水样采集与实验室分析的质量控制PPT课件教材讲义

水样采集与实验室分析

的质量控制2006年8月14日安宁温泉采样数据现场调查---采样点确定----水样采集---水样保存和运输----实验室测试----数据处理可靠数据的获取是一个复杂的系统工程。只有每个环节都做到了质量保证，才可能实现数据的可靠。所以说数据的质量是整个监测机构科学管理水平和检测技能的综合体现。主要内容—质量控制的四个环节实验室准备工作水样的采集和保存实验室的分析质量控制省专家组的实时督导一、实验室准备工作（1）实验用水试剂的选择和存放采样和实验器皿的洗涤标准溶液的配置和管理仪器的维护及运行状态一、实验室准备工作（2）1.1实验用水的质量要求:我国GB6682-92规定分析实验室用水分三个等级：一级水：将二级水经过石英设备蒸馏或离子交换混合床处理后，再经0.2μm滤膜过滤制取。一级水用于制备标准水样或超痕量物质的分析。如高效液相色谱分析用水。

二级水：将三级水进行再蒸馏的方法制备。用于无机痕量分析等试验，如原子吸收分析用水。三级水：适用于一般实验工作。可用蒸馏、反渗透或离子交换等方法制备。一、实验室准备工作（3）1.2实验室用水的注意事项:空气中二氧化碳等的溶入和容器的污染，其电导率会迅速变化。玻璃可溶出多种无机物，而塑料溶出的有机物在紫外线有吸收，这些物质都影响到纯水的质量。因此一级水不能储存，二级水、三级水也应尽快使用。比如一、二级水的电导率≤0.1，三级水≤0.5；吸光度（254nm，1cm光程），一级水≤0.001

、二级水≤0.01。一、实验室准备工作（4）1.3特殊要求的实验用水:因空气中含有微量氨与二氧化碳，因而对有特殊要求的实验用水，建议用新制备的纯水，使用相应的技术条件处理和检验。不含氨的水不含二氧化碳的水不含酚的水不含有机物的水一、实验室准备工作（5）2.1所用试剂的注意事项:

由于受光、热的作用，或受实验室空气中的水汽、酸、灰尘微粒及可能含有氨、氯化氢、氮氧化物、碘等气体和多种金属物质的影响，环境和储存条件的不同，特别是开瓶取用频繁程度不同，其稳定时间也不同。这就需要使用者注意实验结果，如空白、滴定度、标准曲线等是否有改变而决定提前重新校准或更换。比如氨水放置期中吸收了苯胺类物质，会使空白值增高等。实验室常使用氯仿、四氯化碳等溶剂，对测定卤代烃的试验将造成污染。一、实验室准备工作（6）

3.1实验器皿的洗涤要求洗去各种玷污物质,包括金属、非金属以及有机物质。通常用水膜不破裂来衡量。1．未使用过的新玻璃器皿，应先用一般洗涤剂刷净，再经浓硝酸浸泡24小时，最后用水洗净使用。2．塑料器皿不能用强氧化剂洗涤。硝酸和盐酸对不同重金属的浸出率不同,建议顺序使用二种酸洗涤塑料容器。所有器皿在用后应立即洗净，尤其具磨口塞的。一、实验室准备工作（7）采样瓶的清洗原则1．新的采样瓶，应经硝酸浸泡。测铬的水样瓶不能用铬酸清洁液洗涤，应以合成洗涤剂洗后用硝酸浸泡。用铬酸清洁液浸泡后必须用自来水冲洗7～10次，再用纯水淋洗8～10次。2．盛过高浓度组分的容器不易洗净,最好不用盛放过高浓度某种组分的水样瓶。3．用于微生物检验水样的容器：容器及瓶塞、瓶盖应能经受灭菌的温度。为了除去余氯，在灭菌前向容器里加入硫代硫酸钠以还原余氯。一、实验室准备工作（8）4.1标准溶液的配置及管理(1)．必须使用一级水配制。(2)．所使用的分析天平、滴定管、容量瓶及吸管等量器必须定期检定和校正。(3)．标准物质超过有效期，或发现有异常、变质等情况时，应停止使用。(4)．严禁与普通试剂混放，必要时应冷藏，使用前应将温度恢复至常温。使用时注意保存期限并时刻注意其变化情况。等等……一、实验室准备工作（9）5.1仪器的维护及运行状态校验每台分析仪器是否合乎使用需要的精密度和偏差最小，依照仪器说明书及法定计量监督管理部门的规定，定期检定，如天平、电导仪和光度计等仪器。所有的指标校验检查都要直接记录在仪器维修档案里。以保证其运行状态良好。二、水样的采集和保存(1)

