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文档简介
肠杆菌科概述埃希菌属第一页,共五十七页,2022年,8月28日教学大纲肠道杆菌的共同特征及分类引起肠道感染的大肠埃希菌种类和致病特点大肠埃希菌的微生物学检查法大肠埃希菌的卫生细菌学检查及其意义第二页,共五十七页,2022年,8月28日EnterobacteriaceaeAheterogeneousgroupofG-rodsTheirnaturalhabitatistheintestinaltractofhumansandanimals(entericbacilli)FacultativeanaerobesoraerobesMostarenormalfloraRegularpathogenforhumans:Salmonella,Shigella,someE.coliMorethan30genera,120species第三页,共五十七页,2022年,8月28日Newfindingsingastrointestinalbacteria2006,Nature,JeffreyGordon,directoroftheCenterforGenomeSciencesatWashingtonUniversitySchoolofMedicineinSt.Louis,Missouri,andhisgraduatestudentBuckSamuelMethanobrevibactersmithii(M.smithii)DiscoveryChannel“GutBacteriaDetermineFatorThin”“I’mnotfat,I’mjustgotfatbacteria”第四页,共五十七页,2022年,8月28日返回第五页,共五十七页,2022年,8月28日肠杆菌科细菌的生物学特征形态与结构中等大小G-杆菌无芽胞周鞭毛菌毛培养兼性厌氧或需氧营养要求不高菌落混浊生长第六页,共五十七页,2022年,8月28日肠杆菌科细菌的生物学特征生化反应:活泼生化鉴定(biochemicaldifferentiation):发酵葡萄糖;触酶阳性;氧化酶阴性;硝酸盐还原阳性乳糖发酵致病菌:多不发酵乳糖非致病菌:多发酵乳糖第七页,共五十七页,2022年,8月28日O-F试验氧化型发酵型产碱型第八页,共五十七页,2022年,8月28日氧化酶试验
阳性:紫红色
阴性:无色第九页,共五十七页,2022年,8月28日硝酸盐还原试验
阳性:红色阴性:淡黄色
第十页,共五十七页,2022年,8月28日复杂的抗原构造O(菌体)抗原LipopolysacchrideH(鞭毛)抗原FlagellaK抗原荚膜Vi抗原InSalmonellaTyphi,thecapsularantigeniscalledViantigen第十一页,共五十七页,2022年,8月28日抵抗力:不强易变异:多种引起通过接合转导融原性转换耐药性变异毒力性变异生化反应性变异第十二页,共五十七页,2022年,8月28日致病物质所致疾病临床意义返回第十三页,共五十七页,2022年,8月28日菌毛或菌毛样结构荚膜或微荚膜外膜蛋白内毒素外毒素致病物质第十四页,共五十七页,2022年,8月28日所致疾病
肠道感染腹泻、食物中毒、肠热症肠道外感染鼠疫(烈性传染病)、泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症返回第十五页,共五十七页,2022年,8月28日鉴定原则
1.科间鉴别(表9-3)2.将肠杆菌科分为三大类(表9-4)3.属、种、群、型的区分4.肠杆菌科细菌综合鉴定流程返回第十六页,共五十七页,2022年,8月28日科间鉴定:根据O/F试验、氧化酶试验、菌体形态和有无鞭毛科内鉴定:生化鉴定分为3个组PAD:苯丙氨酸脱氨酶;VP/葡萄糖酸盐利用试验PAD阴性、VP阴性PAD阴性、VP阳性PAD阳性、VP阴性属间鉴定第十七页,共五十七页,2022年,8月28日肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
第十八页,共五十七页,2022年,8月28日苯丙氨酸脱氨酶试验
阳性:绿色阴性:黄色第十九页,共五十七页,2022年,8月28日葡萄糖酸盐试验
阳性:黄绿色阴性:蓝色返回第二十页,共五十七页,2022年,8月28日第14章
埃希菌属
Escherichia第二十一页,共五十七页,2022年,8月28日案例女,31岁,尿频、尿痛3天。
3天前开始出现尿频、尿痛,自觉尿有异味;体检:全身皮肤粘膜正常,耻骨联合上有触痛;尿常规检查:白细胞10-15个/视野,并有多量细菌问题:1.尿标本革兰染色最可能发现什么性质的细菌?2.这类感染的最常见病原体是什么?3.病原体侵犯尿道的机制是什么?第二十二页,共五十七页,2022年,8月28日埃希氏菌属(Escherichia)是人类和动物肠道中的正常菌群以大肠埃希氏菌(E.coli)最为重要出生后数小时就进入肠道,并终生伴随重要的实验材料和研究对象:在分子生物学和基因工程实验中大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象第二十三页,共五十七页,2022年,8月28日形态染色0.4-0.7µm1-3µm短杆菌革兰染色阴性有鞭毛有菌毛第二十四页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌革兰染色第二十五页,共五十七页,2022年,8月28日培养特性与生化反应兼性厌氧营养要求不高生化反应活泼,发酵多种糖类绝大多数发酵乳糖典型E.coli:
