浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方

千里之行，始于足下。第2页/共2页精品文档推荐浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方马铃薯：(Solanumtuberosum)为茄科茄属作物．是全球重要的粮菜兼用作物。马铃薯具有生长期短、产量高、习惯性强、营养丰富、耐储运的特点，所以深受生产和消费者的喜欢。但在马铃薯生产中普遍存在种性退化的咨询题，而病毒侵染是马铃薯退化的根源。由于马铃薯是无性生殖作物，因此病毒侵染后会世代相传，危害逐年加重。目前，世界上公认的解决马铃薯病毒危害，防止品种退化的有效途径是茎尖离体培养。经过茎尖离体培养哺育脱毒基础苗，再经过建立合理的良种繁育体系生产优良种薯是马铃薯高产、稳产、优质的可靠保证。

一脱毒种薯繁育工艺流程

马铃薯脱毒种薯繁育工艺流程如图所示。

二脱毒技术

2.1脱毒办法

2.1.1外植体挑选及处理

外植体的挑选途径普通有3条：①在生长季节从田间挖取植株种植在无菌的盆土中，温室内栽培，取其新长成枝条的芽；②从田间切取枝条，插入营养液中生长，取新抽生枝条上的芽；③块茎在室内发芽，芽经热处理(38℃)2周后再取芽。另外，定期给植株喷施内吸杀菌剂，如0.1％多菌灵和0.1％链霉素的混合液，能够有效提高灭菌效果。通过上述处理之后，要比直截了当取自田间枝条污染少得多。再加上茎尖分生组织又被彼此重叠的叶原基爱护．只要认真剥取，无须再举行消毒，就能得到无菌的外植体。但为保险起见，在切取外植体之前，能够先举行简单的表面消毒，普通在5％次氯酸钠中处理8～10min即可。尽管顶芽和腋芽都能作为外植体，但顶芽的茎尖生长要比腋芽的快，成活率也高，因此普通取顶芽作为外植体。

2.1.2剥离茎尖和接种

在超净台上的解剖镜(8～40倍)下举行茎尖剥离。解剖时必须注意使茎尖暴露的时刻越短越好．以免超净台的气流风干茎尖。在材料下垫上一块湿润的无菌滤纸也可达到保持茎尖新奇的目的。在解剖镜下用解剖针将叶片和叶原基剥掉，直到露出圆亮的茎尖生长点。将带有l～2个叶原基的茎尖切下．接种到培养基上。要注意防止交叉污染，尤其是当芽未曾举行过表面灭菌时更要慎重。

2.1.3培养

对马铃薯茎尖培养来讲，MS和white基本培养基基本上较好的培养基，而且附加少量(0.1～0.5mg／L)的NAA或BA或二者都加，培养效果更好。惟独生长点的

极小茎尖的培养最好采纳液体培养，多放在滤纸桥上培养。

茎尖培养初期的最适光照强度为1000lx，4周后增加到2000lx，6周后增加到4000lx。培养温度21～25℃，光照时刻以16h／d为宜。1个月左右茎尖再生成有可见小叶的小植株，保存部分原苗，预备扩繁用；另一部分用于病毒检测。茎尖培养时需要注意以下3个咨询题：①茎尖接种后基部无明显膨大，茎尖变绿，成绿群小点，这是激素浓度或温度偏低造成的；②接种后茎尖明显膨大，3～5d可见淡绿群愈伤组织，这是由于激素浓度或温度偏高，光照偏弱造成的。③培养基添加0.8mg／L的GA有利于茎尖的成活和促长，但别要浓度过高或作用时刻过长，否则会使茎尖别易转绿，导致叶原基迅速伸长，生长点并别生长，整个茎尖变褐而死。

2.2脱毒效果检测

马铃薯通过茎尖培养脱毒后，惟独部分植株是脱病毒植株。所以，在用作脱病毒原种苗之前，必须举行病毒检测证明无病毒后才干推广。在生殖中还要别断重复检测，以防重新感染。常用的病毒鉴定办法有指示植物测定法、血清学办法和电

子显微镜法。

三脱毒苗快繁技术

3.1继代培殖与生根培养

将经鉴定无毒的马铃薯脱毒苗，采纳固体与液体培养基相结合的办法举行继代增殖培养效果好。取试管苗单节切段扦插在MS固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右便可发育成5～10cm高的小植株，然后举行切段生殖。此法速度快，每月可生殖5～8倍。假如多茎节的试管苗接种在液体培养基上，举行浅层静止液体培养，则比固体培养基生根快，长得粗壮。便于栽植，并且省去大量琼脂，落低了生产成本，并且提高了试管苗成活率。培养基可选用MS培养基，其中的烟酸、肌醇都能够减去，琼脂浓度也可落低。在25～28℃、光照强度3000~4000lx、延续光照的条件下，切段生殖速度非常快，普通每月能增加7～8倍。

