W3401试剂的准备和配置2微

试剂的准备与配制—高锰酸钾吸收曲线的绘制仪器分析技术主要内容测定条件的选择1分光光度法定性定量的原理2高锰酸钾溶液的配制3分光光度计的使用41测定条件的选择试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制1.测定波长的选择2.吸光度范围的选择3.参比溶液的选择一、测定条件的选择配制一浓度适当的溶液，在分光光度计上，依次以不同的波长的入射光通过该溶液，测定吸光度（用A表示）。然后以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标，在坐标纸或计算机上作图，可得到一条曲线。这条A-λ曲线称为该溶液的吸收曲线或称吸收光谱曲线。试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制物质的吸收曲线是分光光度法选择测定波长的重要依据。通常是选择λmax为测定波长，以提高测定的灵敏度，但若在λmax处有干扰时，在保证灵敏度的前提下，也可选择其他波长。1.测定波长的选择2.吸光度范围的选择3.参比溶液的选择一、测定条件的选择根据朗伯-比耳定律，当A=0.434时，浓度的相对误差最小。吸光度读数在0.2-0.8时，浓度的相对误差小于4%。控制的方法有：控制样品的称样量或稀释倍数来调节试液浓度。选用不同厚度的比色皿。试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制1.测定波长的选择2.吸光度范围的选择3.参比溶液的选择一、测定条件的选择溶剂参比：以纯溶液作为参比溶液，比如蒸馏水。 试剂参比：不加入样品，同样加入试剂与溶剂的混合液。样品参比：只是不加入显色剂的混合液作参比溶液。平行操作参比：不含被测组分的样品，在相同的条件下与被测样品同时进行处理，得到平行操作参比溶液。试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制2分光光度法定性定量的原理试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制定性分析基础定量分析基础物质对光的选择吸收：不同物质吸收光谱不同；相同物质吸收光谱相同ABA在一定条件下，物质对光的吸收与物质的浓度成正比。一定的物质，浓度增加，λmax不变，吸收程度成比例增加AC增大二、分光光度法定性定量的原理试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制3高锰酸钾溶液的配制试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制三、高锰酸钾溶液的配制试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制称取1.6g高锰酸钾于小烧杯中，加入少量水，溶解后转入1000ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，贴上标签。该溶液的高锰酸钾的浓度约为0.01mol/L。0.01mol/L高锰酸钾溶液配制思考：配制0.0001mol/L高锰酸钾溶液100ml，问：需要量取0.01mol/L高锰酸钾溶液多少ml？如何操作？4分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制使用方法1注意事项2四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制使用方法1接通电源，打开仪器电源开关，打开样品室盖，预热10min;将空白液或对照液及测定液分别装入比色杯3/4体积并用擦镜纸擦净外壁，放入样品室内,空白液一般放于最外格，样品比色杯放入位置与试管位置对应;调好波长;调节按钮开盖时，调T参数调为100

合上盖，调A参数调为0;逐步拉出样品室拉杆（听到“咔”一声），读取吸光度值(A）；读数完打开样品室盖，再将读数写入记录本。四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制样品室盖应轻开轻放；比色皿拿其磨砂面，液体装入约3/4高度，并用擦镜纸擦净外壁，每次用完后自来水冲洗干净，倒置于滤纸上；倒取试剂时不能在仪器表面上方操作，仪器上请勿放任何物品；每调换一次波长，都应将空白溶液的吸光度调至“0”。注意事项2UV1600紫外可见分光光度计操作步骤

四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制1.打开电源（开关在仪器的左下侧）；2.按任意键（除复位键外）仪器进行自检；3.待自检结束，按任意键进入主菜单；4.进入主菜单后，按数字键2，进入光度测量；UV1600紫外可见分光光度计操作步骤

四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制5.按F1进入参数设置菜单，将参数设置如下：比色皿校正关（开）换灯点356.5样池数7波长数1UV1600紫外可见分光光度计操作步骤

四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制6.参数设置好后，按GOTO键进入设置检测波长界面，进入该界面后，输入所需的检测波长，按ENTER键确认。按RETURN键返回参数设置菜单，再按RETURN键返回至光度测量主操作界面。UV1600紫外可见分光光度计操作步骤

四、分光光度计的使用试剂的配制与准备—高锰酸钾吸收曲线的绘制7.将参比放在8号样池，将样品放在1-7号样品池内，盖上