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水产饲料原料质量控制探讨刘天骥提纲前言水产饲料原料标准体系制定水产饲料原料合格供应厂商评估与筛选水产饲料原料检化验控制水产饲料原料的接收水产饲料原料的贮存常用水产饲料原料的质量控制一、前言随着饲料工业的快速发展,规模饲料生产企业在饲料配方技术、加工设备与工艺上的差距越来越小,饲料产品同质化趋势越来越强,但企业经营与产品质量差异始终存在。据统计分析表明,饲料原料占饲料总成本的80%以上,饲料产品质量差异40%-70%来自原料质量的差异。因此,某种意义上来说,经营饲料就是经营饲料原料。因水产动物对蛋白需求比畜禽高,蛋白原料为水产饲料主要原料,而在08年的“三聚氰胺”风波中,饲料原料的掺杂使假现象已有暴露。能量原料中的油脂质量也难控制,水产饲料主要使用不饱和脂肪酸高的油脂,如鱼油和植物油,高不饱和脂肪酸易氧化。动物蛋白原料高蛋白、高脂肪(如鱼粉、蚕蛹等)质量也难以控制,水产饲料原料质量控制克不容缓。水产饲料原料质量保证重在标准体系的建立与制度的落实上。包括水产饲料原料标准体系建立、合格供应厂商评估与筛选、原料接收、检化验方案、原料储存与合理使用等一系列质量控制措施。二、水产饲料原料标准体系制定水产饲料原料标准体系包括:采样标准、原料标准、检化验标准、贮存标准等。标准是企业技术性法规,标准制定应参照国家标准或行业标准,结合企业实际与标准制定工作流程认真对待,标准一旦制定必须严格执行。1原料的采购、验收标准标准的制定必须具有科学性且符合本企业要求,它需要很强的技巧,太严买不到所需的原料,无谓地增加质量成本,太松又会失去品控的意义,控制不了原料质量。具体可参照每年农业部颁发的饲料原料营养价值成分表或国家标准、行业标准、企业标准,因地制宜。采购员必须掌握和了解水产饲料原料的质量性能和质量标准,必要时到原料产地或生产厂家了解原料特性、加工工艺等行情。而标准的制定者必须通晓饲料原料及水产动物营养学知识。从三个方面来考虑:感观指标、卫生指标和营养指标。卫生指标必须执行国家或行业强制标准,而营养指标中哪些项目具有弹性可以让步接收,让步接收的标准是什么?谁有权力决定让步接收?哪些无任何余地;哪些成分必须检测,每一关都至关重要,标准制定应明确(合格、不合格、让步接收、拒收)。标准制定后还必须保持标准的严肃性,不能随意更改。标准的修订根据企业实际采购执行情况(检测数据统计)、行业新标准或生产要求进行。2采样标准必须学习国际国内的先进采样方法,而且还要因材取法。应注意五点:一是明确规定是品管工作人员采样。二是固体饲料原料采用对角线法采样,颗粒状饲料应采用随机采样法,抽样时按每个堆积立面“X”或“W”形抽样,抽样总袋数不少于20袋。液体原料经搅拌混匀后采上中下综合样,采样量一般为1000g,每一样品和检测结果代表的单批数量不超过120吨。三是感观性质相差较大的原料不允许混合采样,应分档次进行;不同厂家,不同批号,不同等级产品不可以混合采样。四是所采样要四分法分为两份(一份检化验,一份备存),贮存于干燥、避光条件下的贮存室内,贮存期为保质期后两个月。五是所有样品都要有标签标示:原料名称、供应厂商、产地、进货日期、数量等。3必要的制度及相关表格检化验制度、岗位责任制度、产品留样观察制度及原料贮存、使用情况检查表、检化验操作规程等等,都是很有效的控制质量办法。参与质量管理的各个部门及生产线,应具备所需检验器具、记录簿、样签等采样工具等。三、水产饲料原料合格供应厂商评估与筛选水产饲料原料质量及供应要稳定,合格供应厂商应稳定。饲料企业应建立合格供应厂商制度。先了解原料供应厂商的规模、信誉、质量管理、加工工艺等,通过对供应厂商既往供货质量记录、价格、供货及时性、实力等因素进行评审,由采购部和品管部共同提出合格供应厂商名单,与产品线经理及总经理共同评审。合格供应厂商名单每年都要评审,质量每次都合格且供货及时、信誉好的可建立长期战略合作伙伴,而对于供货多次不合格或规模小、质量不稳定的供应厂商应淘汰,集团化企业也可建立黑名单制度,即对恶意掺假的供应商列入黑名单,本公司及集团所有公司永不与其发生供应关系。四、水产饲料原料检化验控制1.强化品控意识:强化化验人员的品控意识,建立相关的检化验制度,学习国际国内最新的快速、准确的检化验方法。
2.常用的鉴定方法(1)感官鉴定法色形纯正程度、均匀度、味道(非化学物质的口感)、气味、触感等。感官指标严重不合格没必要进行化学分析,直接拒收。(2)物理学鉴定方法筛选法、容重测定法、比重测定法、水淘汰法。(3)化学鉴定法定性分析、定量分析。(4)物理化学分析鉴定法近红外分析法。(5)微生物学鉴定法
(6)动物实验法饲养试验、生长试验、消化、代谢试验、适口性试验等。3.检化验应注意的事项:检化验工作不仅是提供判断原料合格与否的理化指标,同时也为原料采购中合格供应商评估提供依据,更为重要的是为配方设计提供实际营养数据库。对重要营养指标提供动态分析图表,以便原料的合理使用。五、水产饲料原料的接收1、强化采购员素质采购员应掌握原料质量判断标准及感官检验方法,同时掌握原料信息渠道,确保稳定的货源,在保证质量的前提下,尽量选用成本低、运输和储存费用相对较少的原料,且要了解原料的库存,仓储和用量情况,防止造成积压和产、供、销脱节或停产,杜绝假冒伪劣原料。2、控制采购渠道采购渠道不宜多变,一旦确定合格供应厂商,不宜经常更换厂商,以便使原料质量稳定,筛选信誉好、质量优的大型企业,建立长期业务往来,可通过合同的方式约束双方行为,以确保饲料原料的质量。3、原料的接收程序感官指标合格,进行理化指标检测,达到标准的接收,未能达到标准的虽判定为不合格,但有两种处理:让步接收与拒收。让步接收的原则:
A检测指标在拒收标准范围内,对产品质量影响不明显,且生产又急需。
B不超过库存量的1/3。
C价格合理,有价值采购优势,且有搭配使用方案。感观不合格的产品不需经过检测拒收,卫生指标达不到标准的一律拒收,掺杂使假的一律拒收并列入采购黑名单,理化指标为拒收标准的拒收。4、签定质量保证协议包括原料名称、产地、规格、等级、运输方式、运输过程中的质量保证手段、原料质量的检测方式及检测结果的认可标准、质量事故的处理规定等。必要时签订质量承诺书。六、水产饲料原料的贮存原料应贮存在干燥、阴凉、通风的地方,保持良好的温、湿度。原料库要专职管理,专人负责。做好卫生消毒工作。勤打扫、勤翻料,防鼠、昆虫、鸟害。禁止与腐蚀性易潮湿的物品放在一起,避光防止脂肪酸的氧化及对脂溶性维生素的破坏、变性。
1.油脂贮存器一定要密闭并及早加入抗氧化剂。
2.严格执行先进先出的原则,米糠、蚕蛹、鱼粉等高脂类原料库存时间不宜太长。
3.定期消毒。定期打扫饲料加工设备、储存仓,严格执行消毒计划。4.原料入库要分类垛放,下有垫板,各垛间应留有间隙。并做好原料标签,包括品名、时间、进货数量、来源、并按顺序垛放。
