需氧革兰阳性杆菌及检验

革兰阳性杆菌及检验革兰阳性杆菌菌属间的鉴别

棒状杆菌属芽胞杆菌属李斯特菌属丹毒丝菌属加特纳菌属形态棒状杆菌有芽胞短杆、链或丝状细杆或丝状杆菌、多形性触酶+++--动力-V+--对氧需氧，兼性厌氧需氧，兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧

V：炭疽芽胞杆菌阴性，其它芽胞杆菌阳性。第一节棒状杆菌属

棒状杆菌属的共同特征

革兰阳性多形态杆菌无荚膜、无鞭毛、无芽胞细菌呈不规则栅栏状排列需氧或兼性厌氧触酶试验阳性细胞壁结构和血清学分析，证明与分枝杆菌属、奴卡氏菌属有共同的成分。一．白喉棒状杆菌

2023/3/11形态与染色瘦长弯曲、一端或两端膨大的革兰阳性杆菌。无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。

用美蓝、Neisser法、Albert法等染色时，在细菌的一端或两端有浓染的颗粒，此颗粒与菌体着色不同，称为异染颗粒，为本菌重要形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。

菌落特征血平板：灰白、狭窄β溶血环。鸡蛋斜面和血清斜面：生长快速，灰白色有光泽菌落。亚碲酸钾血平板：为选择培育基，菌落呈黑色。菌落分为重型、轻型或中间型。

标本采集用无菌长棉拭子，从疑为假膜的边缘采集分泌物。

未见假膜的疑似患者或带菌者可采集鼻咽部或扁桃体粘膜上的分泌物。其次节需氧芽胞杆菌属芽胞杆菌属共同特点绝大多数菌种在有氧条件下形成不大于菌体横径的芽胞除炭疽芽胞杆菌外均有动力和溶血实力非抗酸性养分要求不高，在一般培育基上生长良好一．炭疽芽胞杆菌2023/3/11形态与染色为致病菌中最大的革兰阳性杆菌，两端齐平或凹陷，呈竹节状，单个或呈短链状排列。无鞭毛，形成芽胞，有毒菌株可形成荚膜。人工培育或在外界环境中易产生芽胞，在活体或完整未经解剖的尸体内不形成芽胞，所以炭疽病尸体严禁解剖。炭疽芽胞杆菌2023/3/11培育特性需氧或兼性厌氧。养分要求不高，一般培育基上生长良好。2023/3/11菌落特征一般琼脂平板：菌落扁平、粗糙，不透亮灰白色，无光泽，边缘不整齐，在低倍镜下可见到菌落边缘呈卷发状。血液琼脂平板：培育12～15h，菌落四周无溶血环，18～24h后可有稍微溶血，而其他需氧芽胞杆菌大多数溶血明显而快速。液体培育基中呈絮状生长明胶培育基中呈倒置的杉树有毒株在NaHCO3培育基中形成荚膜，菌落呈粘液状，有拉丝。有毒株在NaHCO3血琼脂平板上置5%CO2环境中培育18～24h，可产生荚膜，菌落由粗糙型变为粘液型，而呈现半圆形，突起，有光泽的菌落。以接种针挑取时呈拉丝状，此为鉴别菌落要点，而无毒株则形成粗糙型菌落。标本采集标本采集病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等。死亡病畜标本：死于败血症的动物，严禁宰杀、解剖，可在消毒皮肤后割取耳朵、舌尖、采集少量血液。污染物品：皮革、兽毛、土壤等。标本处理：无杂菌污染标本干脆接种，有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种。已处理标本干脆涂片增菌培育分别培育Ascoli试验革兰染色荚膜染色初步报告血平板戊烷脒琼脂平板可疑菌落菌落涂片染色镜检鉴定试验肉汤培育动物试验动物死亡分别培育●噬菌体裂解●串珠试验●青霉素抑制试验检验方法在芽胞杆菌属中，除蜡样芽胞杆菌毒素对动物有致病作用外，炭疽芽胞杆菌是唯一具有致病力者。

炭疽芽胞杆菌与其它需氧芽胞杆菌的鉴别

鉴别项目炭疽芽胞杆菌枯草芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌及其它需氧芽胞杆菌形态菌体两端平整或凹陷两端钝圆两端钝圆荚膜+--动力-++菌落有小突起，边缘呈卷发状，粘稠菌落锯齿状粗糙菌落蜡样或粗糙不粘稠菌落肉汤絮状沉淀，上层清晰均匀混浊有菌膜均匀混浊有菌膜Ascoli+--溶血不溶血或微溶血++串珠试验+--二．蜡样芽胞杆菌形态与染色

革兰阳性大杆菌，两端较钝、链杆状，长短不一，有鞭毛，无荚膜，可形成芽胞。2023/3/11培育特性需氧或兼性厌氧，养分要求不高。一般琼脂平板：可形成圆形、隆起、灰白色、不透亮、R型蜡滴样大菌落。血琼脂平板：菌落呈浅灰色，似毛玻璃状，菌落四周有α或β溶血。第三节产单核李斯特菌2023/3/11（一）形态与染色革兰阳性小杆菌，直或稍弯，常呈V字形成对排列，有时呈丝状，间或可见双球状。

多数菌体一端较大，似棒状，易误认为是污染的类白喉棒状杆菌；又因菌体短小，三、五成链，并有β溶血性，易与链球菌混淆，用触酶试验加以区分。在22～25℃环境中形成4根鞭毛，故在25℃肉汤培育液中运动活泼；而在37℃时仅形成1根鞭毛，动力缓慢。2023/3/11（二）培育特性需氧或兼性厌氧，养分要求不高。4～45℃均能生长，最适温度30～37℃。因在4℃能生长，故可进行冷增菌。

初时菌落微小似露珠状、光滑透亮，通过侧光微显蓝绿色，37℃培育数日，菌落增大变成灰暗，血平板上的菌落有狭窄的β溶血环。第四节红斑丹毒丝菌2023/3/11（一）形态与染色

革兰阳性杆菌，单个或形成短链状，粗糙型菌落形成长丝状。无鞭毛，无荚膜，无芽胞。

（二）培育特性厌氧或微需氧菌。初次分别需在厌氧环境中培育，传代后在有氧条件下也能生长。二．致病性红斑丹毒牡菌为红斑丹毒丝菌病的病原体。主要发生在鱼类、家畜、家禽和兔类，人类也感染发病。人接触动物或其产品经皮肤损伤而引起类丹毒。以局部感染为主，继而发展成淋巴管炎，可转变成关节炎。也可引起急性败血症或心内膜炎。第五节阴道加特纳菌（一）形态与染色

本菌革兰染色视菌株和菌龄不同而异。本菌具有多形性，两端钝圆，无鞭毛，无荚膜，无芽胞。

2023/3/11（二）培育特性兼性厌氧菌，养分要求较高，在一般养分琼脂平板上不生长。在含5%人血琼脂平板上置5%CO2，35～37℃培育24h后，形成针尖大小菌落；经48h后形成β溶血、圆形、光滑不透亮的菌落。二．致病性阴道加特纳菌和厌氧菌在阴道内过度生长，造成阴道正常菌群微生态平衡失调，而引起非特异细菌性阴道病（BV）。可导致妇产科多种严峻并发症。如子宫全切术后感染、绒毛膜