IMViC:++--第二十六页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌菌落特征(血平板)第二十七页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌菌落特征(MAC)第二十八页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌ABC肠道杆菌:A.大肠埃希菌纯培养镜下特征(革兰染色)B.大肠埃希菌在血琼脂平板上的菌落特征(18-24h)C.大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上的菌落特征(18-14h)医学微生物学第二十九页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希杆菌呈典型粉红色,乳糖发酵菌落。福氏痢疾杆菌菌落小,无色透明,非乳糖发酵菌。(18hr,37℃)在麦康凯培养基上的大肠埃希杆菌和福氏痢疾杆菌第三十页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)第三十一页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌IMViC试验(++--)
右侧为对照(--++)
第三十二页,共五十七页,2022年,8月28日抗原结构O(菌体)抗原:170种以上H(鞭毛)抗原:56种以上K(荚膜)抗原:100种以上O111:K58:H2第三十三页,共五十七页,2022年,8月28日致病性致病物质1、侵袭力K抗原和菌毛与侵袭力有关。K抗原能抗吞噬,菌毛(又称定植因子)有粘附作用。2、内毒素3、肠毒素由ETEC产生的外毒素,可分为耐热肠毒素(ST)和不耐热肠毒素(LT)两种。均由质粒介导。LT与霍乱肠毒素作用机理相似,可使肠道细胞中cAMP的水平升高,ST可使细胞内cGMP量增多,因而引起肠液大量分泌而导致腹泄。第三十四页,共五十七页,2022年,8月28日另外还有Vero毒素,又称志贺样毒素,由溶原性噬菌体介导,为EHEC产生。作用使核糖体灭活,终止蛋白质合成。肠集聚耐热毒素为EaggEC产生,可导致大量液体分泌。所致疾病:1、肠道外感染条件致病菌感染,大肠杆菌移位至肠外组织或器官引起肠道外感染,以泌尿系统感染为主,如尿道炎、膀胱炎、败血症等。尿路感染每ml尿菌量≥10万,可诊断。2、肠道感染表现为急性腹泻,为致病性大肠杆菌感染所致,主要有五种类型:第三十五页,共五十七页,2022年,8月28日肠产毒性大肠杆菌(ETEC):定植因子+LT+ST,引起婴幼儿和旅游者腹泻。肠致病性大肠杆菌(EPEC):粘附素+内毒素,是婴儿腹泻的主要病原菌。肠侵袭性大肠杆菌(EIEC):侵袭力+内毒素,多侵犯较大儿童和成人,疾病类似菌痢。肠出血性大肠杆菌(EHEC):
Vero毒素+菌毛,5岁以下儿童易感,引起血性腹泻。肠集聚性大肠杆菌(EaggEC):粘附素+毒素,引起婴儿持续性腹泻。第三十六页,共五十七页,2022年,8月28日肠产毒素型大肠埃希菌(ETEC)致病物质肠毒素(LT和ST)菌毛粘附素(adhesin)内毒素K抗原所致疾病5岁以下婴幼儿腹泻旅游者腹泻第三十七页,共五十七页,2022年,8月28日肠致病型大肠埃希菌(EPEC
)致病性破坏刷状缘不产生肠毒素及其他外毒素无侵袭力所致疾病婴幼儿腹泻,热带国家、医院常流行水性腹泻Gutlumen第三十八页,共五十七页,2022年,8月28日肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)致病物质不产肠毒素,侵袭结肠粘膜上皮细胞ShigelloidE.coli:EIEC无动力、生化反应和抗原结构似Shigella所致疾病主要侵犯较大儿童和成人腹泻呈脓血便,有里急后重第三十九页,共五十七页,2022年,8月28日肠出血型大肠埃希菌(EHEC)vero毒素型大肠埃希菌致病物质菌毛:粘附作用毒素:vero毒素所致疾病出血性结肠炎溶血性尿毒综合征(HUS)5岁以下儿童易感,病情轻重不一1982年美国发现,后世界各地均有流行血清型为O157:H7第四十页,共五十七页,2022年,8月28日The“lifecycle”ofE.coliO157:H75-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms第四十一页,共五十七页,2022年,8月28日E.coliO157:H71982-firstrecognizedasapathogen1985-associatedwithhemolyticuremicsyndrome1990-outbreakfromdrinkingwater1991-outbreakfromapplecider1993-multi-stateoutbreakfromfastfoodhamburgers1995-outbreakfromfreshproduce1996-outbreakinJapan-multi-stateoutbreakfromunpasteurizedapplejuice第四十二页,共五十七页,2022年,8月28日肠集聚型大肠埃希菌EAggEC致病物质毒素粘附素所致疾病引起婴儿持续性腹泻,脱水,偶有血便第四十三页,共五十七页,2022年,8月28日第四十四页,共五十七页,2022年,8月28日(一)检验程序
(二)标本采集(三)检验方法
(四)耐药性
(五)结果分析与报告微生物学检验第四十五页,共五十七页,2022年,8月28日大肠埃希菌检验程序第四十六页,共五十七页,2022年,8月28日肠外感染:标本分离培养涂片染色鉴定(生化反应(IMViC等)腹泻:粪便鉴别培养基分离培养鉴定检测肠毒素毒力因子血清型微生物学检查法第四十七页,共五十七页,2022年,8月28日检验方法1.显微镜检查2.分离培养3.鉴定ETECEPECEIECEHECEagg
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