5.霉菌的检测与控制原料中的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、镰刀霉毒素。霉菌毒素可通过高压液相色谱和薄层层析法进行定量分析。但多数饲料厂作不了这种分析,一种较为适用的方法是利用紫外线法测定原料是否被黄曲霉毒素等毒素污染(定性),该方法简单易操作、不用投入大量的资金。常用的脱毒方法有物理分离、热处理、微生物降解、辐射、生物酶技术等。应注意水产饲料原料在贮存过程质量的变化:营养指标的变化,如水分、脂肪氧化、新鲜度(VBN、组胺等)。卫生指标的变化,主要是毒素的累积变化。七、常用水产饲料原料的质量控制鱼粉鱼粉因原料的来源、加工方法的不同而在质量上存在很大的差异。市场上掺假物的存在、以劣充好也影响了鱼粉的质量。因此,除常规成份分析外,选用适宜指标判定鱼粉质量具有重要的意义。1.蛋白质新鲜度指标——组胺和挥发性盐基氮组胺是鱼粉中组氨酸经微生物脱羧反应转变而成的一种胺类物质。鱼粉中组胺含量越高,表明受微生物污染越严重。挥发性盐基氮VBN是指鱼粉由于细菌的作用,在腐败的过程中,使蛋白质分解产生氨及胺类含氮物质。鱼粉中组胺与挥发性盐基氮含量之间有相应的对应关系:即组胺含量越高,则挥发性盐基氮的含量就越高;反之组胺含量越低,挥发性盐基氮的含量就越低。我国GB/T19164-2003鱼粉国家标准规定特级鱼粉组胺含量≤300mg/kg,挥发性盐基氮含量≤110mg/100g;一级鱼粉组胺含量≤500mg/kg;挥发性盐基氮含量≤130mg/100g。鱼粉在加热过程中,游离组胺酸或组胺和酪蛋白结合形成组胺酸的酪蛋白混合物(肌胃糜烂素),造成鸡的肌胃糜烂或溃疡。对有胃鱼也易造成胃糜烂及体色变化。2.脂肪新鲜度指标——酸价酸价是评价鱼粉脂肪新鲜度的重要指标之一。鱼粉的水分、脂肪含量高及保存条件差等因素都将加快脂肪氧化酸败,导致产生不良气味,酸价升高,影响鱼粉质量。酸价越高,表明鱼粉脂肪水解程度越严重。我国GB/T19164-2003鱼粉国家标准规定特级鱼粉酸价≤3mg/g,一级鱼粉酸价≤5mg/g。3.胃蛋白酶消化率胃蛋白酶消化率是评价鱼粉质量的重要指标,它表示可被胃蛋白酶分解的蛋白质与粗蛋白的比例。测定这项指标能鉴别鱼粉中是否掺入其他高蛋白而不容易被动物吸收的原料如羽毛粉、皮革粉等。掺入这些原料的鱼粉,其粗蛋白质、真蛋白质含量比较高,但胃蛋白酶的消化率往往较低。我国GB/T19164-2003鱼粉国家标准规定特级鱼粉胃蛋白酶消化率88%~90%,一级鱼粉为86%~88%;秘鲁鱼粉标准中规定优质鱼粉的胃蛋白酶消化率应为94%~95%。4.氨基酸含量在实际生产中,由于掺假物的存在,粗蛋白质含量高的鱼粉品质不一定好。使用氨基酸分析仪可以准确分析鱼粉各种氨基酸含量,从而判定其质量。优质鱼粉氨基酸总量在60%~68%,所含的11种必需氨基酸占总氨基酸(17种)的51%~55%,且氨基酸组成相对稳定。掺入水解羽毛粉,丝氨酸含量明显提高,可由正常的1.6%提高到3%,而蛋氨酸和赖氨酸的含量明显降低;掺入皮革粉,甘氨酸、精氨酸、脯氨酸含量明显增加;掺入血粉后,变化最明显的是亮氨酸,其次为组氨酸。豆粕大豆中的抗营养因子较多,有热敏性的胰蛋白酶抑制因子、尿酶及大豆凝集素,也有热稳定性的抗原蛋白、植酸、寡糖等。豆粕经高温(膨化)、溶剂浸提能消除部份抗营养因子。因此,豆粕不仅要检测蛋白质、氨基酸、水分等指标,其他如尿酶的活性、蛋白质溶解度等也需检测。1.尿酶活性通常以尿酶活性来表示豆粕中胰蛋白酶抑制因子等抗营养因子的破坏程度。尿酶活性高,说明豆粕中的抗营养因子没有得到有效的破坏;尿酶活性太低,说明豆粕受热过度,豆粕中的赖氨酸、精氨酸、胱氨酸等因受热过度而遭到破坏,营养价值降低。尿酶活性定义为在30℃和pH为7的条件下,每分钟每克豆粕制品分解尿素后,所释放的氨态氮的毫升数。美国饲料工业协会建议豆粕尿酶值为0.05~0.2,巴西为0.01~0.3;我国GB/T19541-2004饲用大豆粕标准规定,尿素酶活性≤0.3。内控标准为0.05-0.3。2.蛋白质溶解度蛋白质溶解度是指大豆粕样品在规定的条件下,可溶于0.2%氢氧化钾溶液中的粗蛋白质含量占样品中总粗蛋白质量的质量百分数,这是评估大豆加工过度或不足的有效方法。高温能使豆粕中的氨基酸与还原性化合物发生美拉德发应,从而降低了蛋白质的溶解度。我国GB/T19541-2004饲用大豆粕的国家标准规定0.2%氢氧化钾蛋白质溶解度≥70%。内控标准为70%-85%。另外,粗纤维也是质量控制指标,如果不控制粗纤维指标,豆粕加工厂就会加入豆皮。卫生指标中控制霉菌<5×104。蚕蛹蚕蛹(silkwormchrysalis)系桑蚕从幼虫向成虫过渡阶段的虫体。蚕蛹中含有一半以上的粗蛋白质和1/4以上的粗脂肪(表1),既可用作蛋白质补充料,又可补充畜禽饲料能量之不足。但蚕蛹中含不饱和脂肪酸较多,蚕蛹油属半干性油,含亚油酸(1inoleicacid)36%~49%、亚麻酸(1inolenicacid)21%~35%,碱价190~194,碘价130~132,酸价8.1~7.2,过夏陈旧后呈白色或褐色,不便贮存。蚕蛹中含有几丁质(chitin,又名甲壳质),是构成成虫及甲壳类动物外壳的主要成分,不易消化,在化验时作为“粗纤维”测值表现出来,但纯净的蚕蛹不应含有大量粗纤维,凡粗纤维含量过多者多系混杂有异物。蚕蛹中富含各种限制性氨基酸,可与鱼粉媲美,不仅富含赖氨酸,而含硫氨基酸,色氨酸含量也比鱼粉约高出1倍。必需氨基酸总量占总氨基酸的42.2%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比例为0.73,不脱脂蚕蛹的有效能值与鱼粉的有效能值近似,是一种高能量、高蛋白质饲料。表1.蚕蛹(全脂)营养成分:粗蛋白%粗脂肪%水分%钙%总磷%53.950.58粗灰分%赖氨酸%蛋氨酸%胱氨酸%色氨酸%2.93.061.301.441.25碳水化合物苏氨酸%组氨酸%亮氨酸%异亮氨酸%7.8%1.650.963.02,23蚕蛹因品种、加工或储存的差异,因此,质量差异也较大,粗蛋白从50%到60%,氨基酸含量也有差异。采购时应以新鲜、水分低、蛹完全且无僵蚕的优质蚕蛹。感观指标:呈黄褐色蛹粒状,有少量碎片,色泽一致,无发酵霉变、结块、哈味。理化指标:CP≥50%,水分≤10%,粗纤维≤4%,粗灰分≤4%。卫生指标:细菌总数2×106个/克,。棉粕表2.棉籽蛋白、棉籽粕及大豆粕的氨基酸组成%氨基酸组成棉籽蛋白a棉籽粕b大豆粕c赖氨酸2.331.592.45蛋氨酸0.76
0.450.64胱氨酸1.080.82
0.66苏氨酸1.681.311.88亮氨酸3.102.353.20异亮氨酸1.821.301.76苯丙氨酸2.86精氨酸6.124.303.12组氨酸1.621.061.07缬氨酸2.401.741.95脯氨酸1.872.18
2.18酪氨酸