采样的原则:1.采集的水样，必须具有代表性，能真实反映水质状况。

2.在实验室分析之前水样中待测成分保持不变。

二、水样的采集和保存(2)盛装水样容器的选择原则

可用硼硅玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶或桶，必须能用塞或盖紧紧密封。具体要求：1．容器不能是新的污染源。从塑料可溶出增塑剂、未聚合的单体等，而玻璃器皿可溶出硼、硅、钙、镁等。所以测金属的水样多选用聚乙烯塑料瓶。测有机物的水样一般只能用玻璃瓶。2.容器壁不应吸收或吸附某些待测组分。3．容器不应与待测组分发生反应。例如氟化物与玻璃。二、水样的采集和保存(3)采样体积取决于所分析项目的多少以及选用的测定方法。分析常规水质项目，只需要3—5升水样。取样量应能满足欲测项目的需要，还要留有余地。二、水样的采集和保存(7)

水样的保存水样从采集到分析这段时间里，由于物理的、化学的或生物的作用会发生不同程度的变化，必须采取相应的保存方法，努力将这些改变降到最小限度。有些组分可迅速改变，如游离余氯、pH值、水温和溶解性气体等最好在现场采样后立即定。二、水样的采集和保存(9)影响水质变化的因素：１．生物作用：

微生物的代谢活动会改变水中溶解氧、硝酸盐、亚硝酸盐和氨氮等的含量和部分有机物的浓度。

２．化学作用：测定组分可能被氧化或还原。价态的改变可导致一些沉淀与溶解、聚合物的产生或解聚作用的发生。３．物理作用：光照、温度、静置或振动、敞露或密封保存，这些条件及容器材料都会使一些成分发生改变。二、水样的采集和保存(8)目前水样保存的方法只限于冷藏（冷冻）和加入化学保存剂。1．冷藏：水样采集后放在暗处约4℃保存，可抑制微生物活动，并减缓物理与化学变化的速率。2．加入化学保存剂：加入某种化学剂以稳定水样中的一些待测组分，应注意空白值的校正。因酸化后的水样可将容器中微量金属和悬浮微粒中金属的溶出。

存放水样的容器和水样保存方法项目容器保存方法及可保存时间色度、臭、昧和浑浊度玻璃瓶冷藏,24h内测定pH玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶最好现场测定,冷藏,6h内测定总硬度玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶加硝酸至PH<2,可保存6个月砷玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶(A)加硫酸至

pH<2,可保存

7天余氯玻璃瓶现场测定氨氮、硝酸盐氮和耗氧量玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶每升水样加０.8mL浓硫酸冷藏,24h内测定亚硝酸盐氮玻璃瓶或玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶冷藏,尽快测定（不能超过48h）氟化物聚乙烯塑料瓶无要求,28天氯化物、硫酸盐玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶冷藏,28天细菌总数、总大肠菌群玻璃瓶(消毒)冷藏,4h检验。如有游离余氯应在采样瓶消毒前每125mL水样加0.1mL硫代硫酸钠溶液（100g/L）现场采样的质量保证（1）1．现场测试(pH值和电导率等)后的水样不能再带回实验室用于其它项目的检测。2．采样瓶必须专瓶专用。切不可用实验室盛装过浓溶液或化学试剂的瓶子作采样瓶。3．采样瓶需完全充满，不留气泡空间。4.必须选用推荐的保存方法。可将相同保存方法的水样划为同一水样组,以减少错加保存剂和对保存剂产生交叉污染的可能。5.水样应尽快送达实验室，如是汽车运输要注意避免放置在发动机附近。6.采样工作人员保持手的清洁。工作时严禁吸烟。现场采样的质量保证（２）现场采样的质量保证除规范采样步骤外，还需分析空白样和平行样。占总采样量的10%--20%。空白样：以测试保存剂的纯度；检查采样过程中采样容器、滤纸、过滤器或其它设备的污染情况，以便发现从采样到分析这段时间内产生的误差。平行样：采集重复水样，检查采样的再现性。三.

实验室分析质量控制(1)化学测试是一个很复杂的过程，分析质量受到多种因素的影响和制约。其中包括检测方法、技能、质量政策、机构管理、仪器检定和人员水平等。必须加强各环节的分析质量控制。三.

实验室分析质量控制(2)1.实验室内质量控制（QC）

目的在于控制分析人员的实验误差,使之达到规定的范围。2.实验室间质量控制

在控制分析测试的随机误差达到最小的情况下，进一步控制系统误差。三.

实验室分析质量控制(3)常规室内的质控程序:1.平行样的分析:反映测试的精密度,控制随机误差。2.加标回收分析:加标样的数目占样品数量的10%--20%，实验室内常用的确定准确度的方法。3.密码样分析:随机抽取10%--20%的样品编为密码样。是对实验重复性的检查。4.室内互检:同一实验室不同人员间的相互检查和比对。5.方法比较分析:同一样品不同方法的测定比较。6.质量控制图的绘制:直观了解分析误差的动态变化情况。三.

实验室分析质量控制(4)常规室间的质控程序:1.建立工作机构:上级单位实验室组织2.指定计划方案:实施范围内容及方式等3.标准溶液的校准:基准比对,发现和消除系统误差4.统一样品的测试:测试样品,包括平行及空白样5.实验室间质量控制考核报表及数据处理6.向参加单位通知测试结果目的是增加数据的可比性，降低系统误差。三.

