医学微生物学课件：肠道杆菌Enterobacteriaceae

肠杆菌科

Enterobacteriaceae

一大群主要寄居肠道、生物学性状近似的Ｇ-杆菌；至少有30个菌属，120个菌种。大多数是肠道正常菌群或条件致病菌，少数为病原菌（伤寒沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌）。2EscherichiaShigellaSalmonellaEdwardsiellaCitrobacterKlebsiellaEnterobacterHafniaSerratiaProteusProvidenciaMorganellaYersiniaErwiniaPectinobacterium肠道感染共同的生物学特性形态与结构：Ｇ-杆菌，无芽胞，多有菌毛、鞭毛;抗原结构：复杂。生化反应：活泼，乳糖发酵试验；培养：营养要求不高，常用的选择鉴别培养基有：ＥＭＢ、ＳＳ、中国蓝培养基、麦康凯培养基和KI；抵抗力：弱；变异：易发生(耐药性、毒素产生、Ｈ-Ｏ变异、Ｓ-Ｒ变异)；菌体抗原（Ｏ抗原）：ＬＰＳ，具有种属特异性，失去后产生Ｓ-Ｒ变异。刺激机体产生IgM抗体。鞭毛抗原（Ｈ抗原）：蛋白质，失去后不能运动，Ｏ外露（Ｈ-Ｏ变异）。刺激机体产生IgG抗体。荚膜抗原（Ｋ抗原/Vi抗原）：多糖，位于Ｏ抗原外围，阻止Ｏ凝集。5E.colionSSplate

RedNeutralredistheindicatorforaciddetection,Red

andYellowE.coli

canfermentlactoseandproduceacid

Pathogenicenterobacteriacann’tfermentlactosebutcanusepeptonetoproducealkaline.PathogenicenterobacteriaonSSplate

Yellow6E.colionEMBplateE.colicanfermentlactoseandproduceacid.EosinandmethylenebluecombinetoformaprecipitateatacidpH,andthisprecipitateappearsgreen-blackwithmetallicsheen(紫黑色或紫红色，带金属光泽）Pathogenicenterobacteriacann’tfermentlactosesotheprecipitatecann’tbeformedandtheircoloniesstillappeartransparent7KIAagarWhenthecoloniesproduceacidfromfermentationofglucoseandlactose,thecolumnandslantappearYellow;Whenthebacteriaonlyfermentglucose,thecolumnappearYellow,butslantappearRed.DetectwhetherH2Sor

gaswasproduced埃希菌属

EscherichiaE.coli（大肠杆菌）是最常见的临床分离菌。寄居人或动物肠道；依据临床致病性和遗传特征分为：共生型（commensalgroup）：正常菌群；条件致病菌；基因工程中的主要工程菌；常作为水源、饮水、食物粪便污染的指标:

细菌总数：≤100CFU/ml饮水或饮料；

大肠菌群数：≤3CFU/L饮水,≤5CFU/100ml汽水或果汁腹泻型（diarrhealgroup）肠外型（extraintestinalgroup）一、生物学性状（一）形态结构（光镜）：多数周身鞭毛、普通菌毛、性菌毛，无芽胞，NMEC菌株有微荚膜(K)（二）培养特性：营养要求一般，兼性厌氧菌。（三）生化反应：IMViC(＋＋－－)；发酵乳糖产酸、产气。（四）抗原结构：Ｏ、Ｈ、Ｋ，血清学分型。EMB培养基SS培养基（一）致病物质1.菌细胞表面结构与成分：黏附素，类型多（定居因子，菌毛黏附素、紧密黏附素、集聚性黏附菌毛、P菌毛、BFP)2.抗吞噬：K抗原3.毒素内毒素外毒素：耐热和不耐热肠毒素(STandLT)志贺毒素(Stx)或Vero毒素二、致病性与免疫性12种

类疾病部位临床症状致病机制腹泻型肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）小肠水样腹泻毒素LT/ST、粘附肠致病性大肠埃希菌（EPEC）小肠水样腹泻粘附肠出血性大肠埃希菌（EHEC）结肠出血性结肠炎、溶血性尿毒症毒素Stx肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）结肠水样腹泻脓血便侵袭肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）

小肠、结肠水样持续性腹泻粘附弥漫性粘附大肠埃希菌（DAEC）小肠水样腹泻粘附肠外型尿致病性大肠埃希菌（UPEC）尿道尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎粘附、毒素新生儿脑膜炎大肠埃希菌（NMEC）脑膜新生儿脑膜炎侵袭,K抗原致病性大肠埃希菌的种类和主要特点二、致病性与免疫性14三、微生物学检查法标本采集分离培养与鉴定：1、肠外感染：涂片染色镜检

↓分离培养→生化鉴定*尿路感染需计数中段尿细菌总数，＞10万/ml2、肠内感染：SS、麦康凯培养基。（一）ETEC菌毛抗原：家畜腹泻病（二）治疗：早期纠正体液平衡，庆大霉素、丁胺卡那四、防治原则志贺菌属