1.481.191.53注:a.国家饲料质量监督体验中心检测的数据结果;b、c.参照中国饲料成分营养价值表(2000年第11版)菜粕菜粕依菜籽品种及加工工艺而营养价值差异较大,依品种分有双低与普通菜籽之分,依加工工艺分有压榨、浸提、预压浸提之分。根据NY/T417-2000饲料用低硫苷菜粕标准,粗蛋白分为三级,卫生指标中要求异硫氰酸酯(ITC)+恶唑烷硫酮(OZT)均小于4000mg/kg,霉菌总数小于5×104。在采购过程中控制的营养指标仍为粗蛋白、粗纤维(灰分)、水分,加工质量关注蛋白溶解度,200型:35%≤PS≤55%,混合型:17%≤PS≤35%.不同加工工艺对赖氨酸水平影响大。花生粕花生粕适口性好、粗蛋白高、精氨酸含量高,但赖氨酸较低。注意控制黄曲霉毒素B1,粗蛋白要求≥45%,黄曲霉B1小于50ppb。玉米酒糟(DDGS)DDGS是玉米等谷物生产酒精中的一种副产物。根据干燥浓缩蒸馏废液的不同可分为干酒精糟(DDG)、可溶干酒精糟(DDS)和干酒精糟液(DDGS)。DDGS质量受酒精的生产工艺流程、谷物的发酵方法及副产品干燥方法等因素的影响。DDGS的颜色有金黄色和暗褐色,金黄色最好,不应含黑色小颗粒,应有发酵的气味,尝之微酸。DDGS颜色和气味与其营养成分密切相关,深颜色的DDGS营养价值低于浅颜色的DDGS,深颜色的DDGS通常伴有糊焦味或者烟熏味,会影响饲料的适口性。DDGS在烘干过程中往往会造成加热过度,加热过度容易发生美拉德发应,降低赖氨酸的利用率,吕明斌等研究表明,加热过度,赖氨酸含量由烘干前的0.82%降低到0.3%左右,发现中性洗涤纤维NDF与赖氨酸有很好的相关性。因此,NDF可以作为饲料厂日常检测DDGS热过度的指标。一般要求NDF≤32%为合格,NDF≤35%为最低质量要求。DDGS应关注卫生指标(霉菌毒素),发酵过程并不能破坏霉菌毒素,因加工酒精过程中,一吨玉米等谷物产生30%左右的DDGS,因此霉菌毒素反而使其得到“浓缩”,DDGS中霉菌毒素的含量是谷物中的三倍左右。表3.DDGS霉菌毒素检测结果(郭福存)种类样品平均值(μg/kg)样品最大值(μg/kg)黄曲霉毒素1326.3T2毒素6994.7玉米赤霉烯酮744.51423.1赭曲霉毒素82.5162.8烟曲霉毒素19307380呕吐毒素368016750卫生指标控制:黄曲霉毒素B1≤100ppb,呕吐毒素鱼油鱼油中富含高不饱和脂肪酸,为水产饲料必需脂肪酸的主要来源,因海水鱼油资源紧缺,且高不饱和脂肪酸易氧化,鱼油的质量控制按行业标准SC/T3502-2000的要求为水分、酸价、过氧化值、不皂化物、碘价等。水分:挥发物及杂质的存在,不利于鱼油贮存,鱼油易氧化变质。酸价(AV)与过氧化值(POV)的质量是评定鱼油质量的重要指标,酸价是评定鱼油酸败的程度,但如果在鱼油中掺入一定量的KOH溶液,酸价指标就会较低且稳定。过氧化值(POV),是反映鱼油氧化状况的一项重要指标,氢过氧化物(POV)是油脂氧化的第一个中间产物,称为初级氧化产物,是反映氧化初期状况的一项重要指标,其测定有多种方法,习惯上采用碘量法。碘量法易受样品颜色和空气中氧气干扰,测定时应注意。当氧化到一定程度,特别是过度氧化后(20meq/kg)此值反而下降。羰基化合物(TBARS)由初级氧化产物分解而来,称为次级氧化产物,其与硫代巴比妥酸(TBA)产生颜色反应,可在532nm测吸光值计算出羰基化合物含量。习惯上称之为硫代巴比妥酸反应物值(TBARS),要求TBA值≤5ppm。以丙二醛为代表的醛类羰基化合物会继续氧化成酸,分析其影响时应注意。不皂化物指油脂皂化时,与碱不起作用,不溶于水的物质,包括甾醇、脂溶性维生素和色素等。碘价(I.V) 主要反映脂肪酸的不饱和状况。碘价越高,说明不饱程度越高,鱼油是高度不饱和的,检验它的碘值是衡量原料较为方便的,适宜的指标。鉴于单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸碘价的差异不大。如果掺入大豆油(碘价120-140)或菜籽油(碘价110-126)等植物油,则碘价的参考值失去判定的方向。表4.鱼油质量标准指标精制鱼油(中国)粗鱼油(中国)日本标准英国标准台湾标准一级二级一级二级水分及挥发物(%≤)0.50.1酸价/(mgKOH/g油)≤1.02.0815282过氧化值/(mmol/kg)≤5.06.06105610不皂化物%≤1.03.0--杂质(%)≤0.5碘价/(克碘/100g油)≥160100基于以上原因,鱼油检测还应分析其脂肪酸组成才能进一步鉴定是否掺假。利用GB/T17376-1998和GB/T17377-1998气相色谱法检测鱼油脂肪酸含量。鱼油的脂肪酸组成中高不饱和脂肪酸(HUFA)较高,判断是否为海水鱼油的三个标准:=1\*GB3①二十碳五烯酸(EPA)+二十二碳六烯酸(DHA)的总量要求23-30%;=2\*GB3②DHA/EPA=1/1-1.8,=3\*GB3③DHA≥10%.表5.秘鲁鱼油脂肪酸组成脂肪酸名称含量(%)脂肪酸名称含量(%)肉豆蔻酸C14:07.46亚麻酸C18:30.45棕榈酸C16:015.12Y-亚麻酸Y-C18:30.32棕榈油酸C16:18.56二十碳烯酸C20:11.05硬脂酸C18:03.08花生四烯酸C20:41.30油酸C18:16.78EPAC20:518.53亚油酸C18:20.87DHAC22:611.28
仪器名称:Aglilent4890D气相色谱仪表6.美国鱼油脂肪酸组成脂肪酸名称含量(%)脂肪酸名称含量(%)肉豆蔻酸C14:09.47亚麻酸C18:31.20棕榈酸C16:017.40Y-亚麻酸Y-C18:30.46棕榈油酸C16:111.34二十碳烯酸C20:10.70硬脂酸C18:01.88花生四烯酸C20:41.30油酸C18:14.79EPAC20:514.53亚油酸C18:20.08DHAC22:610.73
仪器名称:Aglilent4890D气相色谱仪引文:略
酵母培养物XP对团头鲂(Megalobramaamblycephala)肠道粘膜绒毛的影响李高锋收稿日期:作者简介:李高锋(1983-),男,汉,河南省襄城县人,广州市澳洋实业有限公司,硕士,主要从事水产动物营养与饲料学方面的研究。E-mail:lgf1983@126.com作者简介:叶元土(1964-),男,汉,四川广安人,收稿日期:作者简介:李高锋(1983-),男,汉,河南省襄城县人,广州市澳洋实业有限公司,硕士,主要从事水产动物营养与饲料学方面的研究。E-mail:lgf1983@126.com作者简介:叶元土(1964-),男,汉,四川广安人,苏州大学基础医学与生物科学学院,教授,主要从事水产动物营养与饲料学方面的研究。E-mail:yeyuant@*通讯作者:叶元土,E-mail:yeyuant@1.苏州大学基础医学与生物科学学院,苏州215123;2.广州市澳洋实业有限公司,广州5105453;3.达农威生物发酵工程技术有限公司,深圳518038动物的肠道不仅仅是动物的营养器官,而是集内分泌、免疫、屏障和营养等为一体的功能复杂的重要器官。一旦肠功能衰竭,一方面,内环境平衡破坏,营养代谢障碍;另一方面,肠粘膜屏障受损,引起肠原性感染和内毒素血症。对于无胃的鲤科鱼类,肠粘膜不但在对食物的消化、吸收上至关重要,而且在免疫防御作用、代谢方面具有非常重要的作用,在鱼类生长和发育的过程中发挥着极其重要的作用。饲料营养物质、饲料中特定的成分如抗生素、多糖等对鱼类肠道粘膜的生长、发育产生重要的影响。马力等1989年和李玉和等1992年对淡水硬骨鱼类消化道进行了扫描电镜观察和报道,叶元土[106、107、108、109]等已经对草鱼、长吻鮠、南方大口鲶、黄鳝等鱼类的肠道进行了详细的扫描电镜观察和研究,但关于团头鲂肠道上皮组织的超微结构特征研究尚未见报道。