体外诊断试剂研发全流程管理培训课程-分析性

2/2“体外诊断试剂研发全流程管理培训课程—分析性能评价”精彩回顾之100问（6）2022年11月17日，由中国医学装备协会应用评价分会主办、北京水木济衡生物技术有限公司承办的《体外诊断试剂研发全流程管理培训课》第三期分析性能评价课程正式开课，培训课程持续三天，邀请了多位行业资深专家授课，吸引了上百家企业参加。培训的最后一天，设置了讨论环节，多位专家就学员提出的问题进行了详细的解答，现将部分问题及专家回复整理如下。本节主要针对线性（区间）、测量区间、可报告区间相关问题。51咨询问题对于定量产品线性的检验，一些较早期的推荐性标准（YY/T）中要求的线性性能指标为剂量-反应曲线符合相关要求，此处的“剂量-反应曲线”是否指的是稀释比例（理论浓度）与实际测量值之间的关系？专家答复不是。一些较早期的行业标准对线性的描述确实是指剂量-反应曲线，以YY/T1223-2014《总甲状腺素定量标记免疫分析试剂盒》为例，原文描述如下：这里的剂量-反应曲线指的是校准曲线（定标曲线），不是稀释比例（理论浓度）与实际测量值之间的关系。logit（B/B0）对校准品浓度的对数作图，经过转换后，进行最小平方回归可得到良好的直线。下图左是校准曲线的原始数据作图，下图右为转化后的作图。“线性”的定义：在给定的测量范围内，使测定结果与样本中分析物的量直接成比例的能力,此处的测定结果指最终的分析结果，而非仪器输出的原始信号（GB/T29791.1）。后来的行业标准对“线性”的要求更接近其定义，如下所示。52咨询问题线性范围的建立过程浓度水平个数选择是否有具体标准可参考？专家答复线性范围的建立，一般选择至少9个浓度水平样本，所选用的浓度水平应可覆盖整个预期测量范围。具体可参考CLSIEP06A2-2020EvaluationofLinearityofQuantitativeMeasurementProcedures（2ndEdition）。53咨询问题不精密度和ADL临界值表中L×R最大只有20，但是我们做线性建立时，L×R往往都是大于20的，这种情况怎么对比ADL与临界值？专家答复ADL临界值是通过含有不精密度、测量次数、浓度水平等参数计算的统计量，可以通过公式计算或直接通过不精密度和ADL临界值表获得。当通过查表不可获得时建议使用统计公式计算。54咨询问题线性区间的下限是LOQ，测量区间的下限也是LOQ，测量区间在线性区间内，是否有冲突？专家答复线性区间是指使实验系统的最终分析结果为可接受的线性的浓度范围，此时非线性误差应低于允许误。测量区间是在没有任何样品预处理的情况下测量的一系列量值，测量值在可接受的不精密度、线性偏差、偏倚范围内。线性区间应包含测量区间。以上情况，企业宣称线性区间下限定得保守一些，取LOQ也是可以的。55咨询问题将稀释度作为X值带入方程进行线性验证，稀释度指的是?比如稀释20倍就是X=20?

专家答复稀释20倍的话，稀释度是1/20。56咨询问题关于钩状效应，是怎么定义的？一般采取什么样的方法进行评估？可参考标准有哪些？专家答复钩状效应（hookeffect）定义：在免疫化学测量程序中由于相对抗体浓度抗原浓度过量或相对抗原浓度抗体浓度过量而使得抗原-抗体交联减少而引起的负偏倚。钩状效应有时候被称为前带现象。目前针对钩状效应的评价，可参考《定性检测体外诊断试剂分析性能评估注册审查指导原则》，里面提到“对于部分免疫学原理的产品，检测含有极高浓度的待测抗体/抗原的样本时，饱和反应可能导致检测浓度值低于真实值或出现假阴性结果。建议对多个含有高浓度分析物的样本进行梯度稀释后由低浓度至高浓度检测，每个梯度的稀释液重复多份进行检测，明确不产生钩状效应的最高分析物浓度。”57咨询问题定性胶体金产品在进行高剂量勾状效应评价时，如何确定验证样本的浓度，需要同类型定量产品确定吗?如果不存在定量产品,怎么办？

专家答复定性产品在进行高剂量勾状效应评价时，最好能确定样品浓度。如果确实没有同类型定量产品，可采用其他科学合理的方法确定样品阴阳性和浓度水平。例如新冠抗