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分子生大学生命科学的分子生物学(第六版 第五篇:方第二篇 组的维DNA和RNA的结在从一代细胞到下一代细胞的过DNA 、保持和改第二篇 组的维第6章:DNA和RNA 第8章:DNA的第9章:DNA的突变和修第10章:分子水平上的同源重第11章:位点特异性重组和DNA第8DNA本章内DNA合成的化学基DNA聚合酶的作用叉DNA聚合酶的叉上的DNA合 结合和结细胞中细胞中DNA每个生物有其特有的一套DNA聚合酶Ecoli至少有5种DNA聚合DNA聚合酶III负责E.coli DNA聚合酶Ecoli的DNA聚合酶专门用于去除起始DNA合成所需的RNA具有5’外切核酸酶的活能去除DNA合成起始位点上游的RNA或DNA也能去除RNAseH所不能除去的RNA-DNA连接延伸能力不每次结合仅能添加20-100个核苷其合成较短片段的能力使其非合成先被RNA引物占据的短区域(<10核苷酸每个生物有其特有的一套DNA聚合酶真核细胞有多种DNA真核细胞中通常有15 至关重要的有三DNA聚合酶,DNA聚合酶和DNA聚合酶/DNA聚合酶α/引物四亚基(两个亚基DNA聚合酶α、两个亚基引物酶)参与DNA新链的起始DNA聚合酶δ或DNA聚合酶ε聚合酶转DNA聚合酶δ或DNA聚合酶εDNA聚合酶α/引物酶的过DNADNA聚合酶或DNA聚合酶取代DNA聚合酶/引物DNADNA聚合酶在没有其他蛋白存在的情况下仅合成20100个核苷酸后就从模板上脱离DNA聚合酶在 在于DNA聚合酶与滑动夹之滑动夹多亚基蛋白、组装成“油炸圈孔可以环绕双螺旋并留下一层1-2个水分子的空间沿DNA双螺旋滑动,在 叉处还与DNA聚合酶结合聚合酶-滑动夹复合物沿DNA高效与滑动夹之间的相互作DNA聚合酶从DNA上释放单链DNA模 完成DNA聚合酶被释放,但滑动夹不立即脱滑动夹招募其他必须在新合成DNA处作如:真核细胞染色质组装的滑动夹滑动夹蛋白、细菌、酵母及人 体系中的虽然如此,形成滑动夹的亚基数目不E.coli的滑动夹由两个拷贝的β蛋白T4噬菌体的滑动夹是gp45真核滑动夹是PCNA蛋白的三聚所有生物中都有滑动夹,并具滑动夹与DNA聚合酶的结合DNA聚合酶与滑动夹的了DNA聚合酶从DNA上完全脱滑动夹沿DNA 叉处与DNA聚合酶紧密结而聚合酶与引物–模板接头结合DNA聚合酶每合成20100个核苷酸就从模板上释放通过保持与DNA密接触滑动夹使DNA聚合酶迅速重新结合到同一引物–模板接头上滑动夹环绕DNA并结合DNA聚合酶活性位点从DNA的3’-OH处脱落,与滑动夹的结合防止聚合酶从DNA上释放滑动夹装载器打开并装载在DNA滑动夹装载器一种特殊蛋白复合催化滑动夹的打开并将其装载在DNA滑动夹装载器也催化滑动夹从DNA上的移除滑动夹装载器 滑
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