本试验是在团头鲂摄食含有酵母培养物XP的饲料100天后,对其前肠、中肠粘膜表面形态结构进行扫描电镜观察,以探讨酵母培养物XP对团头鲂肠道粘膜生长、发育的影响。1材料与方法1.1试验鱼及分组团头鲂(Megalobramaamblycephala)购于苏州市新时代特种养殖场,为池塘培育的当年鱼种。试验鱼初始体重为9.20±0.2g。按体重接近的原则随机分为8组,每组设3个平行,共24个养殖桶,每桶放鱼15尾。1.2试验饲料使用实用饲料原料组成试验配方,粗蛋白质含量均为28%,见表1。主要原料为进口鱼粉、豆粕、棉粕、菜粕、麦麸、面粉、混合油(豆油菜油1:1)、预混料等。饲料原料经粉碎过40目筛,混合均匀后用小型颗粒饲料机加工成直径1.5㎜的颗粒饲料备用,饲料加工过程中温度保持在65℃~70℃,持续时间约40秒,饲料-4℃冰柜保存备用。酵母培养物XP共设0mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg、1500mg/kg、2000mg/kg、2500mg/kg的剂量梯度组,同时,设计含酵母培养物XP1000mg/kg、2000mg/kg两个间断投喂组,共计8个试验组,每个试验组设3个平行,合计24个养殖桶。酵母培养物在配方中增加时,相应减少面粉的用量,以保持配方总量的平衡。每个养殖桶与试验饲料的对应采用随机方法,以避免养殖桶位置不同带来的养殖效果的差异。表1基础饲料配方(风干基础,‰)和营养成分(风干基础,%)Table1Formulationandcompositionofexperimentaldiet(air-drybasis,‰,%)原料Ingredient0mg/kggroup500mg/kggroup1000mg/kggroup1500mg/kggroup2000mg/kggroup2500mg/kggroup麸皮wheatbran100100100100100100面粉wheatmiddling135134.5134133.5133132.5细米糠ricebran100100100100100100豆粕soybeanmeal46%606060606060菜粕rapeseedmeal235235235235235235棉粕cottonseedmeal235235235235235235鱼粉fishmeal303030303030肉骨粉meatandbonemeal202020202020磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2202020202020沸石粉Zeoliteflour151515151515膨润土Bentonite151515151515混合油mixedoil252525252525预混料Premix101010101010酵母培养物XPyeastcultureXP00.511.522.5合计Total(kg)100010001000100010001000成本cost(yuan/T,RMB)191619151914191419131912粗蛋白crudeprotein28.428.3928.3828.3728.3728.36可消化能digestibleenergy(MJ/Kg)2.632.632.632.632.632.63磷phosphorus1.451.451.451.451.451.45粗灰份crudeash11.2711.2711.2711.2711.2711.27粗纤维crudefiber7.267.267.267.267.267.25粗脂肪crudefat5.375.375.375.375.365.36Thedigestibleenergyiscalculatedvalue.Othernutrientlevelsaremeasuredvalues;Thepremixprovidesfollowingforperkgdiet:Cu:5mg·kg-1、Fe:180mg·kg-1、Mn:35mg·kg-1、Zn:120mg·kg-1、I:0.65mg·kg-1、Se:0.5mg·kg-1、Co:0.07mg·kg-1、Mg:300mg·kg-1、K:80mg·kg-1、VA:10mg·kg-1、VB1:8mg·kg-1、VB2:8mg·kg-1、VB6:20mg·kg-1、VB12:0.1mg·kg-1、VC:250mg·kg-1、VB3:20mg·kg-1、VB5:25mg·kg-1、VD3:4mg·kg-1、VK3:6mg·kg-1、叶酸(folocacid):5mg·kg-1、肌醇(inositol):100mg·kg-1;1.3饲养管理养殖试验在室内循环养殖系统进行,每桶水体0.33m3圆形养殖桶中养殖。以曝气的自来水为水源,每天换水量为总水量的1/3,以减少残余饲料与粪便对水体的影响,养殖水经过滤、沉淀后流回蓄水池,经过增氧由水泵抽回各养殖桶。在试验的后期(10月以后到试验结束)由于气温下降,采用电加热的方法控制水温。具体方法是用潜水式加热棒在水处理池进行加热,加热后的水进行各养殖桶,各养殖桶流出的水再汇集到水处理池进行过滤、加氧和加热,如此反复循环。饲养期间的水质条件为:水温26.5±3.0℃,DO>6.0mg·L-1,pH7.2±0.2,NH4+-N0.25±0.05mg·L-1,NO2—N0.04±0.01mg·L-1,硫化物<0.05mg·L-1。试验鱼经过食盐水浴消毒,暂养一周后开始正式试验,正式试验时间为2007年8月13日至11月30日1.4饲料投喂情况试验期间饲料每天投喂量为鱼体重的2.0%~3.0%,分3次投喂(8:00、12:30、17:00),根据摄食情况适当调整。间断组投喂具体操作方法为:投喂对照组饲料3周后,分别投喂含酵母培养物XP1000mg/kg、2000mg/kg试验饲料3周;之后又投喂对照组饲料3周,再分别投喂含酵母培养物1000mg/kg、2000mg/kg试验饲料3周;如此反复,直到试验结束。1.5小肠绒毛形态的观察1.5.1样品采集活体常规解剖腹部,取出肠道,按前、中、后肠分段。前肠为肠道第一个折点之前的部分,中肠为第一个折点和最后一个折点之间的部分,后肠为最后一个折点之后的部分。取前肠、中肠,取材部位均在每段中央部位,取1~2cm左右的肠管1~2块,纵向剖开并暴露肠粘膜的部分,用0.1mol/l(pH7.3)的磷酸缓冲液冲洗3~4次,然后,立即将其投入4℃的3%戊二醛溶液(pH7.4)中固定24~48h。取出洗涤,经适当修剪后,放入1%的锇酸钟后固定1小时,取出后缓冲液洗三次。乙醇系列梯度脱水,醋酸异戊酯置换,临界点干燥,镀膜(用常规扫描电镜制备方法制备),经扫描电镜观察并摄影。2试验结果2.1常规解剖观察前肠为第一个折点之前的部分,肠壁厚,肠管粗大,且硬度大,内容物多;中肠为第一个折点至第二个折点之间的部分,肠壁较前肠为薄,肠管变小,内容物较多;后肠为最后一个折点之后的部分,肠管较细,内容物少,偶有充气现象,冲气时肠管呈微白色,中肠的长度明显长于前肠和后肠,中肠是团头鲂消化、吸收食物的主要部位。