血型鉴定和亚型华信

ABO血型和亚型检查北京佰利申公司市场部张松2009-9-24当前1页，总共40页。讨论内容ABO血型及遗传血型试剂的现状和发展ABO血型检查和亚型诊断和案例ABO亚型输血原则当前2页，总共40页。发现血型1900年奥地利医生Landsteiner发现了ABO血型系统，成为血型血清学的奠基人。1932年获诺贝尔医学奖。被国际医学界称为“血型之父”血型血清学：应用血清学的方法研究血液中抗原、抗体及其反应的科学。当前3页，总共40页。血型与遗传基因是遗传的基本单位。一个个体所带的基因总和，称为基因型,血型抗原通常是共显性性状。血型血清学方法直接检测出的基因产物，称为表型。当前4页，总共40页。ABO血型的遗传共由3个等位基因IA，IB和i控制的，通常为共显性。

血型的遗传是十分稳定的，但也有一些特殊的情况人类ABO系统血型表血型表型基因型抗原(在细胞膜上)抗体基因和产物AIAIA,IAiAβ（抗B）IA(9q34)N-乙酰半乳糖转移酶BIBIB,IBiBα（抗A)IB(9q34)半乳糖转移酶ABIAIBAB-Oii-αβ（抗A抗B）i(9q34)无相应产物当前5页，总共40页。血型系统是指一系列等位基因产生的,可使用血清学方法或免疫学检出化学上有关的抗原。当前6页，总共40页。血型在医学、法医学中的应用器官移植输血治疗疾病诊断（HDN等）疾病相关亲子鉴定个体识别当前7页，总共40页。8ABO抗体性质：多数为IgM，或有少量IgG，IgA天然抗体：没有明显抗原刺激而产生的抗体。免疫抗体：通过输血、妊娠等免疫刺激获得的抗体A型人——抗BB型人——抗A 多为IgMO型人——除具有抗A，抗B外，还有抗AB，为IgG，IgM或IgA混合物，IgG型抗A或抗B可通过胎盘。B型人抗A效价高于A型人抗B效价O型人抗A，抗B或抗AB效价高于B型或A型人相应抗A或抗B。完全缺乏抗A、抗B者，﹤0.01%。当前8页，总共40页。配血步入基因时代为了预防输血不良反应和挽救生命，欧州学者们正在呼吁用DNA检测替代血清学方法来鉴定血型。基因分型能更准确地完成供受者间的血型配型，从而防止同种免疫和其它免疫相关的输血反应。100多年来血清学方法面临挑战。当前9页，总共40页。血型试剂的现状与展望抗A抗B血型定型试剂：《中国生物制品规程》2000版：能检测A2、A2B2010版药典（正在修订）不能低于中检所的标准品。ISBT对定型试剂要求，既不能“漏检”A3、B3，理想的是能识别Ax、Bx，血凝效价至少在1：128。当前10页，总共40页。我国抗A抗B血型试剂标准特异性：抗-A，只凝集含A抗原红细胞，包括A1、A2、A1B、A2B;可不凝集Ax、Bx细胞。亲和力：抗-A对A1细胞开始凝集的时间为15秒，对A2为30秒，对A2B为45秒；抗-B对B红细胞为15秒。效价：抗-A11：128，抗-A2B1：16、抗-B1：128当前11页，总共40页。正确检查方法和高质量试剂缺一不可从理论到实际可以说明，不可能绝对避免亚型红细胞“漏检现象”。应用高质量的血型试剂，应达到ISBT标准。正确的血型检定方法：输血规范要求，即”供受”必须做正反定型，才能正确判断血型。确保安全输血。当前12页，总共40页。13ABO亚型A亚型1911年,vonDungern发现A型有2种，A1，A2

A2与A1有量的差别，A2抗原位点数比A1少得多，糖基转移酶活性也低A2与A1也有质的差别，1-8%A2有抗A1A1细胞上有A及A1抗原A2细胞上只有A抗原A1，A2亚型实际上是由H抗原结构造成的，H1，H2是非分支直链，而H3，H4为分支链，A1酶可将H1-4转化为Aa-d，而A2酶只能转化H1，H2为Aa，Ab，抗A1可能是针对Ac，Ad决定簇的。当前13页，总共40页。与抗A反应的相对凝集力