实验室分析质量控制(5)本次调查对实验室的要求:1.核对采样单编号、地点和填写内容等。2.校准曲线制作:标准系列最好是新近配置的,测定需与样品同时进行，并观察量值变化情况。要求系列点≥6;相关系数≥0.999。3.干扰实验:了解可能存在的共存物,是否对测定有干扰4.空白值和平行样的测定:每次检验都需测定10%的平行双样和空白样，并与水样结果同时上报这两项结果。5.准确度控制:采用标准样品作为控制手段,每批样品至少同时测定一个标准样品,其结果应控制在90%--110%范围。6.精密度控制:将所插入的标准样品做6次精密度实验，并达到相应项目允许差的要求。实验数据的处理一、有效数字:熟悉有效数字修约规则和计算规则二、可疑数据判断:可疑数据取舍原则及检验方法三、检测数据间的相关性分析:水样测定值的精密度和准确度允许差

水质微生物检验的质量控制与化学检验不同，水质微生物检验的对象是不断地变化的生物体，不能用参考标准，仪器校正和质量控制图等方法来评价检验结果。微生物实验室的质量保证程序：比如用质量控制制度来明确地规定管理人员的职责，使用标准化的检验方法，以及仪器设备、试剂培养基等的管理与规范使用,从而使检验数据的质量有客观的保证。微生物实验室内部质量控制一、工作环境条件二、仪器设备三、实验室供应品材料四、培养基

等方面要符合有关要求水中微生物检验指标1.细菌总数:平皿计数法2.总大肠菌群:多管发酵法和滤膜法细菌总数检测过程中的质量控制（1）（1）检验中所用的一切用品必须是完全灭菌的。在灭菌前应彻底洗涤干净，121℃高压蒸汽灭菌20min，或160℃干烤2h。培养基和稀释液按规定要求进行高压蒸汽灭菌。（2）同时各接种空白样品、同一稀释度平行样品和不同稀释度的几个平板平皿作对照。（3）水样稀释时应小心沿管壁加入，不要触及管内稀释液，以防吸管尖端外侧部分粘附的检液混入其中。（4）将水样注入皿内时，从皿侧加入，不要揭去皿盖，最后将吸管直立使水流空，并在皿底干燥处再擦一下吸管尖将余液排出，而不要吹出。（5）为防止产生片状菌落，水样加入平皿后，在20min内向皿内倾入营养琼脂培养基，并立即混合均匀。（6）皿内琼脂凝固后，不要放置长久后才翻转培养，而应于琼脂凝固后，在数分钟内将平皿翻转进行培养，这样可避免菌落蔓延生长。细菌总数检测过程中的质量控制（2）菌落计数时，应先分别观察同一稀释度的两个平板和不同稀释度的几个平板内菌落的生长情况。

同一稀释度平行检测的两个平板上生长的菌落数应该接近；不同稀释度的几个平板上的菌落数应与检样稀释倍数成反比。反之,则可能是检验工作中存在差错，应查明原因予以纠正。总大肠菌群检测过程中的质量控制(1)

多管发酵法:①稀释度的选择：对低污染水样，选择10，1，.1ml

三个稀释度；怀疑水样有严重污染时，可用10倍稀释系列接种三个以上稀释度。②在接种前应将水样充分摇匀，使水中的细菌能均匀分布于水中，接种后摇动试管，使水样与培养基混匀。③乳糖发酵试验中常有产气量少或产酸不产气的情况，有时倒管内虽无气体但在液面及管壁却可以看到缓缓上浮的小气泡。④挑取菌落数与大肠菌群的检出率有密切关系，一定要挑取典型菌落，如无应多挑几个以防假阴性总大肠菌群检测过程中的质量控制(2)滤膜法:①滤膜法适用于检验自来水出厂水、管网水和未受污染的地下水等较清洁的水样。②品红和亚硫酸钠不稳定，须新鲜配置。故品红亚硫酸钠培养基应临用时再加入新配的碱性品红与亚硫酸钠混合液。亚硫酸钠水溶液须新鲜配置，煮沸灭菌，不可高压。③滤膜灭菌在标准中规定用水浴煮沸灭菌。但当滤膜用量过多或现场采样过滤时，煮沸灭菌不便，也可用高压蒸汽灭菌（115℃）或钴-60照射。高压蒸汽灭菌后的滤膜韧性减低，易破裂，在操作时应注意。报告方式细菌总数:《生活饮用水水质卫生规范》

限值:100CFU/ml;CFU为菌落形成单位稀释度选择及菌落总数报告方式详见:《生活饮用水卫生规范(2001)》P196.35项

报告方式总大肠菌群《生活饮用水水质卫生规范》

限值:每100ml水样中不得检出;计算滤膜上生长的总大肠菌群数,以每100mL水样中的总大肠菌群报告之(CFU/100mL).

数出的总大肠菌群菌落数×100

过滤的水样体积(mL)

详见:《生活饮用水卫生规范(2001)》P198.36项总大肠菌群菌落数(CFU/100mL)=四.省专家组的实时督导(1)1.校验标准溶液：

在各实验室开始检测工作之前,省专家组要对每个县实验室所使用的所有项目的标准溶液系列(包括空白)进行检查校验