薄层色谱法内容

文件编号薄层色谱法颁发部门XXXXXXX/X总页数执行日期编制者审核者批准者编制日期审核日期批准日期目的：建立薄层色谱法的标准操作规程。范围：QC化验室。责任：QC化验员。内容：本程序适用于各种药品的鉴别、限度检查和含量测定。4.1定义与原则：4.1.l吸附或载体（固体相）涂布在玻璃板或塑料板上，使成为一均匀薄层，以适当溶剂系统为流动相（展开剂），依靠毛细管作用，使展开剂从点有试样的薄层板一端自然展开一定距离。利用试样各组分在固定相和流动相之间反复吸附、分配、平衡的过程达到分离的目的。4.1.2除另有规定者外，应按《中国药典（1995年版）》附录要求测定。4.1.3各样品均应与对照物质同时对照测定。4.1.4含量测定试验，应严格定量操作。4.1.5各样品的层析流动相、显色剂定于中国药典各品种或有关标准项下。4.2仪器与材料4.2.1玻板：供涂布薄层用。要求清洁、光滑、平整、按测定要求选择大小适宜的玻板。4.2.2吸附剂或载体：硅胶（G：含石膏；H：无粘合剂；F：254、365nm波长处激发生成萤光物质）、氧化铝（分中、酸、碱性）、硅藻土等。4.2.3粘合剂：煅石膏（10-15%），羟甲基纤维素（CMC-Na）水溶液（0.5-1.0%）或2.0%贮备液。4.2.4涂布器：应能使吸附剂或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。4.2.5点样器：微量注射器或定量毛细管。4.2.6展开室：底平、双槽、封密的玻璃缸或合适的玻璃标本缸。4.3操作方法：4.3.1薄层制备：除另有规定外，将一份吸附剂和三份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳移动涂布器进行涂布（厚度为0.2-0.3mm），制得的薄层板置水平台上，于室温下晾干，在110℃烘30分钟，即置干燥器中备用。亦可使用前活化。4.3.2点样：供试品和对照品以适当溶剂配制成一定浓度的溶液，用微量注射器或毛细管吸取一定体积溶液定量点于薄层板上。供试品溶液以分次点加，每次点加后，待其自然干燥，低温烘干或经湿热气流吹干。点样直径一般为2-4mm，通常为圆点。条形点样宽约3mm，长1-10cm不等，点样基线距底为2.0cm，点样间距为1.5-2.0cm。4.3.3展开：按规定比例配制展开剂，展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条，一端侵入展开剂中，密封室顶的盖，使系统平衡或按有关规定操作。将点好样品薄层板放入展开室的展开剂中，浸入展开剂的深度为距离层板底边0.5-1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，待展开至规定距离（一般为7-15cm）取出薄层板，晾干，按该品种项下的规定检测。4.4检测、记录与报告4.4.1检测：按该品种项下的规定检测。有颜色或萤光的色谱斑点直接在日光或紫外光灯下检视，无色的薄层谱板可喷以各种适当显色剂显色，或以试剂蒸汽熏后观察或在薄层色谱中用加有荧光物质的薄层硅胶，采用荧光熄灭法检视。鉴别、限度检查可比较供试品和对照品的主斑点RT值，面积及颜色强度。含量测定将主斑点洗脱后用适当方法测定，或直接用薄层扫描仪在薄层板上扫描测定。4.4.2记录：按薄层色谱法原始记录要求逐项记录。4.4.3报告：对外出报告时采用下列形式：鉴别符合规定（指单一成分或多种成分）供试品