以及每个红细胞上A位点的密度表现型凝集力抗原位点密度（每个红细胞上的A位点X105）A1A2A3AxAendAm,AyAel10096±263±1033±1010±50010.5(7.95～14.56)2.21(1.29～3.53)0.35(0.07～1.0)0.048(0.014～0.10)0.035(0.011～0.044)0.012(0.001～0.019)0.007(0.001～0.014)当前14页，总共40页。亚型频率分布献血者检测确定其它亚型66/440617份（除A214例，A2B35例）A亚型22份AxB11例，AelB3例，Ax3例，Ael2例，Amh2例，A31例B亚型41份Bx11例，B39例，ABx7例，AB35例，Bel3例，Bm2例，ABel1例，ABend1例，ABm1例，Bend1例。CisAB2例,B(A)1例B亚型多于A亚型。最常见亚型为AxB和Bx。有不规则抗体54例引自中国输血杂志2006，19（1）：25当前15页，总共40页。血源“漏检”亚型A3，B3漏检：微孔板法，正反定型相符，忽略混合视野。AxB漏检:误定为B型，医院配血次侧不合退回。Bx漏检：误定为O型，输注给O型，出现明显输血反应。A亚型的不规则抗体通常很弱，属冷抗体，配血很容易漏检。亚型受血者漏检，又未查出抗体，很容易导致输血反应。当前16页，总共40页。血型正定型试验型物质抗原数/细胞（×103）血清中抗-A1抗A、抗AB、抗H、抗A1A14+4+W+4+A，H810-1170无A24+4+3+0A，H240-2904%A32+mf2+mf4+0A，H35很少Ax0/w+1-2+4+0H4几乎全部Am0/±0/±4+0A，H0.2-1.9无AendWkmfWkmf4+0H200(10%凝集)无Ael004+0H0.1-1.4经常A亚型血清学反应特征当前17页，总共40页。主要A亚型：A1、A2亚型抗原数和分泌物质量区别。与抗A试剂血清均可直接凝集。与抗A1试剂凝集：为A1、A1B红细胞，占80%。与抗A1试剂不凝集：为A2、A2B红细胞，占20%。A2、A2B红细胞：10%,25%有抗A1抗体。A2、A2B红细胞：血样中不含抗A1抗体，则不必用抗A1确定其亚型。当前18页，总共40页。亚型有意外抗体2007某院输血科、男、输血前检查，不同试剂出现不同结果。长春博德标清：-A（-）、-B（4+）。北京血站鉴定：A亚B。当前19页，总共40页。辅助检查和吸收放散试验进口试剂：-A(w+)、-B（4+）、-A1(-)、-H(2+w)、Ac(3+)、Bc(-)、Oc(-)、自身(W+)国产长春：-A(-)、-B（4+）吸收试验：抗-A（进口）+3洗病人红细胞各6滴混匀，放4℃冰箱1小时（混匀/15分钟）。放散试验：6洗吸收后红细胞56℃/10分钟，放散液+Ac离心→3+（效价1：8）。诊断：A亚B。建议输B型洗涤红细胞或O型洗涤红细胞比较安全。当前20页，总共40页。B亚型案例2009年02月25日、某医院正常体检血型检测B孔双群，经正反定进一步确证，报告B型。当前21页，总共40页。亚型有意外抗体2004年，某院、女、子宫肌瘤、术前输血科血型检查。戴安娜卡：正定：AB、反定：B，正反不符。长春博德标清：正定：B、反定：B，正反相符。对卡的血型结果提出疑问？经北京血站鉴定：A亚B、血清中有抗A1抗体。报告发回数天后，用户回电质疑：其夫是B型，能生出O型孩子吗？答案：？当前22页，总共40页。亚型有意外抗体2008某院、男、输血前检查，漏检弱A，会误判B型。北京血站鉴定：B（A）型、血清中有抗A1抗体。并做基因检查（其基因型应为B（A）/O型）。家系调查：待查。当前23页，总共40页。亚型有意外抗体当前24页，总共40页。顺式遗传和B(A)顺式AB指从父母的一方同时得到A和B基因，在一条染色体上，而另一条染色体上是从父母中另一方来的O基因。B（A）血型是一种罕见的ABO亚型，其A和B抗原的传递呈顺式遗传方式，同cisAB血型有相似之处。cisAB和B（A）表型的抗原含量各有偏重（其基因型应为B（A）/O型）。注意的是：含有不规则抗体的cisAB型、B（A）型，不宜作为普通供血者。若为受血者，除输同型的cisAB型、B（A）型外，还可输O型洗涤红细胞及AB型血浆。当前25页，总共40页。正反定型不一致，则需要附加试剂进一步鉴定正定型中增加抗-A1、抗-H、抗-AB。抗-AB用来确认弱A、弱B抗原。抗A1用于鉴定A亚型。抗-H用于鉴定亚型及孟买型。反定型试验中增加O细胞，用于鉴定是否存在ABO系统以外的同种抗体对定型的影响。吸收试验、放散试验证实抗原存在。当前26页，总共40页。ABO以外的同种抗体对定型的影响影响反定型的血型抗体，抗-M抗体多见试管法用O细胞与病人血浆离心看结果有凝集，即ABO以外抗体当前27页，总共40页。Am亚型及家系调查正定型：抗A(-)抗B(-)抗A1(-)抗AB(w+)反定型：Ac(-)Bc(3+)Oc(-)自身(-)血型物质测定：A、H物质吸收放散：证实：A家系：其父A其母O，子代:2个Am2个A推断其父血型基因是A/Am,其母血型基因是O/O当前28页，总共40页。A3型特征：与抗-A试剂血清出现混合视野与抗-AB试剂血清出现混合视野与抗A1不凝集与抗-H反应偶尔血清中有抗-A1抗体。分泌型有A和H物质。当前29页，总共40页。血站对亚型结果判断血站对某些血型鉴定结果为：“暂定”或“初定”疑问：由于病人有过输血或治疗。某些疾病或治疗影响抗体减弱或抗原生成、减弱。一般亚型可以用抗A1检查，若阴性可以定为亚型。但新生儿本身抗原就弱，用抗A1确定亚型时，最好用正常的新生儿红细胞用抗A1对照后，再确定结果（保证抗A1抗体的准确性）。当前30页，总共40页。Ax型特征：填空与抗-A试剂血清出现（）与抗-AB试剂血清出现（）与抗A1试剂血清（）与抗-H试剂血清反应（）其血清中是否有抗-A1抗体（）。分泌型有A（）H（）物质。简述吸收放散试验？如何输血？当前31页，总共40页。Oh(孟买）型特征：血型检定：正定：-A（-）、-B（-）、-AB（-）、-H（-)，反定：Ac+、Bc+、Oc+抗筛：Ⅰ(+）、Ⅱ（+）、Ⅲ（+）、自身（-）鉴别Oh型、O型？Oh型输血？当前32页，总共40页。总结：亚型鉴定试验红细胞与抗A及抗A1的凝集强度。红细胞与抗AB的凝集强度。红细胞上H抗原活性强弱血清中是否存在抗A1抗体。分泌型人唾液中A及H物质的存在。吸收放散试验证明A抗原的存在。家系调查DNA当前33页，总共40页。临床输血技术规范[2000]