解剖观察到试验用团头鲂肠道在腹腔中回旋盘转,排列复杂,从前肠到后肠,肠管直径逐渐变细,肠壁逐渐变薄。投喂酵母培养物XP的各试验组的常规解剖观察结果没有显著性的差异。2.2肠粘膜扫描电镜观察2.2.1肠粘膜褶皱各试验组团头鲂前肠粘膜褶皱扫描电镜结果见图版Ⅰ,前肠褶皱呈S或Z型,排列较为紧密。由图Ⅰ可见,从XP1500mg/kg组开始,随着酵母培养物XP添加量的增加,前肠褶皱排列更加逐渐紧密;褶皱表面粘附的食糜颗粒在XP1000mg/kg组有明显的增加,在2000mg/kg和2500mg/kg组更为明显;相同XP使用的连续与间断组相比较,间断组褶皱表面食糜颗粒明显少于对应连续试验组。各试验组团头鲂中肠粘膜褶皱扫描电镜结果见图版Ⅱ。对照组粘膜褶皱表面粘附的食糜颗粒较多,随着酵母培养物XP添加量的增加,粘膜褶皱排列更加逐渐紧密,尤其是在XP2000mg/kg组中肠褶皱排列更为紧密;各组表面附着颗粒也明显比前肠减少;相同XP使用的连续与间断组相比较,间断组褶皱形状逐渐变直,粘膜褶皱排列更加紧密。上述结果表明,在饲料中添加酵母培养物XP后,前肠、中肠的粘膜褶皱排列有更为紧密的趋势,在XP1500mg/kg组和2000mg/kg组最为明显,而在低剂量组(如500mg/kg组)和高剂量组(如2500mg/kg组)不明显;间断投喂组与连续投喂组相比较,在中肠的粘膜褶皱排列有更为紧密的趋势。2.2.2肠道粘膜绒毛密度各试验组的前肠粘膜扫描电镜结果见图版Ⅲ。根据各组电子显微镜照片,选取适宜的区域统计绒毛的数量,并计算绒毛的密度,结果见图表2。表2团头鲂肠道微绒毛密度(个/um2)Tab.2thedensityofintestinalvillusofMegalobrama
amblycephala组别group前肠密度个/um2villusdensityofforegut中肠密度个/um2villusdensityofmid-gut前、中肠平均密度个/um2averagevillusdensity0mg/kgthecontrolgroup78.279.078.6500mg/kgtheseriesgroup66.492.979.61000mg/kgtheseriesgroup73.488.781.11500mg/kgtheseriesgroup123.3139.8131.52000mg/kgtheseriesgroup95.983.589.72500mg/kgtheseriesgroup80.793.587.11000mg/kg间断组thedisconnectedgroup65.094.579.82000mg/kg间断组thedisconnectedgroup103.0100.5101.8结合图Ⅲ和表2结果,前肠对照组的绒毛密度较低少,其它各试验组粘膜绒毛的密度随酵母培养物XP的增加而有明显的变化,其中酵母培养物XP1500mg/kg连续组粘膜绒毛密度比对照组提高57.61%,为最高;酵母培养物XP2000mg/kg连续组和2000mg/kg间断组粘膜绒毛密度比对照组分别提高了22.62%和31.77%,而其它各组均无明显提高;相同XP使用的连续与间断组相比较,酵母培养物XP1000mg/kg间断组与相应的连续组相比降低了11.51%,而2000mg/kg间断组与相应的连续组相比则提高了7.46%。各试验组的中肠粘膜扫描电镜结果见图版Ⅳ。中肠对照组的绒毛排列也较为均匀,表面附着食糜颗粒较少,其它各试验组绒毛的密度均比对照组有所提高,其中连续组1500的绒毛密度最大,比对照组提高了76.96%,其它各组与对照组相比提高幅度在5.65%~27.27%之间;间断组1000与2000组与相应的连续组相比则分别提高了6.62%和20.47%。从前、中肠综合考虑来说,团头鲂肠道微绒毛呈规则的六边形簇状分布,前、中肠微绒毛密度基本相同。添加酵母培养物XP后,各试验组与对照组相比,绒毛密度有不同程度的提高,其中以连续组1500的效果最好,绒毛密度比对照组提高了67.33%,其中间断使用效果与连续使用相比并无显著差异。在摄食添加酵母培养物XP的饲料后,前肠、中肠粘摸粘膜绒毛密度均有不同程度的增加;前肠和中肠相比较,中肠粘摸粘膜绒毛密度变化较前肠的结果更显著;连续投喂组与间断投喂组相比较,在前肠XP1000mg/kg间断组与相应的连续组相比降低了11.51%,而2000mg/kg间断组与相应的连续组相比则提高了7.46%,而在中肠间断组1000与2000组与相应的连续组相比则分别提高了6.62%和20.47%。2.2.3肠道粘膜绒毛高度各试验组的前肠、中肠粘膜断面扫描电镜结果见图版Ⅴ、Ⅵ。根据电子显微镜照片,选取适宜的区域统计绒毛的高度,结果见图表3。表2团头鲂肠道粘膜绒毛高度(um)Tab.2TheheightoftheintestinalvillusofMegalobrama
amblycephala组别group前肠绒毛高度umheightofforegutvillus中肠绒毛高度umheightofmid-gutvillus前、中肠平均高度umaverageheightofvillus0mg/kgcontrolgroup1.141.321.231000mg/kgtheseriesgroup0.901.271.092000mg/kgtheseriesgroup1.461.351.402500mg/kgtheseriesgroup0.771.481.121000mg/kg间断组thedisconnectedgroup1.220.961.092000mg/kg间断组thedisconnectedgroup1.041.221.13从表3中我们可以看出,前肠微绒毛高度的变化受酵母培养物的增加而具有显著的变化,其中连续组2000mg/kg和间断组1000mg/kg微绒毛高度分别比对照组提高了28.26%和7.61%,其它各组则出现了不同程度的下降。而间断组1000mg/kg、2000mg/kg组与相应的连续组相比则分别提高了35.62%和降低了28.81%。中肠呈现同样的变化趋势,其中连续组2000mg/kg和2500mg/kg高度分别比对照组提高了1.87%和12.15%,其它各组也出现了不同程度的下降,间断组1000mg/kg与2000mg/kg组与相应的连续组相比则分别降低了24.27%和降低了9.17%。前、中肠综合考虑来说,团头鲂肠绒毛高度的顺序为中肠>前肠,这与聂国兴[1]等(2007)在小麦基础饲料添加木聚糖(xylan)酶后对尼罗罗非鱼肠道绒毛的影响得出的结论相似:肠绒毛高度的顺序为中肠>前肠>后肠。添加了酵母培养物,肠道粘膜绒毛高度发生显著性的变化,连续组2000mg/kg比对照组提高了14.07%外,其它各组均出现了高度降低的现象,但差异并不明显。间断组绒毛高度与相应连续组相比出现明显的降低趋势,表明间断使用效果不如连续使用。3讨论参考文献:[1]聂国兴,王俊丽,朱命炜,周洪琪.小麦基础饲料添加木聚糖酶对尼罗罗非鱼肠道食糜粘度和绒毛、微绒毛发育的影响[J].水产学报,2007,1(1):54-6110]刘观忠,安胜英,姜国均,等.酵母培养物对蛋雏鸡肠壁结构及免疫机能的影响[J].中国畜牧兽医,2005,32(2):10-12.
