体外诊断试剂分类和常见产品技术原理及应用

关于体外诊断试剂分类和常见产品技术原理及应用第一页，共四十八页，编辑于2023年，星期日体外诊断试剂和器械在国外统一称为体外诊断医疗器械。属于医疗器械的一部分。在我国，体外诊断试剂是指：可单独使用或与仪器、器具、设备或系统组合使用,在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中,用于对人体样本(各种体液、细胞、组织样本等)进行体外检测的试剂、试剂盒、校准品(物)、质控品(物)等。概念第二页，共四十八页，编辑于2023年，星期日根据国家管理类别：按照产品风险程度的高低，体外诊断试剂依次分为第三类、第二类、第一类产品。不同类的产品在审查、批准后颁发医疗器械注册证书上由不同的机构进行：第三类由国家食品药品监督管理局审查、批准；第二类由省级食品药品监督管理局审查、批准；第一类由市级食品药品监督管理局审查、批准。体外诊断试剂的分类（一）第三页，共四十八页，编辑于2023年，星期日第三类产品：

1．与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂；

2．与血型、组织配型相关的试剂；

3．与人类基因检测相关的试剂；

4．与遗传性疾病相关的试剂；

5．与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂；

6．与治疗药物作用靶点检测相关的试剂;

7．与肿瘤标志物检测相关的试剂;

8．与变态反应（过敏原）相关的试剂。第四页，共四十八页，编辑于2023年，星期日除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括：1．用于蛋白质检测的试剂；2．用于糖类检测的试剂；3．用于激素检测的试剂；

4．用于酶类检测的试剂；

5．用于酯类检测的试剂；

6．用于维生素检测的试剂；

7．用于无机离子检测的试剂；

8．用于药物及药物代谢物检测的试剂；

9．用于自身抗体检测的试剂；

10．用于微生物鉴别或药敏试验的试剂；

11．用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。第二类产品：第五页，共四十八页，编辑于2023年，星期日

1．微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）；

2．样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。*注：第二类产品中的某些产品，例如蛋白质、糖类、激素、酶类等的检测，如果用于肿瘤的诊断、辅助诊断、治疗过程的监测，或用于遗传性疾病的诊断、辅助诊断等，则按第三类产品注册管理。在药物及药物代谢物检测的试剂中，如果该药物属于麻醉药品、精神药品或医疗用毒性药品范围，则按第三类产品注册管理。第一类产品：第六页，共四十八页，编辑于2023年，星期日按照受理和审评分为：按照药品受理和审评的和按照医疗器械受理审评的。一、按药品受理和审评的体外诊断试剂：*1.ABO血型定型试剂（盒）*2.乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂（盒）*3.丙型肝炎病毒（HCV）抗体试剂（盒）*4.人类免疫缺陷病毒HIV抗原/抗体诊断试剂（盒）*5.梅毒螺旋体抗体试剂（盒）6.放免试剂(盒)注：*号的品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。体外诊断试剂的分类（二）第七页，共四十八页，编辑于2023年，星期日二、按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂：1、临床血液学和体液学检验试剂2、临床化学检验试剂3、临床免疫学检验试剂。4、微生物学检验试剂5、组织细胞学检验试剂6、变态反应、自身免疫诊断检验试剂（盒）7、遗传性疾病检验试剂8、分子生物学检验试剂9、其它检验试剂（盒）体外诊断试剂的分类（二）第八页，共四十八页，编辑于2023年，星期日按照技术方法分：1.比色法（颜色反应）；2.分光光度法；3.凝集法；4.散射法（沉淀反应）；5.透射比浊法（沉淀反应）；6.速率法、终点法（产物或底物量）；7.标记技术；8.生物亲和；9.免疫技术；10.发光技术；11.荧光技术；12.放射技术；13.形态分析；14.流式细胞；15.电泳技术；体外诊断试剂的分类（三）第九页，共四十八页，编辑于2023年，星期日按照技术方法分：16.克隆技术；17.酶技术；18.基因技术；19.聚合酶链反应-PCR（分子生物技术）；20.杂交技术（分子生物技术）；21.印迹技术；22.层析技术；23.色谱技术；24.质谱技术；25.溶出法；26.伏安法；27.多技术联合应用，如：酶联免疫、免疫比浊、放射免疫、免疫化学发光、免疫层析、荧光杂交、免疫组化、流式荧光、电极溶出伏安法等。体外诊断试剂的分类（三）第十页，共四十八页，编辑于2023年，星期日在实际应用中，单一技术往往不能满足检测需要，因此，诊断试剂会联合使用多种技术。常见的体外诊断产品：1.生化分析仪、生化试剂；2.酶标仪、酶免试剂；3.免疫化学发光仪及试剂；4.胶体金（乳胶、荧光）免疫层析试剂；5.血细胞分析仪、细胞检测试剂；6.尿液分析仪、尿液检测试剂（试纸）；7.（血气）电解质分析仪、电解质试剂；8.细菌、微生物培养及鉴定试剂；9.免疫组化染色液、液基细胞试剂、免疫印迹试剂10.PCR仪及试剂；11.血型试剂；12.流式细胞仪。