184号卫生部关于《临床输血技术规范》第十五条

输血科（血库）要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO血型（正、反定型)除新生儿外，ABO血型检测必须做正反定型ABO正反定型不一致时重复试验，排除技术原因询问患者病史，包括诊断、输血史等不可根据自己经验，随意下结论当前34页，总共40页。《临床输血技术规范》输血前检查“三保险”ABO血型：相合99.4%，RHD：相合99.8%抗体筛查：相合99.94%交叉配血：相合99.95%当前35页，总共40页。疑难血型/配血，紧急输血怎么办？输血前检查（血型、抗筛、配血）与常规血液血检查不同，如：Hb、WBC、PT可直接报结果。血型报告是综合分析结果（诊断？）不是直接报告结果。如：正定（AB)、反定（O）→直接结果几分钟可报告。分析结果（到底是什么血型）？许多补充试验→几小时→几天→外送。输血科与医生沟通：血型报告O/A/B?相当于临床诊断休克/原因待查（？）疑似非典。政策依据《临床技术规范》第10条，对稀有血型患者（疑难必稀有）输血原则：自身输血、同型输血、配合型输血。配合性输血（没有要求供受同型），不必为纠缠血型而耽误输血抢救。当前36页，总共40页。疑难血型/配血，紧急输血怎么办？例：血液病、亚型（疑难）血型：A?O?→进一步确定血型：吸收、放散、血型物质、抗-H、家系、DNA