酵母培养物对团头鲂生长的影响李高锋收稿日期:作者简介:李高锋(1983-),男,汉,河南省襄城县人,广州市澳洋实业有限公司,硕士,主要从事水产动物营养与饲料学方面的研究。E-mail:lgf1983@126.com作者简介:叶元土(1964-),男,汉,四川广安人,收稿日期:作者简介:李高锋(1983-),男,汉,河南省襄城县人,广州市澳洋实业有限公司,硕士,主要从事水产动物营养与饲料学方面的研究。E-mail:lgf1983@126.com作者简介:叶元土(1964-),男,汉,四川广安人,苏州大学基础医学与生物科学学院,教授,主要从事水产动物营养与饲料学方面的研究。E-mail:yeyuant@*通讯作者:叶元土,E-mail:yeyuant@1.苏州大学基础医学与生物科学学院,苏州215123;2.广州市澳洋实业有限公司,广州5105453;3.达农威生物发酵工程技术有限公司,深圳518038摘要:本试验通过不同剂量梯度(0、500、1000、1500、2000、2500mg/kg)的酵母培养物连续投喂组和(1000、2000mg/kg)两个间断投喂组对团头鲂的养殖试验,研究酵母培养物在团头鲂养殖中的适宜添加量及其对生长、饲料效率、蛋白质效率的影响,同时比较分析酵母培养物在养殖过程中连续投喂与间断投喂对生长等方面的影响。选用初重为9g左右的团头鲂,随机分为8组、每组3个重复,每个养殖桶15尾鱼,以0mg/kg的投喂组为对照组,饲养100天,定期称重取样。试验结果表明,连续投喂组2000mg/kg的特定生长率SGR最高,且连续投喂组SGR均显著高于对应的间断投喂组(P<0.05);饲料系数FCR是连续投喂组2000mg/kg的最低,且连续投喂组FCR均低于对应的间断投喂组;蛋白质效率(PER)以连续投喂组2000mg/kg的最高,且连续投喂组(PER)均高于对应的间断投喂组(P<0.05);各组肥满度之间无显著差异(P>0.05),但内脏指数均明显小于对照组(P<0.05),鱼体可食部分明显增加(P<0.05);各组鱼肌肉、肝胰脏、全鱼中的蛋白含量均显著高于对照组(P<0.05),且连续投喂组均高于对应间断投喂组,连续投喂组2000mg/kg肌肉中蛋白最高。可以认为:在团头鲂饲料中,以2000mg/kg的酵母培养物添加剂量为适宜添加量,且连续使用的效果好于间断使用。关键词:酵母培养物;生长;团头鲂酵母培养物是一种复杂的发酵产品,它是根据微生物代谢理论及生物发酵技术生产的含有多种代谢产物成分的纯天然产品。在反刍动物、猪、禽养殖领域应用较为普遍并为人们所熟悉,但在水产养殖生产在中的应用相对较晚,作为一种天然的发酵产品,酵母培养物在维持鱼虾的存活能力和促进鱼虾的生长方面具有相当大的应用潜力,同时,由于具有良好的耐热性、不受制粒加工的影响,因此在水产饲料中添加使用非常方便。目前为止,国内外对酵母培养物在鱼类养殖生产中的应用方面还仅局限于鲤鱼、鲢鱼、斑点叉尾鮰、银鲫、罗非鱼、鳗鱼、牙鲆、红鳟鱼等几个鱼种。而在虾养殖生产的应用方面则主要集中在南美白对虾和沼虾两个品种上[1,2,3]。团头鲂是我国特有的淡水名优经济鱼类,作为养殖试验对象,对酵母培养物的开发利用具有重大意义。本试验通过不同剂量梯度连续投喂组和间断投喂组对团头鲂的养殖试验,研究酵母培养物在团头鲂养殖中的适宜添加量及其对生长、饲料效率、蛋白质效率的影响,同时比较分析酵母培养物在养殖过程中连续使用与间断使用的养殖效果,为团头鲂配合饲料的优化提供理论依据。1材料与方法1.1试验鱼及分组团头鲂为当年池塘养殖鱼种,试验鱼初重为9.20±0.2g,体质健壮。按体重接近的原则随机分为8组,每组均设3个平行,共24个养殖桶,每桶放鱼15尾。1.2试验饲料使用生产实用饲料原料组成试验配方,粗蛋白质含量均为28%,见表1。主要原料为进口鱼粉、豆粕、棉粕、菜粕、麦麸、面粉、混合油(豆油菜油1:1)、预混料等。用实验颗粒机加工成Φ1.5㎜的硬颗粒饲料,作为本试验基础饲料。共设0、500、1000、1500、2000、2500mg/kg的剂量梯度投喂组,1000、2000mg/kg两个间断投喂组,累计8个试验组,每个试验组设3个平行,合计24个养殖桶。酵母培养物在配方中增加时,相应减少面粉的用量,以保持配方总量的平衡。每个养殖桶与试验饲料的对应采用随机方法,以避免养殖桶位置不同带来的养殖效果的差异。表1基础饲料配方和营养成分(风干基础,%)Table1Formulationandcompositionofexperimentaldiet(air-drybasis,%)原料Ingredient0mg/kg组group500mg/kg组group1000mg/kg组group2000mg/kg组group2500mg/kg组group麸皮wheatbran100100100100100100面粉wheatmiddling135134.5134133.5133132.5细米糠ricebran100100100100100100豆粕soybeanmeal46%606060606060菜粕rapeseedmeal235235235235235235棉粕cottonseedmeal235235235235235235进口鱼粉fishmeal303030303030202020202020磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2202020202020沸石粉Zeoliteflour151515151515膨润土Bentonite151515151515混合油mixedoil252525252525预混料Premix101010101010酵母培养物yeastculture00.511.522.5合计(公斤)Total(kg)100010001000100010001000成本(元/吨)cost191619151914191419131912粗蛋白crudeprotein28.428.3928.3828.3728.3728.362.632.632.632.632.632.63磷phosphorus1.451.451.451.451.451.45粗灰份crudeash11.2711.2711.2711.2711.2711.27粗纤维crudefiber7.267.267.267.267.267.25粗脂肪crudefat5.375.375.375.375.365.36消化能根据原料组成计算所得,其余为实测值;预混料可为每kg全价料提供。Thedigestibleenergyiscalculatedvalue.Othernutrientlevelsaremeasuredvalues;Thepremixprovidesfollowingforperkgdiet:Cu:5mg·kg-1、Fe:180mg·kg-1、Mn:35mg·kg-1、Zn:120mg·kg-1、I:0.65mg·kg-1、Se:0.5mg·kg-1、Co:0.07mg·kg-1、Mg:300mg·kg-1、K:80mg·kg-1、VA:10mg·kg-1、VB1:8mg·kg-1、VB2:8mg·kg-1、VB6:20mg·kg-1、VB12:0.1mg·kg-1、VC:250mg·kg-1、VB3:20mg·kg-1、VB5:25mg·kg-1、VD3:4mg·kg-1、VK3:6mg·kg-1、叶酸(folocacid):5mg·kg-1、肌醇(inositol):100mg·kg-1;饲料原料经粉碎过40目筛,混合均匀后用小型颗粒饲料机加工成直径1.5㎜的颗粒饲料备用,饲料加工过程中温度保持在65~70℃,持续时间约1min。1.3饲养管理养殖试验在室内循环养殖系统进行,每桶水体0.33m3圆形养殖桶中养殖。以曝气的自来水为水源,每天换水量为总水量的1/3,以减少残余饲料与粪便对水体的影响,养殖水经过滤、沉淀后流回蓄水池,经过增氧、控温后由水泵抽回各养殖桶。饲养期间的水质条件为:水温26.5±3.0℃,DO>6.0mg·L-1,pH7.2±0.2,NH4+-N0.25±0.05mg·L-1,NO2—N0.04±0.01mg·L-1,硫化物<0.05mg·L-1。试验鱼经过药浴消毒,暂养一周后开始正式试验。试验期间每天投喂量为鱼体重的2.0%~3.0%,分3次投喂(8:00、12:30、17:00)。根据摄食情况适当调整,本养殖试验共100天。1.4取样与测定方法饲养试验结束后,停食24h后测定每桶鱼的总体重和尾数,计算特定生长率、饲料系数、蛋白质效率;随机抽取8尾鱼测量体长、体高与体重,计算体长/体高、肥满度;并解剖取内脏团称重,计算内脏指数;同时取肌肉和肝胰脏测定粗蛋白;另外每缸随机取3尾测定全鱼粗蛋白。