12.微量元素（原子吸收法）常见的体外诊断产品技术原理及应用第十一页，共四十八页，编辑于2023年，星期日生化分析仪、生化试剂全自动生化分析仪；肝功类、肾功类等比色法、比浊法、散射法、速率法、终点法第十二页，共四十八页，编辑于2023年，星期日酶标仪、酶免试剂酶标仪：比色计；酶免试剂：酶联免疫法比色法抗原抗体特异性结合、酶作为标记物和催化物，加入底物产生颜色反应，放入比色计进行比色。第十三页，共四十八页，编辑于2023年，星期日化学发光仪及试剂以酶为催化剂，通过氧化反应，使底物发光。

过氧化物酶（HRP)促发光，底物——鲁米诺

碱性磷酸酶(AP)促发光，底物——螺旋金刚烷环氧化物苯磷酸酯（AMPPD)第十四页，共四十八页，编辑于2023年，星期日非酶促化学发光及电化学发光非酶促化学发光：以吖啶酯、过氧化氢为发光系统，不需要酶的催化。仪器成本高，技术复杂，尚未国产化（Abbott)电化学发光：氧化反应是通过电极上的电化学反应产生，标记物为三氯联吡啶钌。仪器成本高，技术复杂，尚未国产化。（Roche）第十五页，共四十八页，编辑于2023年，星期日胶体金（乳胶、荧光）层析试剂胶体金免疫层析法：将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。第十六页，共四十八页，编辑于2023年，星期日胶体金免疫层析法反应示意图吸样垫胶体金垫包被T线包被C线上样垫NC膜支撑物第十七页，共四十八页，编辑于2023年，星期日HIV胶体金类快速诊断试剂检测结果第十八页，共四十八页，编辑于2023年，星期日第三类）

免疫印迹试剂免疫印迹试剂盒:风湿病自身抗体检测试剂盒（免疫印迹法）第十九页，共四十八页，编辑于2023年，星期日免疫印迹法示意图第二十页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第四类）

蛋白芯片（微阵列）类试剂蛋白芯片（微阵列）：丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（蛋白芯片法）；多肿瘤标志物检测试剂盒（蛋白芯片法）第二十一页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第五类）

单抗类试剂血型定型类试剂：血型定型试剂盒（单克隆抗体）免疫组化：ImmuChem免疫组化试剂盒（单抗）免疫比浊：血清载脂蛋白A1免疫比浊试剂盒乳胶凝集：D-dimer二聚体乳胶凝集试剂盒第二十二页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第六类）

多抗类试剂血型定型类试剂：血型定型试剂盒（人血清/马血清）免疫组化：癌胚抗原检测试剂盒（多抗）免疫比浊：β-微球蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）乳胶凝集：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒第二十三页，共四十八页，编辑于2023年，星期日抗原抗原：指进入有免疫活性的组织（宿主）而引发免疫应答的物质。或虽不能引发免疫，但可以同抗体结合的物质。

蛋白质，多糖，核酸，糖脂，青霉素全抗原性具有多个抗原决定族第二十四页，共四十八页，编辑于2023年，星期日抗体宿主对体内存在的外来分子，微生物或其他因子的应答而产生的蛋白质（免疫球蛋白，丙种球蛋白）根据抗体性质：多克隆抗体，单克隆抗体根据抗体分子结构：IgA,D,E,G,M第二十五页，共四十八页，编辑于2023年，星期日IgGIgM抗体模式图第二十六页，共四十八页，编辑于2023年，星期日单克隆抗体由一株淋巴细胞产生，针对一种抗原决定族抗原免疫小鼠-取脾脏-与瘤细胞融合-克隆筛选-单克隆抗体细胞株扩增细胞-注射入小鼠腹腔-采腹水-纯化抗体第二十七页，共四十八页，编辑于2023年，星期日流程杂交瘤技术第二十八页，共四十八页，编辑于2023年，星期日多克隆抗体针对多个抗原决定族抗原免疫动物-采集动物血清纯化抗体第二十九页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第七类）

诊断血清（菌液）诊断血清：侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清；志贺氏菌属四种混合多价血清诊断菌液：伤寒沙门菌菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原诊断菌液第三十页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第八类）