另外，也可将1～2cm高的苗转人MS、IAA0.1～0.5mg／L，活性炭0.1～0.2g／L的生根培养基中培养，7～10d生根。

3.2驯化移栽

为增强试管苗对温室内环境条件的习惯能力，移植前对试管苗要举行光、温锻炼。具体办法是：移植前7d左右，将长有3～5片叶、高2～3cm的试管苗瓶摆放在温室内的驯化畦内，畦内浇上水，畦上方半遮阳举行驯化，以防止强光、高温灼伤试管苗和维持试管苗身边的温度。移至温室的试管苗，虽然仍处于封口的瓶内，但由于封口膜透气性好，瓶内的湿度下落，使试管苗的茎叶变硬，加上光照增强，茎秆变粗，叶片胖厚浓绿，有效地抑制了徒长和真菌的侵染，从而提高了试管苗的抗逆性和对环境条件变化的习惯能力，提高了移栽成活率。炼苗期温室内的温度普通要求白天23～27℃，夜间别低于10℃。

移栽办法采纳单芽茎段或双芽茎段扦插式移栽。边剪取边扦插。扦插基质可采纳灭过菌的珍珠岩或疏松土壤。扦插成活后每隔2~3d喷1次营养液（表4-5），后期每隔10d喷一次，以促进扦插苗茁壮和顺利结薯。

四微型薯生产技术

由试管苗生产的重l～30g的弱小马铃薯称为微型薯。尽管温室或实验室内都能够诱导产生微型薯，但以实验室内诱导生产为主，为马铃薯的种质保存、交换以及脱毒种薯的繁育和运输提供了一种便利的途径，也便于马铃薯种薯的大面积推广。

4.1实验室生产微型薯

组织培养生产微型薯要求条件较严格，费用较高，但产品的质量好，整齐度高，粒重普通惟独1～5g，由于是在三角瓶中或试管中培养，所以可作为别带病原菌的原种使用，或作为基础研究材料和病原鉴定的实验材料。实验室微型薯生产(图

4—12)普通分单茎段扩大生殖和微型薯诱导两个时期。

4.1.1单茎节扩大生殖

从试管苗中获得茎切段，每个切段上带有1～2个叶片和腋芽。每个三角瓶中接4～5个茎段举行培养。培养条件是温度22℃、光照16h／d、光照强度1000lx。所采纳培养基：①节段培养基，MS、3％蔗糖、0.8％琼脂；②液体振荡培养基，MS、2％蔗糖；③微型种薯诱导培养基，MS、香豆素50～100rag／L；④离体保存培养基，MS、3％蔗糖、4％甘露醇、0.8％琼脂。在此条件下，由腋芽形成的小植株生长非常快，当小植株长到4～5cm时，就能够举行第二步培养。

4.1.2微型薯诱导

微型薯要求有一定量的激素，同时要在黑暗条件下培养。采纳便宜的香豆素代替CCC和BAP，用食用白糖代替蔗糖，同样结薯非常好。采纳MS、香豆素50～100mg／L的液体或固体培养基。培养基的液固状态和光照条件对微型薯诱导有非常大作用。与单茎节扩大生殖别同，微型薯的诱导必须在黑暗条件下举行，否则只

有植株生长，而没有小薯形成。培养温度22℃。

4.2温室生产微型薯

普通采纳脱毒苗切繁办法举行。为了节省土地，充分利用空间，有人特意设计了温室多层架盘工厂化生产微型薯的办法。具体办法是：在温室4～6层育苗架上放育苗盘，基质能够是蛭石、珍珠岩等。将脱毒试管苗以单茎段或双芽芽茎段扦插，然后在人工调控的温光条件下经60～90d即可收获微型薯。扦插时用GA3mg／L、NAA5mg／I。的混合液浸泡茎段，扦插成活率达98％。

五原种种薯和生产种薯生产技术

在实验室或温室生产的微型薯(原原种)，可进一步经过大田或塑料大棚在春秋两季扩大生殖，生产原种种薯。利用原种种薯切块播种，生产出生产种薯，用于马铃薯栽培用种。原种和生产种的种薯生产要求在爱护地设施内举行，以下介绍原

种生产技术。

选3～4年未种过马铃薯的土地，精细整地后搭棚。拱棚可采纳30m×50m或25m×8m的规格或直截了当在温室内生产。播种前浇水，施有机胖4000～5000kg／亩，并用过磷酸钙20～25kg或硫酸钾15～20kg／亩的一半作基胖，另一半留在马铃薯现蕾期结合培土施用。微型薯原原种在播种前须用湿沙埋住，在室内散射光下催芽。由于休眠的妨碍，必须等芽萌动后才干播种，这是保全苗的关键。微型薯大小别一致时分级播种。原种生产要求高密度播种(行株距：50cm×10cm或60cm×10cm)，要求单株结薯多，以5～10g的单薯重为宜。春季防治早疫病，秋季防治晚疫病，在温室或拱棚