微生物培养与检验-消毒与灭菌

消毒与灭菌思考：生活中的消毒灭菌有哪些？生活中的消毒灭菌但是中世纪的时候，医院卫生条件极差，死亡率高产院是引导产妇走向死亡之门1943年，Holmes发现，引起产妇死亡的产褥热与医生在尸检后不洗手就检查产妇与接生有关英国外科医生Lister阐明了细菌与感染的关系，并提出消毒的概念，并于1967年发表了著名的有关外科无菌操作技术的论文生活中的消毒灭菌他尝试将石炭酸溶液注入伤口进行消毒，显著减少了术后感染的发生(现在阑尾炎手术断端的消毒仍然沿用石碳酸)，为细菌致病理论提供了有力的证据。Lister还改进了消毒的方法，发明了无菌手术即通过保持手术室洁净和使用无菌器械来防止细菌侵入伤口。《英国医学杂志》称Lister的发明所拯救的生命超过了在19世纪所有战争中牺牲的总人数。约瑟夫·李斯特(JosephLister，1827～1912)第一代李斯特男爵知识目标技能目标素质目标1.掌握消毒、灭菌、无菌的概念2.掌握干热灭菌、湿热灭菌、紫外线杀菌的原理3.了解其他灭菌方法1.会对物品进行高温高压湿热灭菌2.会正确使用高压灭菌锅通过任务的实施，培养获取和处理信息、知识综合应用、独立思考、分析判断、制定方案、解决问题、检查评估及探究等能力学习目标术语消毒是指用物理或化学的方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物，一般只能杀死营养细胞而不能杀死芽孢。用以消毒的物品：消毒剂灭菌指利用物理和化学的方法杀灭或除去物料及设备中一切生命物质的过程。消毒不一定能达到灭菌的要求，而灭菌则可达到消毒的目的防腐：防止或抑制体外微生物生长繁殖的方法，如：低温、干燥、防腐剂；用以防腐的物品：防腐剂。防腐时物品上的病原微生物不一定死亡无菌；无菌操作消毒灭菌方法（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌1.火焰灭菌法利用火焰直接杀死微生物的灭菌法称为火焰灭菌法。该法方法简单，灭菌彻底，但使用范围有限，仅适用于接种针、玻璃棒、三角瓶口等的灭菌。消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌2.热空气灭菌法进行干热灭菌时，微生物细胞发生氧化，微生物体内蛋白质变性和电解质浓缩引起中毒等作用，其中氧化作用导致微生物死亡是主要原因。由于微生物对干热的耐受力比对湿热强得多，故干热灭菌所需的温度要高，时间要长140~160℃2~3h消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌1.高压蒸汽灭菌法利用饱和蒸汽进行灭菌的方法。由于蒸汽有很强的穿透能力，湿热灭菌对耐热芽孢杆菌来说，温度升高10℃时，灭菌速度常数可增加8～10倍，对营养细胞更高。蒸汽来源方便，价格低廉，灭菌效果可靠，是目前最为常用的灭菌方法121℃20~30min消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌2.常压蒸汽灭菌法常压下进行湿热灭菌，100℃8~10h3.常压间歇灭菌法100℃2h100℃2h100℃2h自然温度培养24h自然温度培养24h消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌薄膜滤菌器0.22μm和0.45μm消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌240~280nm波段紫外线杀菌力较强多以253.7nm作为紫外线杀菌波长特点：穿透力弱，适合于表面杀菌紫外线可见光光复活消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌某些化学药剂能与微生物发生反应而具有杀菌的作用。化学药剂适于生产车间环境的灭菌，接种操作前小型器具的灭菌等。化学药品的灭菌使用方法，根据灭菌对象的不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态熏蒸等消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌1.75％酒精溶液机理：使细胞脱水，引起蛋白质凝固变性。对营养细胞、病毒、霉菌孢子均有杀死作用，但对细菌的芽孢杀死作用较差。常用于皮肤和器具表面杀菌。75%酒精如何配？消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌2.新洁尔灭机理：是表面活性剂类洁净消毒剂，在水溶液中以阳离子形式与菌体表面结合，引起菌体外膜损伤和蛋白变性。10min能杀死营养细胞，但对细菌芽孢几乎没有杀灭作用。一般用于器具和生产环境的消毒，不能与合成洗涤剂合用，不能接触铝制品消毒灭菌方法：（一）干热灭菌法（二）湿热灭菌法（三）过滤除菌（四）紫外线杀菌（五）药物杀菌消毒灭菌无菌任务二：微生物培养基的灭菌请同学们观看视频“高压蒸汽灭菌锅的使用”，了解灭菌锅使用的步骤，并尝试将操作步骤记录下来18湿热灭菌法——高压蒸汽灭菌法利用饱和蒸汽进行灭菌原理:借助于蒸汽释放的热能使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的变性，使微生物死亡蒸汽有很强的穿透能力，对耐热芽孢杆菌来说，温度升高10℃，灭菌速度常数可增加8～10倍，对营养细胞更高。蒸汽来源方便，价格低廉，灭菌效果可靠，是目前最为常用的灭菌方法121℃20~30min19高温高压蒸汽灭菌锅的使用201）加水：在灭菌器外桶加入清水，盖过平板；连续使用时，须每次灭菌后补足水量，以免干烧；2）堆放：待消毒物品妥善包扎，放入灭菌篮筐内，相互之间留空隙，有利于蒸汽穿透；3）密封：将灭菌篮筐放入桶体，对正螺栓冒，用力均匀地将相对方位螺母拧紧，使容器与桶体密合214）加热：开启电源开关。上排为测量温度及计时时间，下排为温度及时间设定值。设定温度和时间5）灭菌灭菌完成，计时指示灯灭，并蜂鸣提醒，显示END

灭菌结束后，先断电源，停止加热，冷却至压力表为0，再打开放气阀