特定生长率(%/d)=100×(Ln末均重一Ln初均重)/饲养天数饲料系数(FCR)=每个缸投喂饲料总量/每个缸鱼体总增重量蛋白质效率(PER%)=100×每个缸鱼体增重量/每个缸饲料蛋白摄入量体长/体高=鱼体长度/鱼体高度肥满度=100×体重(g)/[体长(cm)]3内脏指数(%)=100×内脏重/体重饲料、原料水分采用80℃恒温干燥失重法测定;灰分采用马福炉灰化法测定;粗蛋白采用微量凯氏定氮法测定。1.5数据处理试验结果采用“平均值±标准差”表示,统计分析采用SPSS11.5软件,用Duncan’s多重比较分析试验结果的差异显著性,显著水平为0.05。2试验结果2.1生长速度在本试验中,统计了2007年8月19日至11月30日、共100天的特定生长率见表2。由表中可以得到以下结果。⑴在各组中,以连续投喂组2000mg/kg团头鲂的特定生长率均最大,比对照组高11.64%。⑵根据表中的结果可以直观的表现出,在养殖43天、72天、100天时各投喂组的生长速度均出现下降的趋势,经过统计分析,100天与43天时相比较,各组生长速度下降22.3%-32.2%,除1000mg/kg组外,其余各组之间的下降幅度无显著性差异(P>0.05)。⑶比较1000mg/kg组、2000mg/kg组的连续投喂和间断投喂组的结果表明,1000mg/kg组、2000mg/kg组的连续投喂组团头鲂的特定生长率显著高于间断投喂组(P<0.05)。表2酵母培养物对团头鲂特定生长率(SGR)的影响,%/dTable2EffectofYeastCultureontheweightofspecialgrowthrate(SGR)ofMegalobrama
amblycephala注:上标为不同字母者表示差异显著(P<0.05),以下同;*括号内的数据为生长速度与对照组的比较结果(%)。Meanswithdifferentsuperscriptswithinthesamelevelofthesamecolumnaresignificantlydifferent(P<0.05),Thesameasbelow;*Comparedwiththecontrolgroup(%)2.2饲料效率统计分析了100天各试验组的饲料系数和蛋白质效率,结果见表3和表4。由表3可以得到以下结果。⑴以连续投喂组2000mg/kg的饲料系数为最低,比对照组低14.13%,在其它两个时间段分别低于对照组9.87%、6.17%,其他部分组高于对照组。⑵随着养殖时期的延长,各组的饲料系数有逐渐增加的趋势。⑶间断投喂组的饲料系数高于连续投喂组。表3试验组与对照组饲料系数Table3Feedconversionrate(FCR)ofthetreatmentgroupsandthecontrolgroup表4可以得出以下结果:⑵随着养殖时期的延长,各组的蛋白质效率均呈现下降趋势。⑶连续投喂组蛋白质效率高于间断投喂组。表4试验组与对照组蛋白质效率Table4Proteinefficiencyratio(PER)ofthetreatmentgroupsandthecontrolgroup2.3形体指标于试验结束时测定各组团头鲂主要形体指标,结果见表5,从表中可以看出:连续投喂组2000mg/kg的肥满度与对照组无差异(P>0.05),而脏体比小于对照组,鱼体可食部分增加;其它各试验组肥满度、脏体比均比对照组有不同程度下降;各组体长体高比均大于对照组,但无显著差异(P>0.05)。
表5团头鲂主要形体指标Table5MainformandstructureofMegalobrama
amblycephala组别Group肥满度%fullnessindex%内脏指数%Internalorganindex%体长/体高Length/High0mg/kgthecontrolgroup1.88±.107.41±.572.46±.12500mg/kgtheseriesgroup1.83±.08bc6.69±.64ab2.50±.081000mg/kgtheseriesgroup1.79±.10ab6.84±.74ab2.49±.121500mg/kgtheseriesgroup1.84±.08bc6.59±.422.47±.112000mg/kgtheseriesgroup1.88±.107.20±.80bc2.52±.11ab2500g/ttheseriesgroup1.82±.14bc6.39±.702.48±.15间断组1000mg/kgthedisconnectedgroup1.73±.116.51±.732.59±.12b间断组2000mg/kgthedisconnectedgroup1.85±.14bc6.81±.73ab2.48±.162.4体成分从表5中可以看出,肌肉、肝胰脏、全鱼中的蛋白含量均显著高于对照组(P<0.05),肌肉中以2000mg/kg的连续投喂组的81.35%最高,这说明酵母培养物能较好地提高鱼体中蛋白质的含量。表6试验组与对照组蛋白质含量,%Table6Contentofproteininthetreatmentgroupsandthecontrolgroup组别Group肌肉Muscle肝胰脏Hepatopancreas全鱼Carcass0mg/kgthecontrolgroup76.5±1.0945.9±1.245.3±0.66a500mg/kgtheseriesgroup81.4±0.74bc50.6±2.69d51.0±0.59e1000mg/kgtheseriesgroup81.1±0.17bc51.4±1.91e51.9±0.69e1500mg/kgtheseriesgroup81.32±0.43bc47.9±0.41bc49.8±0.43d2000mg/kgtheseriesgroup81.35±1.24bc47.5±3.43bc51.1±1.11e2500mg/kgtheseriesgroup80.9±0.36b48.7±1.87bc47.4±4.13bc1000mg/kg间断组thedisconnectedgroup80.9±0.91b46.5±0.77b46.3±0.09b2000mg/kg间断组thedisconnectedgroup80.3±1.25b47.2±2.73bc47.9±0.79bc3讨论酵母培养物主要通过酵母代谢物发挥作用,它包括变性的培养基(含肽、寡糖等)、酵母细胞本身和细胞外代谢物(含营养代谢物、增味物质和芳香物质等),特别是其代谢物由于能为消化道微生物提供丰富的营养,故对水产动物的生长与健康更重要[4,5],由于水生动物的生存状况与微生物之间的关系更为密切并且受到环境应激因素的影响也更多,因此对肠道内微生物的代谢活性和能力以及菌系之间的代谢平衡和生态环境的调控也有更高的要求。酵母培养物在水生动物上的应用表现出较陆生动物更为显著的效果可能与此有关。3.1酵母培养物对团头鲂生长效果分析3.1.1酵母培养物添加量与团头鲂生长速度之间的关系由表2的结果可以看出,在100天的养殖时间中,团头鲂的生长速度并不与饲料中酵母培养物添加量成正比例关系,表现为低剂量组和高剂量组的生长速度均低于对照组,而适宜剂量2000mg/kg连续投喂组的生长速度则明显比对照组高11.64%,且较为稳定,这与我们以前对斑点叉尾鮰、中华绒螯蟹的情况类似。例如,养殖43天时,连续投喂组500mg/kg和2500mg/kg的生长速度分别比对照组低1.02%和5.09%,而连续投喂组1000mg/kg、1500mg/kg、2000mg/kg的生长速度分别比对照组高7.28%、1.59%、12.95%;养殖100天时,连续投喂组500mg/kg、1000mg/kg的生长速度分别比对照组低7.12%、6.79%,而连续投喂组1500mg/kg、2000mg/kg、2500mg/kg的生长速度分别比对照组高0.78%、11.64%、1.08%。至于是什么原因会出现这种情况则有待进一步的研究。3.1.2连续投喂组团头鲂生长速度优于间断投喂组比较1000mg/kg组、2000mg/kg组的连续投喂和间断投喂组的结果表明,1000mg/kg组、2000mg/kg组的连续投喂组团头鲂的生长速度均显著高于间断投喂组的结果(P<0.05)。表现为在养殖43天时,连续投喂组1000mg/kg、2000mg/kg的生长速度分别为1.49±0.08%/d、1.57±0.16%/d,而间断投喂组分别为1.33±0.25%/d、1.35±0.01%/d;在养殖100天时,1000mg/kg组、2000mg/kg组的连续投喂组的生长速度分别为1.01±0.06%/d、1.21±0.12%/d,而间断投喂组分别为0.88±0.14%/d、1.03±0.07%/d。