗体，清除变性自身抗原；多反应性：B1细胞的BCR及所产生的Ab以相对低的亲和力与多种不同抗原表位结合。受自身抗原刺激产生致病性自身Ab（如类风湿因子和抗ssDNA

的类天然抗体），诱导自身免疫病。（二）B2细胞个体发育中出现较晚，主要定居于外周淋巴器官。接受抗原刺激和Th细胞辅助，最终分化为浆细胞，产生抗体，参与体液免疫应答。形成记忆性B细胞。B1细胞和B2细胞亚群的比较第四节B淋巴细胞的功能（一）产生抗体，介导体液免疫应答（二）提呈可溶性抗原（三）免疫调节功能中和作用；激活补体；调理作用；ADCC；参与I型超敏反应。（一）产生抗体介导体液免疫应答（一）产生抗体介导体液免疫应答1、中和作用病毒和胞内菌必须藉与靶细胞表面的特异分子结合而感染细胞才能复制、生长和繁殖。能与病原体结合的抗体，可阻断病原体与靶细胞的结合。抗体的这个作用称为中和作用。抗体的中和作用在中和细菌毒素中也起重要作用。（一）产生抗体介导体液免疫应答2、激活补体3、调理作用结合在细菌表面的抗体的Fc段与吞噬细胞表面的FcR结合，将细菌带至吞噬细胞表面，使之易被吞噬。（一）产生抗体介导体液免疫应答4、ADCC作用（一）产生抗体介导体液免疫应答（一）产生抗体介导体液免疫应答5、介导I型超敏反应IgE类抗体抗原抗体特异性结合可变区恒定区阻止病原体入侵中和毒素中和作用激活补体溶解细菌结合Fc受体通过胎盘介导I型超敏反应（二）提呈可溶性抗原专职APC以BCR识别、浓集和内化可溶性抗原，或通过胞饮作用摄取抗原，加工处理后以抗原肽-MHCII类分子复合物的形式提呈给Th细胞。自然界大部分病原体是颗粒性抗原（细菌、红细胞等），仅少部分是可溶性抗原（昆虫毒素、蛇毒、变应原等）。（二）提呈可溶性抗原分泌细胞因子（IL-6，10，TNF-），参与免疫调节、炎症反应及造血。调节B细胞的发育分化；激活或灭活M、DC、NK