高二生物动物细胞融合与单克隆抗体课件

高二生物动物细胞融合与单克隆抗体课件第一页，共二十三页，2022年，8月28日

1970年，有两位科学家做了一个人—

鼠细胞融合实验，以证明细胞膜上的蛋白

质分子是运动的。那么，如何实现人—鼠

细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什

么用途呢？这就是今天我们这节课学习的

内容。第二页，共二十三页，2022年，8月28日②动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交

或融合过程有什么影响？③植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有

哪些？离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去

除细胞壁和再生出细胞壁。①植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能，只能得到杂交细胞第三页，共二十三页，2022年，8月28日⑤为什么要用灭活的病毒？病毒一般对生物体是有伤害的。⑥动物细胞融合有什么意义？突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为

可能。仙台病毒物理或化学方法丧失感染活性保留融合活性④动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他

方法吗？能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导第四页，共二十三页，2022年，8月28日细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒也称细胞杂交，指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。第五页，共二十三页，2022年，8月28日灭活的病毒病毒表面含有

的糖蛋白和一些酶

能够与细胞膜上的

糖蛋白发生作用，

使细胞互相凝聚，

细胞膜上的蛋白质

分子和脂质分子重

新排布，细胞膜打

开,细胞发生融合。两个核的融合是在

杂种细胞第一次有

丝分裂时进行的动物

细胞

A诱导，融合杂种细胞AB有丝分裂（膜融合、

质融合）（核融合）多核体动物细胞B注意：动物细胞的融

合也需要把多个两种

细胞放在一起，让它

们随机融合后，再从

中筛选杂交细胞第六页，共二十三页，2022年，8月28日⑴意义：突破了有性杂交方法的局限，使远

缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）

成为可能。形成具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞⑵应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、

肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。第七页，共二十三页，2022年，8月28日比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合过程原理细胞融合的过程诱导方法用途细胞膜的流动性、

细胞的全能性细胞膜的流动性去除细胞壁后

诱导原生质体融合使细胞分散后

诱导细胞融合物理、化学方法物理、化学、生物方法（灭活的病毒）获得杂种植株主要用于制备单克隆抗体细胞融合，

植物组织培养细胞融合第八页，共二十三页，2022年，8月28日1、什么是抗体？抗体是由何种细胞产生的？2、抗体是如何产生的？3、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？第九页，共二十三页，2022年，8月28日4、一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？用纯制的抗原多次接种于适当的成年健康动物，则激其产生免疫应答，血清中含有大量特异性抗体，又称抗血清或免疫血清。特异性差、纯度低、产量低、反应不够灵敏5、简述获得抗体的传统途径？这种方法获得的抗体有什么缺陷？第十页，共二十三页，2022年，8月28日⑴B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异

性抗体。

⑵每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。

⑶在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能

无限增殖的。第十一页，共二十三页，2022年，8月28日由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。第十二页，共二十三页，2022年，8月28日提示2：

我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：

有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和

肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？提示1：

仅用细胞培养技术可行吗？第十三页，共二十三页，2022年，8月28日一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体

骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞动物细胞培养技术动物细胞融合单克

隆抗体1、设计方案：（二）、单克隆抗体的制备1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验

（在1984年获诺贝尔奖）第十四页，共二十三页，2022年，8月28日产生抗体无限增殖动物细胞培养利用B淋巴细胞

的功能利用骨髓瘤细胞

的特性利用

技术将两种细胞融合获得具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用

技术大量培养

杂交瘤细胞动物细胞融合第十五页，共二十三页，2022年，8月28日阅读教材，思考下列问题：2.单克隆抗体制备过程诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞？杂交瘤细胞有何优点？注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选？大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法是什么？第十六页，共二十三页，2022年，8月28日动物细胞融合技术B、BB、B瘤、瘤瘤、瘤（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B淋巴细胞注射抗原融合筛选的培养基克隆注射到小鼠腹腔体外培养（二选）（克隆化培养和抗体检测）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞第十七页，共二十三页，2022年，8月28日B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体第一次筛选第二次筛选经免疫的小鼠提取第十八页，共二十三页，2022年，8月28日细胞融合和动物细胞培养杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能足够数量的特异性抗体。第十九页，共二十三页，2022年，8月28日与常规抗体相比，单克隆抗体特异性

强，灵敏度高，产量高，优越性十分明显。第二十页，共二十三页，2022年，8月28日

“生物导弹”＝抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。②作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合。优点：准确、高效、简易、快速①在基础理论研究中具有重要意义③用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗第二十一页，共二十三页，2022年，8月28日A巩固练习1、

科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融

合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单

克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）

A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞第二十二页，共二十三页，2022年，8月28日4、

单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B

淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出

杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的