如果与对照组进行比较,2000mg/kg连续投喂组团头鲂的生长速度始终高于对照组9.66%-12.95%,1000mg/kg连续投喂组的结果只是在养殖43天时高于对照组7.28%,之后的结果均低于对照组。而对于间断投喂组的结果,1000mg/kg组、2000mg/kg组在不同时期的结果均低于对照组。上述结果表明,饲料中酵母培养物的连续投喂并未影响到团头鲂的生长速度,而以4周为一个周期的间断投喂含有和不含有酵母培养物的饲料,对团头鲂的生长速度是不利的,在实际生产中应该采用连续使用酵母培养物,而不宜采用间断使用的方式。3.1.3随着养殖时期的延长,团头鲂的生长速度逐渐下降根据表的结果作图得到图的结果可以直观的表现出,在养殖43天、72天、100天各试验组的生长速度均下降,经过统计分析,100天与43天相比较,各组生长速度下降22.3%-32.2%,除1000mg/kg组外,其余各组之间的下降幅度无显著性差异(P>0.05)。随着养殖时期的延长,团头鲂的生长速度下降主要是养殖水温和季节变化的结果。本试验的养殖试验时间从2007年的8月13日开始,到12月结束全部养殖试验,气温和水温均是逐渐下降的,到10月中旬后采用对水体加温的方式保持水温在22℃左右,这对团头鲂的生长速度变化产生了较大的影响。本试验主要是比较饲料中添加酵母培养物与不添加酵母培养物的养殖效果,属于相对比较,这种水温、季节的变化对这种相对比较的影响对试验组、对照组是均衡的,而对于我们分析饲料中酵母培养物的养殖效果影响不大。3.2酵母培养物对团头鲂饲料效率效果分析⑴各组饲料系数、蛋白质效率的变化与生长速度的变化趋势基本一致,与对照组比较,也是以连续投喂组2000mg/kg的效果最好,特定生长率比对照组高11.64%,饲料系数平均比对照组低14.13%,蛋白质效率平均比对照组高13.44%,并且肌肉中蛋白含量比对照组高6.3%。但变化趋势并不与饲料中酵母培养物的添加量成反比例或正比关系,而是呈现一个最佳适宜值,这与以前的结果类似。⑵连续投喂组饲料系数均低于间断投喂组的,蛋白质效率均高于间断投喂组。这与团头鲂生长速度的变化趋势一致,表明间断投喂含酵母培养物的饲料在实际生产中是不宜采用的。⑶随着养殖时期的延长,各组的饲料系数增加,蛋白质效率呈现下降趋势这与本试验的养殖季节、水温变化有较大的关系,对于我们分析饲料中酵母培养物的养殖效果影响不大。4结论①在团头鲂饲料中,酵母培养物以添加2000mg/kg剂量可以取得很好的生长速度、饲料效率、和蛋白质效率,养殖100天的生长速度较对照组提高11.64%、饲料系数下降14.13%,蛋白质效率提高13.44%,这个添加量可以在实际生产中参考使用。②酵母培养物在团头鲂饲料中连续使用的效果较好,而以4周为间断期的间断使用效果不好,建议在实际生产中连续使用,不要间断使用。③鱼体生长速度、饲料效率、蛋白质效率、形体指标、体成分等并不与饲料中酵母培养物的添加量呈现正相关关系,在低剂量如500mg/kg和高剂量组如2500mg/kg的效果均不理想,出现低于对照组结果的情况,而在2000mg/kg表现出很好的生长效果,同时增加了鱼体可食部分,提高了肌肉中蛋白质含量。类似结果在已经进行的其他试验中也出现,具体原因有待进一步的研究。参考文献:[1]PENGYF,ZHENYG,Theapplicationofyeastcultureinthebreed[J].FeedIndustry,2008,29(10):30-33.[彭一凡,甄玉国.酵母培养物及其在养殖业中的应用[J].饲料工业,2008,29(10):30-33.][2]ZHOUSQ,SUNWZ.YeastCulture[J].ChinaFeed,2003(5):31-32.[周淑芹,孙文志.酵母培养物[J].中国饲料,2003(5):31-32.][3]XINGBS,WANGXQ.EffectofyeastcultureonthereproductiveperformanceofSows[J].cereal&FeedIndustry,2004(11):37-38.[邢宝松,王修启.酵母培养物对母猪繁殖性能的影响[J].粮食与饲料工业,2004(11):37-38.][4]XUYS,LEIXQ.TheapplicationofyeastcultureYikang“xp”inthebreed[j].JournalofHenanUniversityofScience&Technology,2003,23(1):51-53.[徐延生,雷学芹.益康XP酵母培养物在养殖业上的应用[J].河南科技大学学报,2003,23(1):51-53.][5]SHIJZ.Theresearchadvancementofyeastculture]J].FeedIndustry,1998,19(3):11-14.[时建忠.酵母培养物研究进展[J].饲料工业,1998,19(3):11-14.][6]M.E.Barnes,D.J.Durben,S.G.Reeves&R.Sanders.DietaryyeastculturesupplementationimprovesinitialrearingofMcConaughystrainrainbowtrout[J].AquacultureNutrition,200612:388-394.
EffectofYeastCultureongrowthofMegalobrama
amblycephalaLIGao-feng1,2YEYuan-tu1,ZHANGJun1,CAIChun-fang1,LIJing1,ZHUGEYan1,ZENGYu-guo3(1.CollegeofPreclinicalMedicineandandLifeScience,SoochowUniversity,Suzhou215123;2.GuangzhouAoyangIndustrialCo.,Ltd.,Guangzhou5105453;3.DiamondVBiological&FermentationEngineeringTechnologiesCo.,Ltd,Shenzhen518038)Abstract:A100-daysfeedingexperimentwasconductedtostudytheeffectofdifferentlevelsofYeastCulture(0,500,1000,1500,2000,2500mg/kg)andthedisconnectedgroup(1000,2000mg/kg)indietaryonthegrowth、feedefficiency、proteinefficiencyratio(PER)ofMegalobrama
amblycephala,andcomparedtheeffectofseriesgroupwiththedisconnectedgroup.Thefish(anaverageof9g),wererandomlyassignedtoeightdietarytreatmentswiththreereplicatesandfifteenfishwitheachpen.The0mg/kgYeastCultureisthecontrolgroup,takeresultastimed.TheresultsshowedthattheSGRoftheseriesgroup2000mg/kgishigherthantheothergroup,theseriesgrouparehigterthantheparallelismdisconnectedgroup(P<0.05);theFCRoftheseriesgroup2000mg/kgisthelowest,theseriesgrouparelowerthantheparallelismdisconnectedgroup;thefullnessindexofthetreatmentgrouphavenosignificantdifferencewiththethecontrolgroup(P>0.05),however,theInternalorganindexissmallerthanthecontrolgroupsignificantly(P<0.05).Theproteininmuscle、hepatopancrea、
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