血球凝集类试剂抗体致敏血球：破伤风抗体诊断试剂（血凝法）；白喉抗体诊断试剂（血凝法）第三十一页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第九类）

核酸扩增类试剂荧光PCR：乙型肝炎病毒核酸定量测定试剂盒PCR-ELISA：结核分支杆菌检测试剂盒（核酸扩增酶联免疫法）PCR-毛细管电泳：性染色体多倍体（分型与突变）检测试剂盒；PCR-电泳：α-地中海贫血基因诊断试剂盒（gap-PCR法）转录介导扩增（TMA）：沙眼衣原体与结核分枝杆菌检测试剂盒第三十二页，共四十八页，编辑于2023年，星期日PCR基本原理示意图第三十三页，共四十八页，编辑于2023年，星期日PCR过氧化物酶联物96孔酶标法加样分析观察数据PCR产物的检测

96孔酶标法

第三十四页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第十类）

基因芯片（微阵列）类试剂基因芯片（微阵列）：α-地中海贫血基因芯片诊断试剂盒PCR-杂交：人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒（PCR-反向杂交法）第三十五页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第十一类）

探针放大（原位杂交）类试剂bDNA类：HIV-1bDNA检测试剂盒；mRNA检测试剂盒(生物素原位杂交法)第三十六页，共四十八页，编辑于2023年，星期日探针放大类试剂--支链DNA技术病毒的RNA释放后加入微孔板中——板孔中包被有可与病毒特异结合的一系列靶探针（TargetProbe），另一系列靶探针的一端可标记在游离的病毒核酸链上，另一端可与bDNA结合——bDNA信号放大——加入酶标记物对结合的bDNA进行标记——经过清洗后加入底物进行反应，测定反应强度。第三十七页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第十二类）

普通生化类试剂（十万级要求）（包括酶类化学试剂、凝血试剂类等试剂）酶类化学试剂:丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒；碱性磷酸酶（ALP）测定试剂盒凝血试剂:凝血酶原时间（PT）测定试剂盒；组织纤溶酶原激活物（t-PT）测定试剂盒第三十八页，共四十八页，编辑于2023年，星期日普通生化类试剂(十万级要求)（1）★原理：

临床普通生化类试剂是一类用于测定人血液、尿液等中各项生化指标的试剂。含有各种非特异性蛋白成分，要求在十万级洁净环境中生产。检测方法均为比色法，方法学原理均为显色反应。

★产品涉及：1、酶类：含酶、辅酶与牛血清白蛋白等、剂型为干粉或液体。2、血凝类：试剂组分中含有其他活性类组分（如兔脑粉等）。★生产工艺：原材料称量、溶解、定容、中试、分装、组装、成品检验。★关键控制点：原料称量、配制、物料平衡。《细则》要求：应在10万级净化环境中进行生产操作。第三十九页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第十三类）

普通生化类试剂（清洁环境）（包括一般化学试剂、血气电解质类、血液分析仪用试剂类等）一般化学试剂：无机离子（铝、镉等）测定试剂盒；白蛋白测定试剂盒（BCG法）；总胆固醇测定试剂盒（COD-CE-PAP法）血气电解质:电解质分析仪随机试剂；生化分析仪用稀释液、冲洗液血液分析仪用试剂:血液分析仪用稀释液、溶血剂第四十页，共四十八页，编辑于2023年，星期日普通生化类试剂（清洁环境）★原理：与普通生化试剂（十万级要求）类相同。★产品涉及：无机离子检测、血气电解质类、血液分析仪用试剂类等试剂。★工艺要求：除生产可在清洁环境中进行操作外，生产工艺和关键控制点与普通生化试剂（十万级要求）类相同。第四十一页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第十四类）

干化学类试剂干化学试剂（条、卡或盒）：干化学尿液分析试纸条；尿微量白蛋白（UALB）测试卡第四十二页，共四十八页，编辑于2023年，星期日干化学类试剂

◆原理：以滤纸为载体，将各种试剂组分浸渍后干燥，作为试剂层，固定在支持物上，试纸上的各测试块与被测样品中的成分发生酶化学反应，使试纸块发生不同的颜色变化，颜色深浅与样品中的成份含量成正比，再由光电耦合元件对测试块的颜色进行判读，达到测定样品中化学成分含量的目的。◆生产工艺主要环节：

特定试剂的配制、试剂条的浸润、干燥、切割、分包装等；第四十三页，共四十八页，编辑于2023年，星期日（第十五类）

药敏类试剂药敏纸片（卡）：抗生素药敏纸片；随机专用药敏试剂（盒）（卡）第四十四页，共四十八页，编辑于2023年，星期日药敏类试剂

●原理：是将抗菌药物吸收到特定的纸片中，然后置于已接种待测定菌的固