Shigella食源性疾病（foodbornediseases）：指的是通过摄取食物和饮水而获得有毒物质或病原而导致的疾病，包括中毒性和感染性疾病。包括细菌、病毒和寄生虫.31种病原生物已经纳入食源性病原：大肠埃希菌（如O157:H7）、沙门菌、葡萄球菌、志贺菌、弧菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌（Bacilluscereus）、空肠弯曲菌、单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes）、耶尔森菌等细菌病原，诺瓦克病毒、甲型肝炎病毒（HAV）、轮状病毒等病毒病原，微小隐孢子虫（Cryptosporidiumparvum）、贾第鞭毛虫、刚地弓形虫（Toxoplasmagondii）等寄生虫病原。（一）形态结构：无芽胞、无鞭毛，有菌毛（二）生化反应：不发酵乳糖（三）抗原构造（O

Ag)与分类：一、生物学性状A群、痢疾志贺菌(S.dysenteriae,12serotypes)B群、福氏志贺菌(S.flexneri,6serotypes)C群、鲍氏志贺菌(S.boydii,18serotypes)D群、宋内志贺菌(S.sonnei,1serotype)（一）致病物质二、致病性与免疫性1.侵袭力：菌毛介导的粘附，其粘附、侵袭、扩散等活性编码于140MD的质粒2.内毒素：内毒素血症—发热、神志障碍。破坏肠粘膜—炎症、溃疡、粘液脓血便作用于肠壁植物神经系统。3.外毒素：A群Ⅰ、Ⅱ型可产生志贺毒素ST，具有三种生物学活性，肠毒性、细胞毒性、神经毒性。（二）所致疾病:细菌性痢疾shigellosis（三）免疫性：感染局限（sIgA），故免疫不牢固。二、致病性与免疫性急性：典型菌痢（发热、腹痛、里急后重、脓血便）中毒型菌痢。慢性：症状不典型。

20三、微生物学检查法标本：挑取粪便的粘液、脓血部分，中毒性痢疾患者可取肛拭。分离培养与鉴定：EMB、SS、生化反应和动力学试验。快速诊断法：玻片凝集试验等。SS培养基和动力试验沙门菌属Salmonella寄生在人类和动物肠道中，由一群生物特性与血清学相似或相关的细菌组成。沙门菌属在自然界分布广泛，种类繁多，已发现2500个以上血清型。有两个种，即肠沙门菌（S.enterica）和邦戈沙门菌（S.bongori）。能感染人类的沙门菌血清型约1400多种，都属于肠沙门菌肠道亚种。属于致病菌，具有广泛的动物宿主。很多血清型可引起人和/或动物的沙门菌病。是一种重要的人畜共患病（zoonoticinfections）引起人类的肠热症外，也是食物中毒和腹泻最常见的食源性病原菌。（一）形态结构：有菌毛，周身鞭毛，一般无荚膜，无芽胞。（二）变异性：耐药性、抗原、培养特性以及结构变异。（三）抗原构造：一、生物学性状O抗原：为沙门菌细胞壁中的LPS成分。O抗原为Ti抗原，刺激机体仅产生IgM型抗体。H抗原：存在于沙门菌的鞭毛蛋白中。H抗原为Td抗原，刺激机体产生的抗体以IgG为主。Vi抗原：位于菌体最表层，可阻止O抗原与其相应抗体的凝集反应。主要见于伤寒、希氏和都柏林沙门菌。Vi抗原的免疫原性弱，检测Vi抗体可用于带菌者的检出。（一）致病物质二、致病性与免疫性1、菌毛：黏附2、毒力岛SPI：决定侵入、存活和肠道外播散3、毒性质粒SPV：决定在网状内皮系统繁殖4、内毒素：内毒素效应5、肠毒素：如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素（二）所致疾病:（三）免疫性：细胞免疫是主要防御机制。伤寒或副伤寒病后有牢固免疫，很少再感染。二、致病性与免疫性1、肠热症：只感染人。包括伤寒沙门菌引起的伤寒，甲型副伤寒、氏、希氏沙门菌引起的副伤寒。无症状带菌者：１％～５％的患者症状消失后，1年仍可在粪便中检出沙门菌。2、胃肠炎（食物中毒）：由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌引起，发热、恶心、呕吐、腹痛、水样腹泻。3、败血症：高热、寒战、厌食、贫血、脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎。25三、微生物学检查法标本采集肠热症：依病程不同采取不同标本第1周取外周血１-3周取骨髓液第2周取粪便、尿液胃肠炎：粪便、呕吐物、可疑物败血症：血液肠道致病菌（SS培养基）分离培养与鉴定KI培养基：A大肠埃希菌

B志贺氏菌

C阴性对照KI培养基：A沙门氏菌

B变形杆菌

C阴性对照玻片凝集试验血清学诊断（Widal试验）原理：用已知伤寒沙门菌Ｏ抗原和Ｈ抗原以及甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌Ｈ抗原的诊断菌液与受检血清做定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。辅助诊断肠热症。正常值：伤寒Ｏ